7-甲氧基黃酮及衍生物的合成與體外抗乳腺癌細(xì)胞活性

鄭高亮，孔 飛，谷 沚，余心哲，郁建平*

1貴州大學(xué)藥學(xué)院;2貴州大學(xué)生化營養(yǎng)研究所，貴陽 550025

黃酮是一類重要的天然有機(jī)化合物，研究發(fā)現(xiàn)黃酮類化合物具有抗腫瘤以及逆轉(zhuǎn)腫瘤多藥耐藥的活性。由于黃酮類化合物的作用明確，毒性較低，因此對黃酮類化合物的研究仍是尋找具有較好抗腫瘤活性的先導(dǎo)化合物的重要方向之一，并且有著廣泛的應(yīng)用前景。藥理活性也是多種多樣，包括抗腫瘤、抗病毒［1］治療心血管疾病、骨質(zhì)疏松等。

Hussein 等［2］先后預(yù)測和發(fā)現(xiàn)了黃酮類化合物具有防癌抗癌作用。黃酮類化合物主要通過三種途徑來達(dá)到防癌、抗癌的作用，即抗自由基作用、直接抑制癌細(xì)胞生長和抗致癌因子等［3］。Yerra 等人［4］將黃酮母核的A，B 環(huán)進(jìn)行化學(xué)修飾，合成了一系列黃酮A，B 環(huán)的甲氧基取代物，并研究它們對細(xì)胞分裂周期進(jìn)程及腫瘤細(xì)胞增長的影響。黃酮母核上各取代的結(jié)構(gòu)如圖1 所示:

圖1 黃桐A、B 環(huán)上的結(jié)構(gòu)取代Fig.1 Structural substitution of flavone A and B rings

以上化合物對淋巴癌細(xì)胞周期進(jìn)程的影響如下:當(dāng)R1為羥基時(shí)，R2亦為羥基或R2和R3同時(shí)有甲氧基取代的化合物能選擇性的阻斷細(xì)胞的G2/M期;其中R2和R3同時(shí)有甲氧基的化合物對細(xì)胞周期進(jìn)程影響最顯著。當(dāng)R1為甲氧基時(shí)，R2，R3或R2，R5也同時(shí)有甲氧基取代的化合物也能選擇性的阻斷細(xì)胞的G2/M 期;但沒有化合物對淋巴癌細(xì)胞S 期有抑制活性。

Jean 等人［5］對黃酮的A 環(huán)和B 環(huán)進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾，并在結(jié)腸癌細(xì)胞(HT-29)中進(jìn)行誘導(dǎo)Caspase 體外活性篩選。Caspase 蛋白家族在腫瘤細(xì)胞凋亡途徑中發(fā)揮著不可替代的作用，活化Caspase 誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡是腫瘤治療的一條新途徑。

參考了以上內(nèi)容我們合成了7-甲氧基黃酮及衍生物并對合成的目標(biāo)化合物進(jìn)行體外抗乳腺癌MDA-231 細(xì)胞活性實(shí)驗(yàn)。希望得到有抗癌活性的先導(dǎo)化合物，為進(jìn)一步抗癌藥物結(jié)構(gòu)優(yōu)化和活性研究奠定基礎(chǔ)。

1 儀器與材料

1.1 儀器

數(shù)字熔點(diǎn)測定儀WRS-1B(蘇州市豐盛電子科技有限公司);Varian INOVA-400MHz 型核磁共振儀(CDCl3、DMSO 作溶劑)，TMS 為內(nèi)標(biāo)，美國瓦里安公司;FINNIGAN-LCQADVATAGE MAX 型質(zhì)譜儀(賽默飛世尓科技公司);ZF-2 型三用紫外儀(上海安亭電子儀器廠);RE-52AA 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海亞榮生化儀器廠);電磁式空氣壓縮機(jī)(廣東海利集團(tuán)有限公司);78-1 型磁力熱攪拌器(上?？v躍電子科技有限公司)。

1.2 試劑

柱層層析硅膠(100～200 目，300～400 目，青島海洋化工廠);實(shí)驗(yàn)原料(2，4，6-三羥基苯乙酮，2，4-二羥基苯乙酮，DMF，固體氫氧化鈉，30% H2O2，各種苯甲醛類化合物);分析純(乙酸乙酯，甲醇，石油醚，二氯甲烷，氯仿，硫酸二甲酯，上海晶純生化科技股份有限公司提供)未經(jīng)處理，直接使用。

