不同HER2表達情況下乳腺癌患者甲狀腺激素與Ki67的相關(guān)性

張建云，李樹峰，徐 峰(山西醫(yī)科大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院普通外科，太原 03000;晉煤集團總醫(yī)院普通外科;通訊作者，E-mail:54565@qq．com)

乳腺是女性的第二性征，而乳腺惡性腫瘤的發(fā)生率正在逐年增加，中國是乳腺癌發(fā)病率增長最快的國家之一，中國抗癌協(xié)會公布的統(tǒng)計數(shù)字顯示，我國近年來乳腺癌發(fā)病率正以每年3%的速度遞增，成為城市中死亡率增長最快的癌癥，發(fā)病年齡也呈逐漸年輕化的趨勢。乳腺癌的快速發(fā)展嚴重威脅著女性的身體和心理健康。

機體內(nèi)甲狀腺與乳腺同為激素受體器官，體內(nèi)各種激素水平的變化對乳腺的發(fā)育及生理病理改變起調(diào)節(jié)作用，甲狀腺功能與乳腺癌關(guān)系的研究早在19世紀90年代Beatson［1］使用甲狀腺制劑治療乳腺癌時第一次被提出，但經(jīng)過數(shù)十年的爭論仍無明確定論?，F(xiàn)在，越來越多的證據(jù)表明，甲狀腺信號(脫碘化酶、甲狀腺激素受體)在癌癥或應(yīng)激細胞中會發(fā)生改變，其可能與增長激酶信號的活化作用及其可能的生理相關(guān)性有關(guān)［2-5］。再者，由于甲狀腺組織的信號變化，甚至正常范圍內(nèi)甲狀腺激素(TH)水平的細微變化可能改變癌癥細胞對甲狀腺激素的反應(yīng)［6］。Her2和ki67的表達均會影響腫瘤細胞的增殖及分化，故甲狀腺激素、Her2、ki67三者之間在一定程度上可能存在相互作用，但具體的關(guān)系尚未明確，本研究旨在按照Her2表達的不同情況研究甲狀腺激素與Ki67的關(guān)系。

1 資料與方法

1．1 研究對象

選取經(jīng)過手術(shù)治療的68例雌激素受體陽性的乳腺癌患者被納入該項研究。

既往被診斷過任何類型的甲狀腺疾病，術(shù)前接受過化療、放療管理的，近年來服用過激素類藥物的，有慢性肝腎功能衰竭的病人，體型肥胖(BMI≥28)的患者均被排除在外。被選入的病人在一個月內(nèi)及研究期間不能接受多巴胺、β-受體阻斷劑、肝素、阿司匹林、苯妥因及類固醇的治療。另外，所有研究對象在之前的6個月內(nèi)及研究期間不能使用含碘的造影劑。所有病人的甲狀腺激素水平及血清測量值均在手術(shù)之前完成。

1．2 組織病理學(xué)分析

術(shù)后對腫瘤組織標本進行病理檢查，通過免疫組織化學(xué)染色法來完成乳腺癌組織中雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)、乳腺癌人類表皮生長因子受體-2(HER2)(病理診斷+、++、+++在本研究中均定為陽性，-、±的為陰性)和腫瘤細胞增殖指數(shù)(Ki67)(病理診斷＞14%的本研究定為陽性，≤14%的為陰性)的測定。這些檢測在羅氏全自動免疫發(fā)光儀中使用結(jié)合優(yōu)化聚合物檢測設(shè)備和結(jié)合型表位檢索試劑來完成。

1．3 甲狀腺激素水平

血清TSH、游離甲狀腺素(FT4)、游離三碘甲狀腺原氨酸(FT3)的定量測定采用羅氏COBAS 6000自動化分析儀通過電化學(xué)發(fā)光免疫分析(ECLIA)法完成。TSH 正常范圍在0．270-4．2 μIU/ml，F(xiàn)T4 正常范圍在12．0-22．0 pmol/L之間，F(xiàn)T3正常范圍是 3．1-6．8 pmol/L。

1．4 統(tǒng)計學(xué)分析

各組間的定性檢測用通過χ2檢驗來進行分析。各組間的定量檢測用單因素方差分析(one-way ANOVA)，連續(xù)變量間的潛在相關(guān)性用Spearman秩相關(guān)系數(shù)分析，連續(xù)變量用均數(shù)表示，而分類變量用百分比表示，可信區(qū)間設(shè)定為0．05，統(tǒng)計分析用統(tǒng)計軟件包 SPSS 17．0完成。

2 結(jié)果

2．1 患者的基本特征

患者的年齡分布為27-78歲，平均年齡51．3±2．6 歲，有 55．88%(38/68)的患者已絕經(jīng)，有7．35%(5/68)的患者被診斷有遠處器官轉(zhuǎn)移。腫瘤的病理類型均為浸潤性癌。

