安嗽化痰丸質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

張秀麗，鄭 凱

(遼寧省朝陽(yáng)市食品藥品檢驗(yàn)所，遼寧 朝陽(yáng) 122000)

安嗽化痰丸收載于《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)·中藥成方制劑(第六冊(cè))》，是由浙貝母、知母、玄參、麥冬等9 味藥制備而成的丸劑，具有清肺化痰、潤(rùn)肺止嗽之功效，用于陰虛肺熱引起的咳嗽痰盛、氣短喘促、咽干口渴、勞傷久咳、痰中帶血等癥。由于原標(biāo)準(zhǔn)過(guò)于簡(jiǎn)單，且無(wú)有效的質(zhì)量控制方法。為此，參閱文獻(xiàn)[1-5]，對(duì)安嗽化痰丸的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行研究，建立了測(cè)定浙貝母含量的高效液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(HPLC-ELSD)法，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

e2695 型高效液相色譜儀(美國(guó)Waters 公司);ELSD2424 型蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(美國(guó)Waters 公司)。貝母素甲對(duì)照品(批號(hào)為110750 -201110)，貝母素乙對(duì)照品(批號(hào)為110751 -201110)，均購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所;安嗽化痰丸(北京同仁堂科技發(fā)展股份有限公司，批號(hào)為13040780，13040785，13030811);乙腈為色譜純，二乙胺為分析純，水為超純水。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

色譜柱:Kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm;5 μm);流動(dòng)相:乙腈-水-二乙胺(70 ∶30 ∶0.03);柱溫:28 ℃;流速:1.0 mL/min;漂移管溫度:50 ℃;氣流(壓縮空氣):400 Pa。在此條件下的色譜圖見(jiàn)圖1。

2.2 溶液制備

精密稱取貝母素甲對(duì)照品和經(jīng)五氧化二磷減壓干燥12 h 以上的貝母素乙對(duì)照品適量，加甲醇制成每1 mL 含貝母素甲0.2 mg，貝母素乙0.15 mg 的混合溶液，作為對(duì)照品溶液。取重量差異項(xiàng)下的供試品，剪碎，取約8 g，精密稱定，置燒瓶中，加濃氨試液10 mL 浸潤(rùn)1 h，精密加入三氯甲烷-甲醇(4 ∶1)50 mL，稱定質(zhì)量并混勻，置80 ℃水浴中，加熱回流2 h，放冷，再稱定質(zhì)量，加上述混合溶液補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液10 mL，置蒸發(fā)皿中蒸干，殘?jiān)蛹状际谷芙獠⑥D(zhuǎn)移5 mL，加甲醇至刻度，搖勻，0.45 μm 濾膜濾過(guò)，即得供試品溶液。按處方工藝制備不含浙貝母的陰性樣品，按供試品溶液制備方法制備陰性對(duì)照品溶液。

2.3 方法學(xué)考察

陰性干擾試驗(yàn):取2.2 項(xiàng)下陰性對(duì)照品溶液20 μL，注入高效液相色譜儀。結(jié)果待測(cè)峰與其他峰分離度良好，按貝母素甲峰計(jì)算理論板數(shù)均不低于5 000。色譜圖見(jiàn)圖1。

線性關(guān)系考察:分別精密吸取對(duì)照品溶液1，5，10，15，20 μL，分別注入液相色譜儀，測(cè)定峰面積。以進(jìn)樣量(X)為橫坐標(biāo)、色譜峰面積(Y)為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程，貝母素甲為Y=619 014.5X-3 261 902(r=0.999 5)，貝母素乙為Y=327 206.9 X-182 254.5(r=0.999 3)。結(jié)果表明，貝母素甲和貝母素乙進(jìn)樣量分別在0.206 0 ～4.120 0 μg，0.155 1 ～3.102 0 μg 范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關(guān)系。

精密度試驗(yàn):精密吸取同一對(duì)照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6 次，進(jìn)樣20 μL，測(cè)定峰面積。結(jié)果的RSD 分別為0.85%，0.98%(n=6)，表明儀器精密度良好。

重復(fù)性試驗(yàn):取同一批(批號(hào)為13040780)樣品8 g，按供試品溶液制備方法平行制備6 份溶液，依法測(cè)定。結(jié)果貝母素甲和貝母素乙含量的RSD 分別為0.65%和0.86%(n=6)，表明方法重復(fù)性良好。

穩(wěn)定性試驗(yàn):取同一供試品溶液(批號(hào)為13040780)20 μL，按擬訂色譜條件，分別于0，2，4，8，12，24 h 時(shí)測(cè)定。結(jié)果含量的RSD 分別為0.89%，1.01%(n=6)，表明供試品溶液在24 h 內(nèi)穩(wěn)定。

加樣回收試驗(yàn):取己知含量的樣品(批號(hào)13040780，貝母素甲含量為0.568 4 mg/g，貝母素乙含量為0.383 1 mg/g)6 份，每份約4 g，精密稱定，分別精密加入貝母素甲對(duì)照品和貝母素乙對(duì)照品，按供試品溶液方法制備溶液，依法測(cè)定含量并計(jì)算回收率。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 加樣回收試驗(yàn)結(jié)果(n=9)

2.4 樣品含量測(cè)定

取3 批樣品，依法測(cè)定，采用外標(biāo)兩點(diǎn)法計(jì)算樣品中貝母素甲與貝母素乙的含量。結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 樣品含量測(cè)定結(jié)果(按每丸含藥量計(jì))

3 討論

浙貝母為安嗽化痰丸方中君藥，原標(biāo)準(zhǔn)未對(duì)其進(jìn)行質(zhì)量控制。由于浙貝母的活性成分貝母素甲與貝母素乙在紫外區(qū)幾乎無(wú)吸收，故采用HPLC-ELSD 法對(duì)其進(jìn)行定量分析[6-8]。

漂移管溫度與氣體流量選擇:對(duì)漂移管溫度為40，50，60，70 ℃和氣體流量為300，400，500 Pa 進(jìn)行了考察。結(jié)果表明，漂移管溫度為50 ℃、氣體流量為300 Pa 時(shí)，基線無(wú)噪音，分離度較好。

流動(dòng)相選擇:分別采用甲醇-水(70 ∶30)、乙腈-水(70 ∶30)、乙腈-水-二乙胺(68 ∶32 ∶0.03)、乙腈-水-二乙胺(70 ∶30 ∶0.03)作為流動(dòng)相進(jìn)行樣品分離。結(jié)果表明，乙腈-水-二乙胺(70 ∶30 ∶0.03)作為流動(dòng)相，色譜峰分離度最好。

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