人參附子有效成分強心作用的研究

李慶玲，趙 帥，孫樂婷，劉小龍，王楚盈，李玉梅，李超英，張大方

(長春中醫(yī)藥大學，長春130117)

人參乃“補氣之圣藥”，其主要藥效成分是人參皂苷［1］，近代研究［2］證明，人參皂苷對心血管系統(tǒng)的多種疾病如缺血性心臟病、心力衰竭等方面均有臨床意義。附子被譽為“回陽救逆第一要藥”［3］。主要藥效成分是生物堿，其作用于心臟，能促進心肌收縮，擴大心搏出量。其中烏頭堿類生物堿即是活性成分，還是毒性成分，有文獻報道［4］附子與其他藥物配伍使用可明顯提高動物對烏頭堿類生物堿的耐受性。因此，本實驗通過比較從人參、附子、人參與附子水煎液中提取的有效成分的強心作用，進一步證明了附子配伍使用不僅具有降低毒性的功效，還可提高其強心作用。

1 材料

1.1 藥品與試劑 人參、附子各50 g煎煮3次，40 min/次，濃縮(0.2 g/mL生藥量)。人參濃縮液用水飽和正丁醇萃取［5］，減壓回收試劑，得人參總皂苷浸膏3 g，附子濃縮液用氯仿萃?。?］，減壓回收試劑，得總生物堿浸膏0.46 g。戊巴比妥鈉(上海愛紫特生物科技有限公司，批號060719)，烏拉坦(曹楊第二中學化工廠，批號860225)。

1.2 儀器 蛙心套管，肌張力傳感器(中國北京航天醫(yī)學工程研究所)，BL-410生物機能系統(tǒng)(成都泰盟科技有限公司)，MP-15016道生理記錄儀(美國Biopac公司)，MP-2003注射泵(上海雷恩醫(yī)療器械有限公司)，小動物呼吸機(HX-300S成都泰盟科技有限公司)。

1.3 動物 蟾蜍(60±10)g，雌雄兼用，Wistar大鼠(240±20)g，雄性(均購自吉林大學實驗動物中心)，合格證號:SCXK(吉)-2011-0004。

2 方法

2.1 對離體蛙心強心作用 選蟾蜍(60±10)g雌雄兼有，隨機分為8個給藥劑量組，每組10只。按文獻［7］記載方法制備離體心臟標本，保持蛙心套管內任氏液體積為0.8 mL，連接BL-410操作系統(tǒng)。記錄振幅波形穩(wěn)定10 min后，分別加入0.2、0.4、0.8、1.0、1.2、1.6、2.4、2.8 g/mL 生藥量［8］的人參總皂苷(ZG)，附子總生物堿(SWJ)和人參總皂苷和附子總生物堿配伍(0.5∶1)的藥液20 μL。觀察記錄給藥前后的振幅，計算差值。

2.2 對心衰大鼠血流動力學的影響 實驗方法:雄性SD大鼠分成空白組、模型組、人參總皂苷(ZG)組、附子總生物堿(SWJ)組、人參總皂苷和附子總生物堿配伍(0.5∶1)組。參照文獻［9］方法，20% 烏拉坦0.5 mL/100 g腹腔注射麻醉，于頸部右側頸總動脈插入進入左心室，當波形由血壓波變成下沿達0 mmHg時表明導管已經(jīng)進入左室腔內。觀測指標:左室內壓(LVSP)、左室最大上升速率(+dp/dt max)、左室最大下降速率(－dp/dt min)。記錄正常指標，穩(wěn)定后股靜脈恒速注射1.5%戊巴比妥納(6 mL/h)，當+dp/dt max降到正常值的20%～40%穩(wěn)定后，以0.5%戊巴比妥鈉4.5 mL/h保證模型穩(wěn)定，模型穩(wěn)定5 min以上即視為心衰模型成功。經(jīng)十二指腸給予受試藥物，空白組不給任何藥物，模型組給予等量的蒸餾水。

2.3 統(tǒng)計學方法 采用SPSS統(tǒng)計學軟件處理，數(shù)據(jù)用均數(shù)±標準差(±s)表示，采用t檢驗組間比較，P＜0.05為有統(tǒng)計學意義。