2 實(shí)驗(yàn)原理

2.1 黃酮及黃酮醇［6］化合物1～9 的合成路線

黃酮及黃酮醇化合物1～9 的合成路線如圖2所示:

2.2 黃酮衍生物的合成路線

2.2.1 化合物10 的合成路線

化合物10 的合成路線如圖3 所示:

2.2.2 化合物11 的合成路線

化合物11 的合成路線如圖4 所示:

圖3 2-蒽基-5，7-二甲氧基黃酮醇的合成Fig.3 The synthesis of 2-anthryl-5，7-dimethoxy flovonol

圖2 5，7-二甲氧基黃酮及黃酮醇的合成Fig.2 The synthesis of 5，7-dimethoxy flavone and flavonol

圖4 2-喹啉基-7-甲氧基黃酮醇的合成Fig.4 The synthesis of 2-quinolyl-7-methoxy flovonol

2.2.3 化合物12 的合成路線

化合物12 的合成路線如圖5 所示:

圖5 7，2'，3'，4'-四甲氧基黃酮醇的合成Fig.5 The synthesis of 7，2'，3'，4'-butamethoxy flovonol

3 實(shí)驗(yàn)步驟

3.1 酚羥基苯乙酮的甲基保護(hù)

在250 mL 圓底燒瓶中加入40.0 mmol(6.72 g)2，4，6-三羥基苯乙酮，并加入25 mL 98% N，N-二甲基甲酰胺使之充分溶解，再加入82.0 mmol(11.32 g)K2CO3固體，在常溫下，在磁力攪拌器中充分?jǐn)嚢?5 min，后加入84.0 mmol(10.58 g)Me2SO4，在常溫下充分?jǐn)嚢? h，加入10 mL 水，再分別用15 mL 乙酸乙酯萃取若干次直到乙酸乙酯層在薄層板上層析沒有原料為止，將萃取所得有機(jī)層在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中除去溶劑。將所得的濃縮液拌樣，60 ℃烘干，并用石油醚:乙酸乙酯(15∶1)柱層析，得到4，6-二甲氧基-2-羥基苯乙酮，白色固體產(chǎn)率，75%;mp:77.0～77.1 ℃。1H NMR (400 MHz，CD3OD)δ:2.64(3H，s，COCH3)，3.85 (3H，s，CH3O)，3.86 (3H，s，CH3O)，5.92(1H，s，C3-H)，6.25(1H，s，C5-H)，12.92(1H，s，OH);ESI-MS m/z:197(［M+H］+)，219(［M+Na］+)，415(［2M+Na］+)。

3.2 新型黃酮、黃酮醇及其衍生物的合成

在100 mL 的圓底燒瓶中加入3.0 mmol 2-羥基苯乙酮類化合物和3.0 mmol 苯甲醛類化合物混合均勻，加入30 mL 的無水乙醇充分溶解，再加入2.5 mol/L NaOH 溶液1.5 mL，控制溫度在30 ℃條件下充分?jǐn)嚢?，利用薄層層析確定反應(yīng)終點(diǎn)，所得的物質(zhì)乙酸乙酯-石油醚成比例進(jìn)行梯度柱層析，所得物質(zhì)通過質(zhì)譜、核磁共振確定2-羥基查爾酮類化合物的結(jié)構(gòu)，后在過氧化氫的堿性條件下合成相應(yīng)的黃酮化合物。具體如下化合物及圖譜數(shù)據(jù)表征:

3.2.1 黃酮化合物的合成

5，7-二甲氧基-2'，3'-氯黃酮1，淡黃色固體，產(chǎn)率:78%，mp.220.3～220.8 ℃;1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ:3.96(3H，s，CH3O)，4.01(3H，s，CH3O)，6.19(1H，d，J=4.0 Hz，H-3)，6.41(1H，d，J=4.0 Hz，H-6)，7.23(1H，d，J=8.0 Hz，H-8)，7.26(1H，d，J=8.0 Hz，H-5')，7.49(1H，d，J=8.0 Hz，H-6');13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ:180.1(s，C=O)，169.3，169.1，159.7(s，C-2)，149.1，133.7，133.5，132.9，130.5，129.9，127.1，105.7(d，C-3)，94.3，89.4，77.3，77.0，76.7，56.3，56.2，29.7;ESI-MS:353(M+H)。

