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    豬腸系膜上動脈血栓模型建立的改良方法

    2021-11-04 10:53:00叢銘池荊玉辰辛世杰
    實驗動物科學(xué) 2021年4期
    關(guān)鍵詞:開口處主干腸系膜

    叢銘池 荊玉辰 辛世杰

    (中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院血管外科/甲狀腺外科,沈陽 110001)

    急性腸系膜缺血(acute mesenteric ischemia,AMI)通常定義為一組疾病,其特征是小腸不同部位的血液供應(yīng)中斷,導(dǎo)致缺血和繼發(fā)性炎癥改變。如果不治療,將最終導(dǎo)致危及生命的腸道壞死。其主要病因為腸系膜上動脈栓塞(superior mesenteric artery embolism),約占50%。發(fā)病率低,約占所有急性外科住院病例的0.09%~0.2%[1],男女比例3∶1,60~70歲為高發(fā)人群[2]。腸梗死的死亡率可接近90%[3]。目前尚無一款專門應(yīng)用于腸系膜上動脈栓塞性疾病的介入器械。本研究建立了一種與臨床發(fā)病情況接近的動物模型用以評估自主研發(fā)的取栓器效果。

    1 材料和方法

    1.1 材料

    10只健康巴馬香豬,6~8月齡,體質(zhì)量35~45 kg,雄性,購自北京實創(chuàng)世紀(jì)小型豬養(yǎng)殖基地,實驗動物生產(chǎn)許可證號:SCXK(京)2018-0011,實驗動物福利倫理審查編號:2018064。

    1.2 方法

    1.2.1實驗動物處置: 術(shù)前禁食 12 h,咪達(dá)唑侖5 mg及氯胺酮0.05 g肌注鎮(zhèn)靜。面罩罩住口鼻并使用異氟烷進(jìn)行麻醉誘導(dǎo),待角膜反射消失后將動物固定于手術(shù)床上。耳緣靜脈穿刺開通靜脈通路,泵注丙泊酚30~40 mL/h維持麻醉。股動脈穿刺區(qū)消毒,鋪單,切開皮膚鈍性分離暴露股動脈并穿刺,置入動脈鞘及導(dǎo)絲、導(dǎo)管,造影確認(rèn)置入腸系膜上動脈內(nèi),沿導(dǎo)絲置入4F Fogarty導(dǎo)管進(jìn)入腸系膜上動脈內(nèi)約10 cm,造影劑充盈球囊,造影確認(rèn)成功阻斷腸系膜上動脈(SMA)。

    1.2.2血凝塊制作:抽取動脈血20 mL,加入50 U凝血酶,靜置15 min,待凝固后切條備用。

    1.2.3模型制作:經(jīng)8F動脈鞘注入血凝塊,抽吸球囊取出Fogarty導(dǎo)管。

    1.2.4觀察指標(biāo)

    1.2.4.1 影像學(xué):分別于10 min、30 min和1 h造影查看栓塞情況。

    1.2.4.2 解剖學(xué):所有實驗動物均在存活時,進(jìn)行腸系膜上動脈解剖,標(biāo)本留取由腸系膜上動脈腹主動脈開口處及一并保留部分腹主動脈至腸系膜上動脈三支主要分支末端。

    2 結(jié)果

    2.1 腸系膜上動脈栓塞模型情況

    實驗中所有實驗動物栓塞模型均建立成功,并分別記錄體質(zhì)量與SMA直徑(表1)。10 min時可見腸系膜上動脈主干距開口處約1 cm顯影,并有造影劑回流入腹主動脈,主干遠(yuǎn)端及分支不顯影,栓塞效果滿意(圖1)。30 min時可見腸系膜上動脈主干距開口處約3 cm顯影。1 h時與之前無明顯差異,后續(xù)實驗將栓塞時間確定為30 min。

    表1 體質(zhì)量與腸系膜上動脈直徑Table 1 Body mass and superior mesenteric artery diameter

    圖1 模型建立過程Fig.1 Modeling process

    2.2 解剖并驗證模型

    剖開腸系膜上動脈主干近端完全栓塞,遠(yuǎn)端未見明顯血栓,少量終末分支可見血栓。相應(yīng)供血腸管可見紫色缺血改變。如圖2所示,該標(biāo)本為經(jīng)取栓器取栓后骨骼化取下的標(biāo)本,近端主干內(nèi)可見少量血栓殘留,一條分支內(nèi)可見血栓栓塞,各分支遠(yuǎn)端均未見血栓。

    圖2 骨骼化后的腸系膜上動脈標(biāo)本Fig.2 Skeletonized superior mesenteric artery specimens

    3 討論

    腸系膜上動脈栓塞發(fā)病率雖低,但初步診斷的誤診率達(dá)58.1%[4],且預(yù)后極差,常危及生命。血栓通常停留在正常解剖狹窄處,SMA直徑相對較大,從主動脈發(fā)出的角度較低,尤易受到損傷。因為它的大部分血栓位于SMA自腹主動脈開口約3~10 cm處[1]。目前現(xiàn)有動物模型多以結(jié)扎、夾閉等方法以大鼠[5]、兔[6]等作為實驗動物,但無論解剖結(jié)構(gòu)還是血管條件均與人體相差甚遠(yuǎn)。豬、狗等大型動物血管條件與人體更接近,更適合用作動物模型,但是狗的腸系膜血管側(cè)支循環(huán)豐富[7],所以豬成為了最佳實驗動物。

    預(yù)實驗參照田國標(biāo)等[8]的方法,經(jīng)動脈鞘將體外制作的自體血凝塊作為血栓注入腸系膜上動脈,解剖后發(fā)現(xiàn)腸系膜上動脈主干及所有分支均被血栓栓塞,與臨床中患者發(fā)病情況有所不同,且無法進(jìn)行取栓器械的效果評估。在此基礎(chǔ)上,對模型建立方法進(jìn)行了改良。同樣采用自體血凝塊作為血栓,使用Fogarty球囊進(jìn)行阻斷,將血栓固定在腸系膜上動脈開口處近端,對遠(yuǎn)端及分支動脈影響較小,在后續(xù)的取栓實驗中,取栓成功后通過造影可見腸系膜上動脈及分支血供恢復(fù)。與田國標(biāo)等[8]的方法相比,本方法高度模擬了臨床中腸系膜上動脈栓塞性疾病,模型建立過程中對腸系膜上動脈遠(yuǎn)端及分支動脈影響較小,解剖后可見僅腸系膜上動脈開口處近端被血栓栓塞。本方法更適合觀察取栓后腸道血運恢復(fù)情況,評估取栓器械的治療效果以及后續(xù)的抗凝治療及護(hù)理,也可為以后新的取栓器械及其他治療方法提供有效的實驗?zāi)P汀?/p>

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