3 結果

3.1 離體蛙心結果 見表1。

表1 不同劑量藥物對振幅增長的影響(±s，n=10)

表1 不同劑量藥物對振幅增長的影響(±s，n=10)

注:與0.5∶1組比較，#P＜0.05

0.2 0.4 0.8 1.0 1.2 1.6 2.4 2.8 ZG 組 4.18 ±0.129 8 0.03 ±0.105 9 0.16 ±0.069 9#0.64 ±0.107 5#1.56 ±0.134 9#2.50 ±0.133 3#3.52 ±0.161 9#2.16 ±0.069 9#1.22 ±0.091 8組 別 正常 藥物劑量/(g/mL)#0.5∶1 組 4.18 ±0.131 6 0.01 ±0.073 7 0.61 ±0.099 4 1.56 ±0.171 2 2.50 ±0.230 9 3.46 ±0.222 1 4.53 ±0.141 8 3.30 ±0.216 0 2.21 ±0.172 8 SWJ組 4.23 ±0.221 3 0.05 ±0.527 0 0.18 ±0.078 8#0.33 ±0.048 3#0.72 ±0.091 8#1.50 ±0.124 7#2.51 ±0.073 7#1.29 ±0.857 3#0.75 ±0.070 7#

3.2 對心衰大鼠血流動力學的影響

3.2.1 對左室內壓的影響 見表2。

3.2.2 對左室最大上升速率的影響 見表3。

3.2.3 對左室最大下降速率的影響 見表4。

表2 給藥后LVSP的相對變化率(±s，n=8)%

表2 給藥后LVSP的相對變化率(±s，n=8)%

注:與 MX 組比較，#P ＜0.05，##P ＜0.01;與 KB 組比較，△△P ＜0.01

10 15 20 30 40 60 KB 組 — 142.75±1.28 141.12±1.13 －1.35 ±0.74 －2.750 ±0.71 －4.50 ±0.75 －5.87 ±0.83 －7.12 ±0.64 －48.5±0.54 －10.25±0.71組 別 劑量/(g/kg)正常 模型給藥后/min 5 MX組 — 138.87±0.91 64.12±1.55△△ －1.87±1.64 －3.870±0.99 －7.25±1.03 －10.73±1.16 －11.75±1.28 －15.13±1.55 －17.37±1.51 ZG 組 0.090 0 138.00±1.30 61.88±1.24△△ 0.75 ±0.46## 0.251 ±0.46## －0.50±0.53## －1.63±0.74## －4.37±0.92## －8.50±0.53##－16.12±2.03 Swj組 0.013 8 0.5∶1 組 0.096 9 137.25±1.48 65.00±1.19△△ 0.75 ±0.46## 1.370 ±0.52## 2.37 ±0.52## 1.12±0.64## －1.37±0.74## －4.63±1.19##－16.25±1.67 148.25 ± 23.05 65.00±2.44△△ 0.37 ±0.52## 0.620 ±0.52## 0.87 ±0.83## －0.37±0.44## －3.87±1.45## －7.50±5.34##－16.87±1.46