5，7，2'-三甲氧基-3'，5'-二溴黃酮2，灰色固體，產(chǎn)率:82%;mp.193.8～194.5 ℃;1H NMR(400 MHz，DMSO)δ:3.82(3H，s，CH3O)，3.91(3H，s，CH3O)，3.94(3H，s，CH3O)，6.39(1H，d，J=4.0 Hz，H-3)，6.69(1H，d，J=2.8 Hz，H-6)，6.80(1H，d，J=1.6 Hz，H-8)，7.97(1H，d，J=2.0 Hz，H-4')，8.23(d，J=2.4 Hz，1H，H-6');ESI-MS m/z:493(M+Na)，963(2M+Na)。

3'-硝基-5，7-二甲氧基黃酮3，深黃色固體，產(chǎn)率:66%;mp.230.2～231.9 ℃;1H NMR(400 MHz，DMSO)δ:3.91(3H，s，CH3O)，3.95(3H，s，CH3O)，6.74(1H，d，J=4.0 Hz，H-3')，6.81(1H，d，J=1.2 Hz，H-6)，7.52(1H，d，J=4.0 Hz，H-8)，7.80(1H，d，J=8.0 Hz，H-5')，8.26(1H，dd，J=1.2 Hz，2.0 Hz，H-4')，8.35(1H，d，J=16.4 Hz，H-6')，8.76(1H，dd，J=2.0 Hz，4.0 Hz，H-2');ESI-MS m/z:350(M+Na)。

5，7，2'，4'，5'-五甲氧基黃酮4，橘黃色固體，產(chǎn)率:61%，mp.211.5～212.0 ℃.1H NMR(400 MHz，DMSO)δ:3.72(3H，s，CH3O)，3.79(3H，s，CH3O)，3.82(3H，s，CH3O)，3.91(s，CH3O)，3.92 (s，3H，CH3O)，6.23(d，J=2.0 Hz，1H，H-3)，6.47(d，J=4.0 HZ，1H，H-8)，6.62(3H，d，J=2.0 Hz，1H，H-6)，7.72(1H，s，H-3')，8.24(1H，d，J=10.0 Hz，H-6');13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ:180.7(s，C=O)，169.1，168.7，159.3(s，C-2)，153.0，147.2，139.3，127.8，111.3(d，C-3)，108.4，104.9，93.9，89.1，77.3，77.0，76.7，60.8，56.0，55.9，49.1，48.9，48.7，29.5;ESI-MS m/z:373(M+H)，375(M +Na)，767(2M+Na)。

5，7，3'，4'，5'-五甲氧基黃酮5，黃色固體，產(chǎn)率:65%;mp.208.0～209.2 ℃;1H NMR(400 MHz，DMSO)δ:3.75(3H，s，CH3O)，3.78(3H，s，CH3O)，3.91(3H，s，CH3O)，3.94(1H，s，CH3O)，3.96(3H，s，CH3O)，6.34(1H，s，H-3)，6.70(1H，s，H-8)，6.74(1H，s，H-6)，7.13 (1H，d，J=1.2 Hz，H-C2')，7.27(1H，d，J=2.0 Hz，H-6');13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ:178.9(s，C=O)，168.9，168.2，158.9(s，C-2)，153.0，146.7，139.0，127.6，110.0(d，C-3)，108.7，104.0，94.5，90.0，79.0，60.2，56.6，56.2，56.0，40.1，39.9，39.7，39.5，39.3，39.1，38.9;ESIMS m/z:373(M+H)，395(M+Na)，767(2M+Na)。