2．2 乳腺癌患者中甲狀腺激素水平變化

在ER陽性乳腺癌患者中顯示甲狀腺激素水平均在正常范圍。在不同絕經(jīng)狀態(tài)、腫瘤直徑、Ki67及HER2表達情況患者中FT3、FT4和TSH水平的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(見表1)。

表1 不同絕經(jīng)狀態(tài)、腫瘤大小、Ki67水平、HER2狀態(tài)的乳腺癌患者的TH水平比較

2．3 不同臨床特征中HER2的表達

本研究中的68例病例中有20例表現(xiàn)為HER2(+)，48例 HER2(-)。年齡和絕經(jīng)狀態(tài)在 HER2(+)和HER2(-)乳腺癌病人之間未發(fā)現(xiàn)明顯差異(見表2)。且絕經(jīng)后婦女在HER2陽性和陰性患者中比例相似。然而，腫瘤大小和Ki67指數(shù)在HER2(+)組中較HER2(-)組的乳腺癌患者中顯著增加(見表2)。

2．4 甲狀腺激素與腫瘤大小相關(guān)性

通過對所有患者的分析發(fā)現(xiàn)，腫瘤大小與FT3、FT4和TSH水平之間沒有關(guān)聯(lián)性。而且，在亞組的分析中顯示，HER2(+)乳腺癌患者中腫瘤大小與FT3、FT4和TSH之間沒有關(guān)聯(lián)性，而在HER2(-)乳腺癌患者中在腫瘤大小與 TSH(r=0．624，P=0．054)之間發(fā)現(xiàn)有微弱的臨界相關(guān)性，但與FT3或FT4之間未發(fā)現(xiàn)有關(guān)聯(lián)。

2．5 甲狀腺激素和細胞增殖指數(shù)相關(guān)性

對所有患者分析顯示，在Ki67與FT3、FT4或TSH之間沒有相關(guān)性。然而，亞組分析顯示，在HER2陽性乳腺癌患者中，F(xiàn)T3 水平與 Ki67(r=-0．492，P=0．027)存在負相關(guān)(圖1A)，而在HER2陰性乳腺癌患者中 Ki67與 FT3(r=0．031，P=0．833)之間未發(fā)現(xiàn)這種相關(guān)性(圖1B)。在亞組的分析中均未發(fā)現(xiàn)乳腺癌患者中Ki67與FT4或TSH之間的相關(guān)性。

3 討論

乳腺癌的發(fā)生是以一系列基因和表觀遺傳變異依次發(fā)生的多相性過程為特征的，它可以導(dǎo)致細胞的增殖、分化、凋亡以及DNA修復(fù)失控［7］。實驗研究顯示［8-10］，甲狀腺激素(THS)可以影響正常乳腺細胞的分化和乳腺癌細胞的增殖擴散。甲狀腺激素似乎還可以促進某一類型惡性腫瘤的血管生成［11，12］。Ki67是一種增殖細胞相關(guān)的核抗原，其功能與有絲分裂密切相關(guān)，在細胞增殖中是不可缺少的，但其確切機制尚不清楚，Ki67作為標記細胞增殖狀態(tài)的抗原，陽性說明癌細胞增殖活躍。Her2是人類表皮生長因子受體家族的成員之一，具有重要的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)作用，是重要的乳腺癌患者判斷預(yù)后的獨立因素，HER2受體過表達導(dǎo)致腫瘤細胞異常增殖且侵襲性增加，轉(zhuǎn)移的危險性也隨之增加。在乳腺癌患者中甲狀腺激素、Her2、Ki67三者共同作用于腫瘤細胞，影響癌細胞的分化、增殖、擴散等各個階段，其在對腫瘤細胞作用的同時，它們?nèi)咧g應(yīng)該存在某種相互作用關(guān)系，本研究中這些數(shù)據(jù)清楚地顯示，在HER2(+)乳腺癌患者中，即使正常范圍內(nèi)FT3水平的變化也可能與腫瘤細胞增殖指數(shù)有著生理相關(guān)性。但具體作用機制尚需進一步實驗研究。