表3 給藥后+dp/dt max相對變化率(±s，n=8)%

表3 給藥后+dp/dt max相對變化率(±s，n=8)%

注:與MX組比較，#P ＜0.05，##P ＜0.01;與 KB 組比較，△△P ＜0.01

10 15 20 30 40 60 KB 組 － 382 9.12±9.12 372 10.38±7.31 －1.50 ±0.53 －2.75 ±0.71 －4.38 ±0.74 －6.63 ±1.06 －8.25±1.28 －10.50±0.53 －11.75±1.28組 別 劑量/(g/kg)正常 模型給藥后/min 5 MX組 － 383 1.25±5.17 125 3.50±4.92△△ －3.12±0.64 －5.37±1.30 －6.51±1.31 －9.12±0.83 －13.25±1.39 －16.13±1.13 －21.62±2.38 ZG 組 0.090 0 403 7.12±8.62 125 0.00±8.81△△ 1.50 ±0.93# 0.75 ±0.89# 0.25 ±1.28# －0.25 ±0.89# －6.37±0.92# －9.38±1.06# －9.13±2.14#SWJ組 0.013 8 427 1.37±7.91 113 0.01 ±8.65△△ 2.36 ±1.06# 1.63 ±0.92# 0.62 ±0.74# 0.37 ±0.74# －3.38±1.06# －7.50±0.93# －14.25±0.71 0.5∶1 組 0.096 9 418 5.37±7.26 112 9.86±8.65△△ 3.38 ±0.52## 2.37 ±0.74## 1.63 ±0.52## 0.87±0.35## 0.37±0.52# －5.38±1.06# －12.00±0.75#

表4 給藥后－dp/dt min相對變化率(±s，n=8)%

表4 給藥后－dp/dt min相對變化率(±s，n=8)%

注:與 MX 組比較，#P ＜0.05，##P ＜0.01;與 KB 組比較，△△P ＜0.01

±0.96 －20.39 ±0.70 MX組 － －387 6.38±14.24 －127 5.88±7.49△△ －7.252±1.05 －9.55±0.38 －12.85±0.30 －19.36±0.82 －26.73±0.42 －34.53±0.88 －37.69±4.78 ZG 組 0.090 0 －377 2.75±13.29 －113 7.25±10.27△△ 1.580 ±0.82# 0.64 ±0.66 －0.54 ±0.68# －6.60 ±0.85# －15.75 ±0.85 －24.44 ±0.72# －27.46±1.23#SWJ組 0.013 8 －357 2.88±9.14 －103 7.13±9.87△△ 1.550 ±0.62 0.42 ±0.56 －0.49 ±0.76# －5.69 ±0.68# －14.47 ±1.10# －20.54 ±1.05 －29.34±1.10 0.5∶1 組 0.096 9 －365 3.38±8.47 －110 2.88±3.25△△ 2.120 ±0.64# 1.25 ±0.88#－0.37 ±0.51# －4.00 ±1.41# －12.50 ±1.19## －19.25 ±2.12# －24.75±1.58給藥后/min 10 15 20 30 40 60 KB 組 － －370 3.00±12.85 －360 5.00±19.67 －8.390 ±1.67 －9.50 ±0.56 －10.56 ±0.50 －11.76 ±0.99 －13.28 ±0.82 －15.59組 別 劑量/(g/kg)正常 模型5#

4 小結

本實驗顯示離體蛙心實驗中ZG組，SWJ組，0.5∶1組均是在藥物濃度0.4～1.6 g/mL呈上升趨勢，2.4～2.8 g/mL出現(xiàn)下降趨勢。其中0.5∶1組作用最為明顯。通過離體蛙心實驗證明了總皂苷和總生物堿配伍比只給總皂苷或總生物堿的振幅增值大。說明附子總生物堿低濃度時離體蛙心收縮張力增加、振幅增大，并隨著濃度的增加，在高濃度時具有抑制作用［10］。附子總生物堿與人參總皂苷配伍后蛙心收縮張力較總生物堿增加、振幅增大，且使蛙心耐受力增強。

LVSP在一定程度上可以反映心肌收縮力［11-12］。本實驗結果顯示附子總生物堿和人參總皂苷配伍后作用最強(P＜0.01)。血流動力學是研究藥物對心血管功能影響時較常用的一種方法，左室最大上升速率+dp/dt max是評價心肌收縮功能的一項重要指標［13］，該指標下降時，可以說明心功能不全，本實驗結果顯示附子總生物堿和人參總皂苷配伍后增強心肌收縮力的作用效果強，且作用時間最長。左室最大下降速率(－dp/dt min)反映心肌舒張時心肌纖維延長的最大速度，是評價心肌收縮、舒張性能的常用指標［14］，在心功能不全時，數(shù)值會升高。實驗結果表明附子總生物堿和人參總皂苷配伍后可以影響心肌纖維延長的速度。

實驗結果表明，人參與附子總提取物配伍后強心作用增強，可能與人參總皂苷促進附子總生物堿生物利用度有關。

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