5，7，2'-三甲氧基黃酮6，黃色固體，產(chǎn)率:58%;mp.224.8～225.0 ℃;1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ:3.90(3H，s，CH3O)，3.92(3H，s，CH3O)，3.94(3H，s，CH3O)，6.14(1H，d，J=2.0 Hz，H-3)，6.39(1H，d，J=1.8 Hz，H-6)，6.94(1H，d，J=8.0 Hz，H-8)，7.02(1H，dd，J=8.0 Hz，15.2 Hz，H-5')，7.05(1H，dd，J=8.0 Hz，15.6 Hz，H-4')，7.35(1H，d，J=4.0 Hz，H-3')，8.23(1H，d，J=8.0 Hz，H-6');13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ:181.0 (s，C=O)，169.0，168.8，159.4(s，C-2)，158.5，147.8，131.5，130.9，121.3，120.6，110.6(d，C-3)，105.3，105.2，93.8，89.1，77.3，77.0，76.7，56.0，55.9，55.4，49.5，49.3，49.1，48.8，48.6，29.6;ESI-MS m/z:313(M +H)，335(M+Na)。

3.2.2 新型黃酮醇化合物的合成

3'-羥基-5，7-二甲氧基黃酮醇7，深黃色固體，產(chǎn)率:55%，mp.189.8～190.2 ℃;1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ:3.64(3H，s，CH3O)，3.73(3H，s，CH3O)，6.38(1H，d，J=2.0 Hz，H-6)，6.60(1H，d，J=2.0 Hz，H-8)，6.94(1H，d，J=2.0 Hz，H-4')，7.35(1H，dd，J=8.0 Hz，16.0 Hz，H-5')，7.69(1H，d，J=8.0 Hz，H-6')，7.74(1H，s，H-2')，9.19(1H，s，H-3');ESI-MS m/z:305(M+H);327 (M+Na)。

4-甲基-5，7-三甲氧基-黃酮醇8，淡黃色晶體，產(chǎn)率:72%，mp.194.6～194.7 ℃;1H NMR(400 MHz，DMSO)δ:2.05(3H，s，CH3)，3.93(3H，s，CH3O)，3.97(3H，s，CH3O)，6.16(1H，d，J=2.0 Hz，H-8)，6.38(1H，d，J=1.2 Hz，H-6)，7.54(2H，d，J=4.0 Hz，H-3'，H-5')，7.72(2H，d，J=8.4 Hz，H-2'，H-6')，8.22(1H，s，H-3);ESI-MS m/z:313(M+H)，335(M+Na)，647 (2M+Na)。

5，7-二甲氧基-2'，3'，4-三甲氧基黃酮醇9，橙黃色固體，產(chǎn)率:65%，mp.228.9～229.2 ℃;1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ:3.81(3H，s，CH3O)，3.83(3H，s，CH3O)，3.89(3H，s，CH3O)，3.91(3H，s，CH3O)，3.95(3H，s，CH3O)，6.49(1H，d，J=2.0 Hz，H-6)，6.63(1H，d，J=2.0 Hz，H-8)，6.94(3H，d，J=8.4 Hz，1H，H-5)，7.21(1H，d，J=9.0 Hz，H-6)，8.42(1H，s，H-3');ESI-MS m/z:389(M +H)，411(M +Na)，799 (2M+Na)。

2-蒽基-5，7-二甲氧基-黃酮醇10，橘紅色固體，產(chǎn)率:72%，mp.220.7～222.1 ℃;1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ:3.82(3H，s，CH3O)，4.04(3H，s，CH3O)，6.45(1H，d，J=2.4 Hz，H-3')，6.79(1H，s，H-6)，7.25(1H，s，H-8)，7.50(1H，dd，J=2.0 Hz，4.4 Hz，H-4)，7.72(1H，d，J=4.0 Hz，H-3)，7.85(1H，d，J=3.6 Hz，6.0 Hz，H-5)，8.08(1H，d，J=14.4 Hz，H-2)，8.63(1H，s，H-6);13C NMR (100 MHz，CDCl3)δ:171.8(s，C=O)，164.5，160.9，160.3(s，C-2)，141.8，140.4(s，C-3)，131.2，130.9，130.2，130.1，128.8，128.4，127.0，126.1，126.0，125.5，125.3，123.5，107.7，107.1，96.0，92.6，77.3，77.0，76.7，65.5，56.5，55.8，30.5，19.1，13.7;ESI-MS m/z:399.0 (M+H)。