表2 HER2(+)與HER2(－)乳腺癌患者的年齡、腫瘤大小、Ki67及絕經(jīng)狀態(tài)比較

圖1 HER2陽性與HER2陰性乳腺癌患者的Ki67值與FT3相關(guān)性的散點圖

有相關(guān)研究顯示，HER2受體過表達可以導(dǎo)致增長激酶信號的激活，例如ERK(細胞外信號調(diào)節(jié)激酶)［13-15］。ERK調(diào)控重要的下游目標分子與細胞外基質(zhì)和組織的病理性增長有關(guān)［3，13］。ERK的活化可以增加基質(zhì)金屬蛋白酶-1(MMP1)活性，而MMP1可以導(dǎo)致細胞外基質(zhì)(ECM)降解和引發(fā)腫瘤產(chǎn)生侵襲性。此外，最近還發(fā)現(xiàn)ERK可以與THR-α1相互作用，從而影響TH信號的發(fā)生發(fā)展［3］。因此，T3在治療表達THR-α1的神經(jīng)膠質(zhì)瘤腫瘤細胞中可以抑制細胞增殖［5］。這個證據(jù)似乎為我們的研究在HER2(+)腫瘤中FT3與細胞增殖指數(shù)呈負相關(guān)這一結(jié)果提供了合理的解釋。這項研究在生理學(xué)和臨床實踐中有重要關(guān)聯(lián)性，還值得進一步研究探討。此外，有研究發(fā)現(xiàn)作用于HER2/ERK信號途徑的藥物似乎還可以誘導(dǎo)有害效應(yīng)的甲狀腺功能紊亂［15］。多項研究均表明，HER2、Ki67、甲狀腺激素三者之間存在著密不可分的關(guān)系。

總之，在沒有伴隨甲狀腺疾病的乳腺癌患者中甲狀腺總體水平?jīng)]有變化。然而，在HER2(+)乳腺癌患者中，甚至正常范圍的FT3水平與細胞增殖表現(xiàn)呈負相關(guān)性。HER2表達、FT3水平與Ki67表達三者之間可能有重要的生理相關(guān)性。

乳腺癌與甲狀腺疾病及功能狀態(tài)的研究由來已久，由于腫瘤發(fā)病機制和生物學(xué)行為的復(fù)雜性和多樣性及人體內(nèi)分泌系統(tǒng)的精細調(diào)節(jié)，乳腺癌與甲狀腺疾病相關(guān)性的具體機制尚不明確。本研究為在甲狀腺機能正常的乳腺癌患者中，正常范圍內(nèi)的甲狀腺水平的變化也可能與乳腺腫瘤的增殖活性有關(guān)提供了證據(jù)。HER2陽性乳腺癌患者中FT3水平與Ki67的負相關(guān)性為甲狀腺功能與乳腺癌的關(guān)系研究提供了新的途徑，為乳腺癌的預(yù)防、治療提供新方向。

［1］Beatson GT．On the etiology of cancer，with a note of some experiments［J］．Br Med J，1899，1:399-400．

［2］Casula S，Bianco AC．Thyroid hormone deiodinases and cancer［J］．Front Endocrin，2012，3，74-75．

［3］Pallud S，Ramaugé M，Gavaret JM，et al．Regulation of type3 iodothyronine deiodinase expression in cultured rat astrocytes:role of the Erk cascade［J］．Endocrinology，1999，140(6):2917-2923．

［4］Pantos C，Xinaris C，Mourouzis I，et al．Thyroid hormone receptorα1:a switch to cardiac cell‘metamorphosis’［J］．J Physiol Pharmacol，2008，59(2):253-269．

［5］Rosen MD，Privalsky ML．Thyroid hormone receptor mutations in cancer and resistance to thyroid hormone:perspective and prognosis［J］．J Thyroid Res，2011，2011:20．

［6］Alexandros L，Iordanis M，Athanasios Z，et al．Cell-type-dependent thyroid hormone effects on glioma tumor cell lines［J］．J Thyroid Res，2011，2011:8．

［7］Borellini F，Oka T．Growth control and differentiation in mammary epithelial cells［J］．Environ Health Perspect，1989，80:85-99．

［8］Saraiva PP，F(xiàn)igueiredo NB，Padovani CR，et al．Profile of thyroid hormones in breast cancer patients［J］．Braz J Med Biol Res，2005，38:761-765．

［9］Dinda S，Sanchez A，Moudgil V．Estrogen-like effects of thyroid hormone on the regulation of tumor suppressor proteins，p53 and retinoblastoma，in breast cancer cells［J］．Oncogene，2002，21:761-768．

［10］Conde I，Paniagua R，Zamora J，et al．Influence of thyroid hormone receptors on breast cancer cell proliferation［J］．Ann Oncol，2006，17:60-64．

［11］Luidens MK，Mousa SA，Davis FB，et al．Thyroid hormone and angiogenesis［J］．Vascul Pharmacol，2010，52:142-145．

［12］Davis FB，Mousa SA，Connor L，et al．Proangiogenic action of thyroid hormone is fibroblast growth factor-dependent and is initiated at the cell surface［J］．Circ Res，2004，94:1500-1506．

［13］Park S，Jung HH，Park YH，et al．ERK/MAPK pathways play critical roles in EGFR ligands-induced MMP1 expression［J］．Biochem Biophys Res Commun，2011，407(4):680-686．

［14］Serra V，Scaltriti M，Prudkin L，et al．PI3K inhibition results in enhanced HER signaling and acquired ERK dependency in HER2-overexpressing breast cancer［J］．Oncogen，2011，30(22):2547-2557．

［15］Fallahi P，F(xiàn)errari SM，Vita R，et al．Thyroid dysfunctions induced by tyrosine kinase inhibitors［J］．Expert Opin Drug Saf，2014，13(6):723-733．