血常規(guī)參數(shù)聯(lián)合紅細(xì)胞脆性在珠蛋白生成障礙性貧血初篩中的應(yīng)用研究＊

曾思強(qiáng)，向華國，曾錦婷，范木懷（.廣東省深圳市龍崗區(qū)第二人民醫(yī)院 58；.廣東省深圳市寶安區(qū)福永人民醫(yī)院中心實驗室 580；.廣東省深圳市大鵬新區(qū)婦幼保健院 5808）

珠蛋白生成障礙性貧血（簡稱地貧）是一組常染色體隱性遺傳性疾病，是由于珠蛋白基因突變，使珠蛋白生物合成受阻、產(chǎn)量不足或缺如所致。地貧是我國長江以南各省發(fā)病率最高、影響最大的遺傳病［1］。目前對地貧尚無有效的治療方法，因此加強(qiáng)婚姻指導(dǎo)，遺傳咨詢，婚前及產(chǎn)前篩查顯得尤為重要。對夫婦雙方均為地貧基因攜帶者，在妊娠早期進(jìn)行產(chǎn)前基因診斷，防止重型地貧兒出生，減少雜合子胎兒出生，是最有效的預(yù)防措施。目前國內(nèi)外地貧確診方法主要是分子生物學(xué)方法，但分子生物學(xué)方法耗時長、成本高，操作復(fù)雜，所以通過比較經(jīng)濟(jì)、方便、快捷的方法對人群進(jìn)行大規(guī)模地貧初篩，再對可疑地貧人群進(jìn)行基因診斷顯得尤為重要。本研究選擇經(jīng)過基因診斷的地貧患者，在血紅蛋白（HGB）、平均紅細(xì)胞體積（MCV）、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度（MCHC）、紅細(xì)胞體積分布寬度（RDW）及紅細(xì)胞脆性方面，與非地貧健康人群進(jìn)行比較，從而討論其應(yīng)用價值和不足之處?，F(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選擇2012年1月1日至2013年1月31日深圳市龍崗區(qū)第二人民醫(yī)院及深圳市寶安區(qū)福永人民醫(yī)院產(chǎn)前門診、社康中心90例患者為研究對象，采集所有研究對象的血液標(biāo)本各3份，其中肝素抗凝血1份用于紅細(xì)胞脆性檢測，EDTA-Na2抗凝血1份用于血常規(guī)檢測，枸櫞酸鈉抗凝血1份用地貧基因檢測。經(jīng)分子生物學(xué)檢測將其分為地貧組68例，其中α-地貧25例、β-地貧37例、α復(fù)合β地貧6例；非地貧組22例；年齡18～43歲，兩組一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 儀器與試劑ABI Steponeplus PCR擴(kuò)增儀購自美國應(yīng)用生物系統(tǒng)公司；HEMA G5G-2000核酸／蛋白凝膠圖像分析系統(tǒng)購自珠海黑馬醫(yī)學(xué)儀器有限公司；DYY-8C型電泳儀為北京六一儀器廠生產(chǎn)。FYY-3分子雜交儀為江蘇興化分析儀器廠生產(chǎn)；BC-3000全自動血細(xì)胞三分類分析儀由深圳邁瑞公司生產(chǎn)；日立7060全自動生化分析儀購自日本日立公司；紅細(xì)胞脆性儀器由武漢長立生物技術(shù)有限公司提供；α、β-地貧基因檢測試劑盒為深圳亞能生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品。

1.3 檢測方法選擇EDTA-Na2抗凝靜脈血進(jìn)行血細(xì)胞分析，主要觀察HGB、MCV、MCHC、RDW 4個指標(biāo)。用肝素管抽血1mL，在室溫中可穩(wěn)定12h，2～8℃下避光保存可穩(wěn)定48h。往小玻璃試管內(nèi)加入1mL生理鹽水，再加入全血30 μL或壓縮紅細(xì)胞20μL，充分混勻后5min內(nèi)上機(jī)測定紅細(xì)胞脆性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理采用SPSS13.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，計量資料采用±s表示，組間比較采用F檢驗；以α=0.05為檢驗水準(zhǔn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

