多囊卵巢綜合征不孕癥患者血清睪酮水平變化及與機(jī)體氧化應(yīng)激的關(guān)系

鄭國(guó)華，王愛(ài)婷，李文欣，董天亮，張桂霞

(1濰坊市婦幼保健院，山東濰坊261011;2濰坊市濱海區(qū)婦幼保健院;3昌樂(lè)縣營(yíng)丘中心衛(wèi)生院)

多囊卵巢綜合征(PCOS)是一種好發(fā)于青春期和育齡期的內(nèi)分泌疾病，發(fā)病率為5% ～10%，血液中雄激素水平過(guò)高是其最基本的內(nèi)分泌特征，是引起不孕癥的常見(jiàn)原因［1］。De 等［2］報(bào)道，PCOS 患者不排卵是由于卵巢局部高濃度的雄激素直接引起的。女性體內(nèi)的雄激素主要有睪酮(T)、雄烯二酮、脫氫表雄酮、硫酸脫氫表雄酮等，其中T的活性最強(qiáng)。高雄激素血癥的成因目前還不十分清楚，國(guó)內(nèi)外研究認(rèn)為氧化應(yīng)激在PCOS的發(fā)生發(fā)展中起到重要作用。本研究對(duì)PCOS不孕癥患者血清中T水平進(jìn)行檢測(cè)，并分析血清T水平與機(jī)體氧化應(yīng)激指標(biāo)的關(guān)系，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2012年6月～2014年5月濰坊市婦幼保健院及濱海區(qū)婦幼保健院收治的PCOS不孕癥患者73例(觀察組)，年齡24～41(30.33±3.64)歲。PCOS診斷參照2003年5月歐洲人類生殖和胚胎醫(yī)學(xué)會(huì)與美國(guó)生殖醫(yī)學(xué)(ESHRE/ASRM)鹿特丹專家共同推薦的診斷標(biāo)準(zhǔn)［3］:①臨床出現(xiàn)偶發(fā)排卵或持續(xù)無(wú)排卵;②高雄激素血癥:血清總睪酮水平≥0.51 μg/L;③卵巢呈多囊樣改變:B超下至少有一側(cè)卵巢卵泡直徑達(dá)2～9 mm，卵泡≥12個(gè)，卵巢體積＞10 cm3;具備以上3條中的2條就可診斷為PCOS。不孕癥診斷參照世界衛(wèi)生組織(WHO)標(biāo)準(zhǔn)，即結(jié)婚后至少1 a、同居、有正常性生活、未采取任何避孕措施而未妊娠者［4］。另選同期來(lái)我院進(jìn)行孕前體檢的健康婦女70例(對(duì)照組)，年齡23～40(29.13±2.69)歲。兩組均適用以下排除標(biāo)準(zhǔn):患者有甲狀腺、腎上腺等內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病或合并心血管疾病、肝腎功能不全、惡性腫瘤等內(nèi)外科疾病，就診前3個(gè)月有激素類藥物使用史，隨診失訪或發(fā)現(xiàn)無(wú)完整就診資料。

1.2 血清T、SOD活性、8-iso-PGF2a檢測(cè) 所有受試者均在知情同意的情況下于月經(jīng)周期第3天(月經(jīng)紊亂者可在B超檢查未見(jiàn)優(yōu)勢(shì)卵泡時(shí))8:00～10:00抽取空腹靜脈血待測(cè)。采用電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)血清T，儀器使用羅式E411電化學(xué)發(fā)光分析儀，試劑為原裝配套試劑，實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格按操作規(guī)程操作。采用黃嘌呤氧化酶法檢測(cè)血清超氧化物歧化酶(SOD)活性，即標(biāo)本采集后離心分離血清并置于－40℃低溫冰箱保存，3個(gè)月內(nèi)進(jìn)行測(cè)定。試劑盒由南京建成生物工程研究所提供，按說(shuō)明書(shū)步驟加入樣品和試劑，溫育40 min，加入顯色劑，室溫靜置10 min，550 nm比色，計(jì)算結(jié)果。采用雙抗體夾心免疫酶法檢測(cè)血清8-iso-PGF2α，即血清分離后置于－40℃低溫冰箱保存，3個(gè)月內(nèi)進(jìn)行測(cè)定;試劑盒由德國(guó)DRG公司生產(chǎn)，儀器應(yīng)用Anthos 2010酶標(biāo)儀。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以±s表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)。采用Spearman相關(guān)分析法分析血清T與SOD活性、8-iso-PGF2a的關(guān)系。P≤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

兩組血清T、SOD活性、8-iso-PGF2a比較見(jiàn)表1。Spearman法分析顯示，T與SOD活性呈負(fù)相關(guān)(r= －0.631，P ＜0.05)、與 8-iso-PGF2α 呈正相關(guān)(r=0.687，P ＜0.05)。

表1 兩組血清T、SOD活性、8-iso-PGF2a比較(±s)

表1 兩組血清T、SOD活性、8-iso-PGF2a比較(±s)

注:與對(duì)照組比較，▲P ＜0.01。

組別 T(μg/L) SOD活性(U/mL)8-iso-PGF2a(ng/L)觀察組 1.04 ±0.69▲ 57.57± 9.28▲ 187.22±21.82▲對(duì)照組0.28 ±0.15 100.73 ±14.48 66.13 ± 7.85

