稻瘟病室內(nèi)產(chǎn)孢及人工接種鑒定

楊 光，雷海霞，喬 利*

（1.信陽市農(nóng)業(yè)科學(xué)院，河南 信陽 464000；2.信陽農(nóng)林學(xué)院）

稻瘟病（Magnaporthe grisea）是全世界危害較為嚴(yán)重、波及范圍較廣的水稻病害，俗稱“水稻癌癥”。稻瘟病在我國(guó)各水稻產(chǎn)區(qū)均有發(fā)生，主要為葉瘟和穗頸瘟，可致水稻減產(chǎn)10%～20%，嚴(yán)重時(shí)減產(chǎn)40%～60%， 甚至顆粒無收。施用化學(xué)農(nóng)藥是防治稻瘟病較為直接、有效的手段，但隨著農(nóng)藥品種和施用量不斷增加，農(nóng)藥殘留問題日益突出，嚴(yán)重影響了人們的身體健康。采用抗稻瘟病的水稻品種控制稻瘟病的發(fā)生和危害是經(jīng)濟(jì)且可持續(xù)的防治措施，不但可以減少化學(xué)農(nóng)藥的使用，減少稻米中農(nóng)藥殘留量， 提升稻米的食用品質(zhì)，同時(shí)也解決了因抗藥性導(dǎo)致病害防治效果下降的問題。

河南省信陽市位于中國(guó)南北地區(qū)過渡帶，水稻種植面積30萬hm2以上，在全省水稻生產(chǎn)中具有舉足輕重的作用，有效防治稻瘟病是信陽市植保工作的重中之重。通過室內(nèi)培養(yǎng)稻瘟病孢子液噴施幼苗、注射待抽穗水稻植株，篩選抗稻瘟的水稻品種，對(duì)稻瘟病的防治具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 供試材料

供試品種：原豐早、9優(yōu)418、信香糯1號(hào)、荃銀。

1.2 供試病原菌

2018年在信陽市農(nóng)業(yè)科學(xué)院湖東試驗(yàn)基地選取水稻品種特糯2072上的穗頸瘟病原菌，保濕培養(yǎng)后分離純化，接種到試管中待用。

1.3 產(chǎn)孢培養(yǎng)基的制作

配方：100 g健康稻稈、40 g玉米粉、15 g瓊脂粉，定容至1 L，調(diào)節(jié)pH值7左右。制作方法：把稻稈剪成10 cm左右，放入鍋中煮沸30～40 min，將煮好的稻稈水用紗布充分過濾后待用。把玉米粉和瓊脂粉加入稻稈水中，邊倒邊攪拌，待充分沸騰溶解后倒入錐形瓶，封口滅菌后待用。

1.4 稻瘟病孢子的培養(yǎng)

將試管中的菌株用接種針取下放入倒好的PDA平板中，放入25℃恒溫培養(yǎng)箱中5～7 d。用1 cm打孔器取平板菌株放入稻稈玉米粉產(chǎn)孢培養(yǎng)基中，置于有黑光燈的27℃恒溫培養(yǎng)箱中，光暗交替培養(yǎng)8 d。待菌絲基本全覆蓋住培養(yǎng)皿后，置于有黑光燈的27℃恒溫培養(yǎng)箱中連續(xù)光照培養(yǎng)48 h后待用。在培養(yǎng)皿中倒入少量無菌水，有軟毛刷輕輕地把平板表面菌絲刷下、融入水中，刷兩遍后倒入三角瓶，把刷過的平板用封口膠封好置于有黑光燈的27℃恒溫培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。刷下的孢子液進(jìn)行鏡檢，在一個(gè)視野中大概有30～50個(gè)孢子，用血球計(jì)數(shù)板計(jì)算孢子量，調(diào)節(jié)孢子懸浮液濃度，使最終濃度為3×105～4×105個(gè)/mL。

1.5 病原菌的接種

接種時(shí)期為水稻倒2葉前后至抽穗前，采用注射接種法接種。用醫(yī)用注射器吸取孢子液，在倒3葉葉腋下2～3 cm處注射1 mL。每個(gè)品種接種30穗。2018年7月31日接種后掛牌標(biāo)記。

1.6 抗性評(píng)價(jià)方法

病級(jí)記錄采用全國(guó)統(tǒng)一方法及標(biāo)準(zhǔn)，在黃熟期觀察記載穗頸瘟的發(fā)生情況，只要有頸瘟和粒瘟發(fā)生就定為感?。⊿），全部未發(fā)病就定為抗?。≧）。感病株超過25%就定為感性品種，低于或等于25%就定為抗感分離品種，全部未發(fā)病就定為抗性品種。

2 結(jié)果與分析

由表1可以看出，原豐早和荃銀為感性品種，接種稻穗幾乎全部發(fā)病，荃銀發(fā)病情況更為嚴(yán)重。9優(yōu)418和信香糯1號(hào)發(fā)病的植株較少，感病率低于或等于25%，為抗感分離品種。

表1 稻瘟病病級(jí)記錄結(jié)果

3 結(jié)論

9優(yōu)418、信香糯1號(hào)對(duì)稻瘟病有一定的抗病性，原豐早和荃銀對(duì)稻瘟病基本沒有抗病性。