地貧組及地貧各分型患者HGB、MCHC、RDW值與非地貧組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；而在紅細(xì)胞脆性、MCV方面比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 兩組血常規(guī)參數(shù)及紅細(xì)胞脆性比值比較（±s）

表1 兩組血常規(guī)參數(shù)及紅細(xì)胞脆性比值比較（±s）

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3 討 論

地貧是一種因珠蛋白基因缺陷使血紅蛋白中珠蛋白肽鏈中一條合成減少或不能合成，而引起血紅蛋白的組成成分發(fā)生改變而導(dǎo)致的溶血性疾?。?］。在血液學(xué)上表現(xiàn)為低色素小細(xì)胞性貧血，MCV減少，MCHC含量減少，表現(xiàn)為貧血（中、重度）、黃疸、肝脾腫大、發(fā)育遲緩等。臨床表現(xiàn)差異較大，輕者可無任何癥狀，重者多于妊娠晚期或出生早年死亡。重型地貧患兒的出生給社會和家庭帶來沉重的精神、經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，由于醫(yī)學(xué)上對地貧尚無有效的治療方法，所以產(chǎn)前篩查和產(chǎn)前診斷便顯得尤為重要。

紅細(xì)胞參數(shù)檢測是診斷和治療貧血必要的實驗室檢測手段，不同病因引起的貧血病理不同，各項參數(shù)的變化也各不相同［3-4］。紅細(xì)胞脆性測定是利用地貧基因攜帶者紅細(xì)胞對低滲溶液的抵抗力增強(qiáng)及脆性減低的特點，定量檢測紅細(xì)胞溶血的百分率［5］。目前MCV、MCH、RDW、紅細(xì)胞脆性試驗、血紅蛋白分析以及可溶性鐵蛋白受體等已廣泛應(yīng)用于成人地貧的篩查［6-8］。前期研究表明葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G6PD）／6-磷酸葡萄糖脫氫酶（6PGD）的比值測定對地貧診斷有一定的應(yīng)用價值［9］。通過血常規(guī)參數(shù)分析，在一定程度上可以了解患者血液學(xué)情況，對可疑地貧患者起到初步篩查，其具有方便、快捷、成本低廉的特點［10］。本研究通過非地貧患者作為對照，應(yīng)用HGB、MCV、MCHC、RDW聯(lián)合紅細(xì)胞脆性分析診斷地貧患者，結(jié)果表明各類型的地貧患者與非地貧患者HGB、MCHC、RDW差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），MCV、紅細(xì)胞脆性明顯低于非地貧患者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。但MCV降低并不是地貧患者特異性檢測指標(biāo)，無地貧基因的正常人群，特別是缺鐵性貧血患者也會出現(xiàn)MCV降低。而且相關(guān)研究報道表明，單純以紅細(xì)胞脆性篩查地貧可能出現(xiàn)漏診病例［11］。

綜上所述，通過血常規(guī)參數(shù)HGB、MCV、MCHC、RDW計數(shù)，同時聯(lián)合紅細(xì)胞脆性檢測，對社區(qū)人群進(jìn)行大規(guī)模地貧初步篩查有一定的應(yīng)用價值，但不能完全排除地貧。以紅細(xì)胞脆性作為地貧的篩查指標(biāo)，其參考值范圍還有待研究，聯(lián)合兩者或再聯(lián)合其他實驗室檢查，可有效減少漏診。

［1］杜傳書.地中海貧血研究的現(xiàn)狀與未來［J］.中華醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)雜志，1996，13（5）：257.

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［9］向華國，曾錦婷，洪文彬，等.改良G6PD／6PGD比值測定與α、β地中海貧血基因診斷的相關(guān)性研究［J］.國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2013，34（23）：3131-3132.

［10］楊自華，方紅輝，唐曙明，等.血常規(guī)參數(shù)在珠蛋白生成障礙性貧血中的變異分析［J］.醫(yī)學(xué)信息，2010，11（3）：3080-3081.

［11］何歡，劉志強(qiáng)，孫耀君，等.深圳地區(qū)一般育齡人群地中海貧血篩查結(jié)果與分析［J］.中國優(yōu)生與遺傳雜志，2007，15（10）：103-104.