7-甲氧基-2-喹啉黃酮醇11，紅色固體，產(chǎn)率:55%，mp.224.5～225.5 ℃;1H NMR(400 MHz，DMSO)δ:3.97(3H，s，CH3O)，6.95(1H，d，J=2.4 Hz，H-8)，6.97(1H，d，J=2.4 Hz，H-6)，7.22(1H，d，J=2.4 Hz，H-5)，7.57(1H，dd，J=7.6 Hz，15.6 Hz，H-5')，7.77(1H，d，J=8.0 Hz，14.4 Hz，H-8')，7.94(1H，dd，J=8.0 Hz，16.0 Hz，H-6')，7.98(1H，d，J=8.0 Hz，H-7')，8.12(1H，d，J=8.0 Hz，H-3')，8.36(1H，dd，J=10.0 Hz，18.0 Hz，H-4')，9.39(1H，s，H-3);ESI-MS m/z:342(M +Na)，661(2M +Na)。

7-甲氧基-2'，3'，4'-三甲氧基黃酮醇12，橘紅色固體，產(chǎn)率69%，mp.173.2～173.9 ℃;1H NMR(400 MHz，DMSO)δ:3.91(3H，s，CH3O)，3.93(3H，s，CH3O)，3.94(3H，s，CH3O)，3.96(3H，s，CH3O)，6.83(1H，d，J=8.8 Hz，H-6)，6.89(1H，s，H-8)，7.01(1H，d，J=8.0 Hz，H-5)，7.34(1H，dd，J=4.0 Hz，12.0 Hz，H-5')，8.15(1H，d，J=8.4 Hz，H-6');13C NMR (100 MHz，CDCl3)δ:172.6(s，C=O)，164.0，157.7，155.6，152.3，144.9 (s，C-2)，142.5，138.3(s，C-3)，126.8，125.6，117.5，115.2，114.7，107.3，99.9，77.3，77.0，76.7，61.6，60.9，56.1，55.8;ESI-MS m/z:381(M+Na)。

3.3 體外乳腺癌［7］細(xì)胞抑性活性的測定

供試化合物1、2、3、7、9、10 用DMSO 配成1.0×10-2mol/L 濃度的儲備液，稀釋溶液濃度為50 μmol/L 的1、2、3、7、9、10 六種化合物對乳腺癌MDA-231 細(xì)胞的抑制活性檢測，應(yīng)用MTT 比色法檢測OD 值，并選取起始原料，中間體查爾酮以及順鉑進(jìn)行實(shí)驗(yàn)對照，分別進(jìn)行三組平行試驗(yàn)。應(yīng)用MTT比色法檢測OD 值，計(jì)算對照組和各實(shí)驗(yàn)組MDA-231 細(xì)胞的抑制率，活性實(shí)驗(yàn)與檢測數(shù)據(jù)由貴州省中科院天然藥物研究所完成，具體數(shù)據(jù)如下:

表1 化合物1、2、3、7、9、10 對乳腺癌MDA-231 細(xì)胞的抑制活性數(shù)據(jù)Table 1 Inhibition activity of compounds 1，2，3，7，9，10 against breast cancer cell line MDA-231

4 結(jié)果及分析

4.1 結(jié)構(gòu)表征

化合物1～6 在ESI-MS 中與目標(biāo)化合物的分子量相吻合，在1H NMR 中δ 區(qū)間3.71～4.01 內(nèi)出現(xiàn)多組甲氧醚C-H 特征峰。化合物1、2、4、5、6 在δ 區(qū)間6.21～6.35 出現(xiàn)明顯的黃酮C 環(huán)中C3-H 峰，其中3 化合物中受B 環(huán)間位硝基的影響，使C3-H 中的δ:6.74 大于其他化合物，δ 區(qū)間6.41～7.23 為黃酮化合物A 環(huán)中C6-H，C8-H，δ 區(qū)間7.32～8.76 為黃酮化合物B 環(huán)中C-H 的1H NMR 值。化合物7～9 在ESI-MS 中的分子量與目標(biāo)化合物黃酮醇及其衍生物的數(shù)值相等，其中目標(biāo)化合物的C3-OH 的活潑H 在氘代試劑中不表現(xiàn)強(qiáng)的吸收峰，7 化合物在δ:9.19 表現(xiàn)明顯的C3'-OH 酚羥基峰，8 化合物在δ:4.31 出現(xiàn)明顯的甲苯中的甲基C-H 峰，9 和10 化合物分別在對應(yīng)黃酮醇化合物的δ 區(qū)間中出現(xiàn)相應(yīng)的苯環(huán)C-H 峰，化合物11、12 由1H NMR 和ESI-MS數(shù)值確定為目標(biāo)化合物。上述部分化合物的表征可參照表2(Table 2)中13C NMR 特征峰的具體數(shù)值。

