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    淫羊藿醇提取與水提取工藝的比較

    2015-01-13 09:25:20朱裕林陳衛(wèi)東張冬梅習斌斌
    中成藥 2015年2期
    關(guān)鍵詞:淫羊藿苷藥典

    朱裕林, 陳衛(wèi)東 , 張冬梅, 習斌斌

    (1. 蚌埠醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院,安徽 蚌埠233004;2. 安徽中醫(yī)藥大學,安徽 合肥230031)

    淫羊藿含有多種生物活性成分,主要包括黃酮類化合物、多糖、生物堿、木脂素、揮發(fā)油、萜類化合物及鋅、銅、鈣、錳等微量元素[1-3]?!吨袊幍洹?010 年版[4]收載淫羊藿為小檗科淫羊藿屬的淫羊藿Epimedium brevicornum Maxim.、箭葉淫羊藿 Epimedium sagittatum (Sieb. Et Zucc.)Maxim.、柔毛淫羊藿Epimedium pubescens Maxim.或朝鮮淫羊藿Epimedium koreanum Nakai 的干燥葉?,F(xiàn)代藥理研究表明,淫羊藿具有抗勃起功能障礙、抗骨質(zhì)疏松、免疫調(diào)節(jié)、改善心功能、抗腫瘤、抗衰老等作用[5-9]。黃酮類化合物為主要有效成分,其中淫羊藿苷為淫羊藿藥材定性定量的指標[10]。淫羊藿苷溶于乙醇、乙酸乙酯,難溶于水,目前多用乙醇溶液進行提取[11-13]。本課題組前期研究淫羊藿水提取工藝,結(jié)果表明淫羊藿苷提取率較高。本實驗以淫羊藿苷提取率為指標,采用L9(34)正交設(shè)計優(yōu)選淫羊藿醇提取和水提取工藝條件。

    1 儀器與材料

    1.1 試劑與藥品 藥材購于亳州市萬珍中藥飲片廠,經(jīng)安徽中醫(yī)藥大學劉守金教授鑒定為柔毛淫羊藿Epimedium pubescens Maxim. 的干燥葉。淫羊藿苷對照品(icariin),由中國食品藥品檢定研究院提供,批號110737-200415;乙腈為色譜純,其他試劑為分析純,純凈水(娃哈哈飲料有限公司)。

    1.2 儀器 LC-15 型高效液相色譜儀(日本島津公司);SPD-M20A 型紫外檢測器(日本島津公司);Cosmosil C18色譜柱(4.6 mm×250 mm,5 μm)。

    2 方法與結(jié)果

    2.1 淫羊藿苷測定 根據(jù)預試驗方法[14],對淫羊藿藥材中淫羊藿苷進行定量測定。色譜條件為Cosmosil C18色譜柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流動相為乙腈-水(30 ∶70);體積流量1 mL /min;柱溫25 ℃;檢測波長270 nm,進樣量20 uL。

    2.2 醇提取工藝優(yōu)選 根據(jù)預試驗,淫羊藿藥材吸收約3倍量的乙醇溶液,考慮到淫羊藿藥材比較疏松,故第1 次回流時多加入3 倍乙醇溶液。采用L9(34)正交設(shè)計優(yōu)選淫羊藿的醇提取工藝,試驗安排見表1,試驗結(jié)果見表2,方差分析見表3。

    表1 醇提取因素水平

    以淫羊藿苷提取率為指標,極差R 表明各影響因素程度為D >C >A >B。方差分析顯示因素A、C、D 均具有顯著性差異。各因素影響趨勢為D3>D1>D2,C2>C1>C3,A3>A1>A2。確定最優(yōu)方案為A3B1C2D3即8 倍量70%乙醇回流提取3 次,每次2 h,第1 次需多加入3 倍70%乙醇。

    表2 醇提取正交試驗結(jié)果

    表3 醇提取方差分析

    2.3 水提取工藝優(yōu)選 第1 次煎煮時多加入3 倍水。采用L9(34)正交設(shè)計優(yōu)選淫羊藿的水提取工藝,試驗安排見表4,試驗結(jié)果見表5,方差分析見表6。

    表4 因素水平

    表5 水提取正交試驗結(jié)果

    表6 水提取方差分析

    以淫羊藿苷提取率為指標,極差R 表明各影響因素程度為為C >A >B。方差分析顯示因素C 具有顯著性差異。各因素影響趨勢:C2>C3>C1,A3>A2>A1。確定最優(yōu)方案為A3B1C2即8 倍量水煎煮2 次,每次1 h,第1 次需多加入3 倍水。

    2.4 驗證試驗 按正交設(shè)計優(yōu)選方案分別對醇提取和水提取工藝進行驗證,結(jié)果見表7。

    表7 醇提取與水提取工藝驗證結(jié)果

    3 討論

    預實驗選擇藥材時,本實驗考察了淫羊藿地上部分(葉)和地下部分(仙靈脾)中淫羊藿苷的分布情況,結(jié)果淫羊藿地下部分(仙靈脾)淫羊藿苷的含量僅為淫羊藿葉的1/8,且遠低于《中國藥典》2010 年版標準,表明淫羊藿苷具有明顯的部位分布選擇性[15]。符合《中國藥典》對淫羊藿部位的要求即:“干燥葉”。淫羊藿雖無“道地藥材”之說,但實際上由于淫羊藿地理分布廣泛,品種較多的緣故,市售淫羊藿藥材的質(zhì)量良莠不齊,控制藥材質(zhì)量成為選擇中藥材的關(guān)鍵。

    水煎煮法淫羊藿苷提取率為77.22%,與余曉輝等[16]報道的乙醇回流法基本一致,表明傳統(tǒng)水煎煮法能夠?qū)⒃撍幉挠行С煞殖浞痔崛。瑥亩蔀槠鋫鹘y(tǒng)湯劑發(fā)揮藥效學的基礎(chǔ)。

    本實驗中水提取法淫羊藿苷提取率雖低于醇提取法,但提取率仍然較高;兩者出膏率無明顯差別;水提取法溶劑為水,耗時耗材(2 h,水)均明顯低于醇提取(6 h,70%乙醇),能耗和原料成本較低,為其在工業(yè)化大生產(chǎn)的推廣應(yīng)用提供了一定參考依據(jù)。

    [1] 張華峰,楊曉華. 淫羊藿的生物活性成分及其開發(fā)策略研究[J]. 中草藥,2010,41(2):329-332.

    [2] 李定芬,高言明,李 健,等. 巫山淫羊藿炮制前后幾種微量元素含量變化研究[J]. 微量元素與健康研究,2011,28(3):35-36.

    [3] 郭麗娜,馬瑩慧,趙 偉,等. 淫羊藿屬植物中化學成分分析研究進展[J]. 中國新藥雜志,2013,22 (8):919-922.

    [4] 國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典:2010 年版一部[S]. 北京:中國醫(yī)藥科技出版社,306-307.

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