3 討論

PCOS是育齡婦女最常見(jiàn)的內(nèi)分泌紊亂性疾病，是一種典型的卵泡發(fā)育障礙性疾病，血液循環(huán)中高水平的雄激素是PCOS患者卵巢多囊改變和卵泡發(fā)育障礙的主要內(nèi)分泌環(huán)境，嚴(yán)重影響顆粒細(xì)胞的分化，同時(shí)增加顆粒細(xì)胞對(duì)LH的反應(yīng)能力，導(dǎo)致卵泡發(fā)育停滯［5］。持續(xù)的高雄激素導(dǎo)致持續(xù)的卵泡排卵及發(fā)育障礙，臨床表現(xiàn)為月經(jīng)失調(diào)和育齡期不孕癥。文獻(xiàn)［6］報(bào)道，50% ～70%的PCOS患者可出現(xiàn)雄激素過(guò)多的癥狀。本文結(jié)果顯示，觀察組有高雄激素血癥者34例，約占46.57%。

PCOS不孕癥患者高雄激素血癥的成因尚不十分清楚，國(guó)內(nèi)外研究認(rèn)為氧化應(yīng)激在PCOS的發(fā)生發(fā)展中起到重要作用。牛志宏等［7］通過(guò)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，PCOS患者卵泡液內(nèi)存在氧化應(yīng)激狀態(tài)的異常。氧化應(yīng)激在妊娠和不孕癥發(fā)病機(jī)制中的作用也引起廣泛關(guān)注。Bedaiwy等［8］報(bào)道，卵泡液內(nèi)氧化應(yīng)激狀態(tài)與卵子質(zhì)量及卵胞漿內(nèi)單精子顯微注射技術(shù)助孕患者的妊娠結(jié)局有關(guān)聯(lián)。SOD被認(rèn)為是機(jī)體最重要的抗氧化酶，在保護(hù)機(jī)體免受氧化應(yīng)激損傷中起著重要作用，檢測(cè)其活性可以了解機(jī)體的氧化應(yīng)激水平。Jenkins等認(rèn)為，SOD活性與妊娠關(guān)系密切。8-iso-PGF2α是細(xì)胞膜上的酯化花生四烯酸受到自由基攻擊后裂解而形成的脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物，因合成和釋放持續(xù)穩(wěn)定，水平不受飲食中脂質(zhì)和藥物的影響，大量的臨床和實(shí)驗(yàn)研究顯示8-iso-PGF2α可作為評(píng)價(jià)體內(nèi)氧化應(yīng)激的敏感指標(biāo)。本研究顯示，觀察組血清SOD活性顯著低于對(duì)照組，而8-iso-PGF2a水平高于對(duì)照組，且T與SOD活性呈負(fù)相關(guān)、與8-iso-PGF2α呈正相關(guān)，提示氧化應(yīng)激狀態(tài)的存在可能是造成PCOS患者雄激素水平升高的重要因素，其機(jī)制有待進(jìn)一步研究。人體內(nèi)雄激素合成及代謝受多種酶的調(diào)控，例如CYP17復(fù)合酶就是雄激素合成中的關(guān)鍵酶，氧化與抗氧化的失衡有可能影響酶的活性從而影響雄激素合成與代謝。有研究認(rèn)為，脂質(zhì)過(guò)氧化物與PCOS的發(fā)病有關(guān)，在生理調(diào)節(jié)下，雄激素可能改變氧化劑—抗氧化劑的平衡而導(dǎo)致局部雄激素水平升高。

［1］馬曼華，王旭東.多囊卵巢綜合征中醫(yī)診療研究進(jìn)展［J］.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，12(1):97.

［2］De Leo V，Lanzetta D，D'Antona D，et al.Hormonal effects of flutamide in young women with polycystic ovary syndrome［J］.J Clin Endocrinol Metab，1998，83(1):99-102.

［3］The Rotterdam ESHRE/ASRM-Sponsored Pcos Consensus Workshop Group.Revised 2003 consensus on diagnostic criteria and long-term health risks related to polycystic ovary syndrome(PCOS)［J］.Hum Reprod，2004，19(1):41-47.

［4］Montoya JM，Bernal A，Borrero C.Diagnostics in assisted hum an reproduction［J］.Reprod Biomed Online，2002，5(2):198-210.

［5］Jerome Strauss，吳效科.多囊卵巢綜合征可能是原發(fā)性卵泡?。跩］.醫(yī)學(xué)研究生報(bào)，2006，19(11):1040-1043.

［6］Huang A，Brennan K，Azziz A.Prevalence of hyperandrogenemia in the polycystic ovary syndrome diagnosed by the NIH 1990 criteria［J］.Fertil Steril，2010，93(6):1938-1941.

［7］牛志宏，吳丹丹，谷瑞環(huán)，等.多囊卵巢綜合征患者體重指數(shù)與卵泡液氧化應(yīng)激指標(biāo)的相關(guān)研究［J］.中華內(nèi)分泌代謝雜志，2012，28(8):627-630.

［8］Bedaiwy MA，Elinashar SA，Jeffrey M，et al.Effect of follicular fluid oxidative stress parameters on intracytoplasmie sperm injection outcome［J］.Gynecol Endoerinol，2012，28(1):51-55.