4.2 黃酮類化合物骨架類型的判斷［8］

在黃酮類化合物的13C NMR 譜中，不同類型的黃酮類化合物，則根據(jù)C 環(huán)的三個(gè)碳原子信號中母核結(jié)構(gòu)不同而各具特征，它的化學(xué)位移和裂分情況，能有助于推斷黃酮類化合物的骨架類型。具體請參見表2(Table 2)

表2 黃酮類化合物C 環(huán)三個(gè)碳核的化學(xué)位移Table 2 Chemical shift of three carbon nuclei of flavonoids C ring

4.3 藥理活性

在Yerra KR 和Jean BD 等人的基礎(chǔ)上對黃酮和黃酮醇及其衍生物進(jìn)行修飾，表1 的體外對乳腺癌MDA-231 細(xì)胞活性結(jié)果表明，由于起始原料和中間體及目標(biāo)產(chǎn)物1～3 對乳腺癌MDA-231 細(xì)胞株表現(xiàn)較低的細(xì)胞毒作用，而目標(biāo)產(chǎn)物2、7、10 表現(xiàn)較強(qiáng)的抑制活性如表1(表1)，從而發(fā)現(xiàn)7-甲氧基黃酮醇構(gòu)效關(guān)系中的B 環(huán)為蒽環(huán)時(shí)有較強(qiáng)的細(xì)胞毒性，B環(huán)的3'-OH 具有增強(qiáng)抗癌活性。濃度為50 μmol/L時(shí)，活性測試結(jié)果表明目標(biāo)化合物7 對乳腺癌MDA-231 細(xì)胞的抑制可達(dá)到60%～70%，具有作為先導(dǎo)化合物的研究價(jià)值，目標(biāo)化合物9 的對乳腺癌MDA-231 細(xì)胞的抑制可達(dá)到70%～80%的，該目標(biāo)化合物具有作為乳腺癌抑制藥物的進(jìn)一步研究價(jià)值。

1 Wang H(王慧).Progress in bioactivity of flavonoids.Food Drug(食品與藥品)，2010，12:347-350.

2 Yan X(延璽)，Liu HQ(劉會青)，Zou YQ(鄒永青)，et al.Physiological activities and research advance in synthesis of flavonoids.Chin J Org Chem(有機(jī)化學(xué))，2008，28:1534-1544.

3 Zhang T(張氽)，Kan JQ(闞建全)，Chen ZD(陳宗道).Research progress of bioflavonoid antitumous effect.Chin Food Addit(中國食品添加劑)，2003，83(3):17-20.

4 Yerra KR，Shih HF，Yew MT.Synthesis growth inhibition and cell cycle evaluations of novel flavonoid derivatives.Bio-org Med Chem，2005，13:6850-6855.

5 Jean BD，F(xiàn)lore D，Lionel V，et al.Effects of flavonoids on cell proliferation and caspase activation in a human colonic cell line HT 29:An SAR Study.J Med Chem，2005，48:2790-2804.

6 Liao TG(廖頭根)，Wang QA(汪秋安)，F(xiàn)ang WQ(方偉青)，et al.Study on the synthesis of novel chalcone and biological activity.Chin J Org Chem (有機(jī)化學(xué))，2006，25:685-689.

7 Wu X(吳茜)，Li ZY(李志裕)，Tang WF(唐偉方)，et al.Chemical modification of flavones and biological activities of modified flavones.Nat Prod Res Dev(天然產(chǎn)物研究與開發(fā))，2008，20:557-562.

8 Kuang HX(匡海學(xué)).Chinese Medicine Chemistry(中藥化學(xué)).Beijing:People's Publishing House(北京人民出版社)，2003.165-168.