應(yīng)用CLSI EP10-A2文件對DXI800化學(xué)發(fā)光儀性能評價(jià)的結(jié)果分析

楊方華，楊寶瑞，馬東禮，鄧芳梅，孫莉芳（廣東省深圳市兒童醫(yī)院檢驗(yàn)科 518026）

根據(jù)ISO15189：2007《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室——質(zhì)量和能力的專用要求》及國內(nèi)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《定量臨床檢驗(yàn)方法的初步評價(jià)》（WS／T 228-2002）的要求，臨床實(shí)驗(yàn)室在用于體外診斷前，必須對檢測系統(tǒng)進(jìn)行必要的性能驗(yàn)證，以滿足臨床和科研的需求。本研究應(yīng)用美國臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)（CLSI）制定的EP10-A2文件《定量臨床檢驗(yàn)方法的初步評價(jià)：批準(zhǔn)指南》（第2版）［1］，對Beckman Coulter DXI800型化學(xué)發(fā)光儀檢測人生長激素（hGH）的性能進(jìn)行初步評價(jià)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料來源低、中、高值樣品均采用美國Bio-RAD公司生產(chǎn)的Lyphochek免疫分析質(zhì)控液，低值樣品批號(hào)：40251，靶值為2.15mmol／L；中值樣品批號(hào)：40252，靶值為5.47mmol／L；高值樣品批號(hào)：40253，靶值為10.8mmol／L。

1.2 儀器與試劑Beckman Coulter DXI 800型化學(xué)發(fā)光儀由美國Beckman Coulter公司生產(chǎn)；hGH試劑盒及定標(biāo)液均由美國Beckman Coulter公司提供。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法嚴(yán)格按照CLSI EP10-A2文件要求，每天按中、高、低、中、中、低、低、高、高、中的順序測定各濃度樣本，其中第1個(gè)中值作為測定起始用，不作統(tǒng)計(jì)，后9個(gè)數(shù)據(jù)中的任何一個(gè)出現(xiàn)離群值，都須棄掉該批全部數(shù)據(jù)，并重新測定，共連續(xù)測定5d。

1.4 判斷標(biāo)準(zhǔn)（1）目測離群點(diǎn)及線性，無明顯離群點(diǎn)，測定結(jié)果基本呈線性。（2）絕對偏差的接受范圍，以廠家說明書要求（小于靶值的8%）為標(biāo)準(zhǔn)。（3）總不精密度的接受范圍，以廠家說明書要求（CV%＜10%）為標(biāo)準(zhǔn)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理依照EP10-A2文件要求，運(yùn)用Excel軟件計(jì)算每天的多元回歸分析參數(shù)（即截距、斜率、非線性、互染率及線性漂移），計(jì)量資料采用±s表示，并采用單樣本t檢驗(yàn)對每個(gè)參數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析［2］，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 目測離群點(diǎn)及線性hGH測定結(jié)果目測無離群點(diǎn)，實(shí)測值與靶值間線性良好（Y=0.992 X+0.083，r2=0.978），見圖1、2。

圖1 hGH偏差圖

圖2 hGH線性圖

2.2 hGH偏差分析以各濃度5d的測定結(jié)果均值與其對應(yīng)靶值之差計(jì)算偏差，均小于廠家說明書制定要求（小于靶值的8%），臨床均可接受，結(jié)果見表1。

表1 hGH偏差分析(±s，mol／L）

表1 hGH偏差分析(±s，mol／L）

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2.3 hGH總不精密度評價(jià)按照CLSI EP10-A2文件提供的方法，計(jì)算總不精密度（CV%），各濃度總不精密度均未超過廠家說明書要求（CV%＜10%），臨床均可接受，見表2。

表2 hGH總不精密度分析

2.4 hGH所有測定結(jié)果的多元回歸分析按照EP-10A2文件方法，計(jì)算每天測定結(jié)果的5個(gè)分析參數(shù)（即斜率、截距、攜帶污染、非線性及漂移度）值及t值；采用單樣本t檢驗(yàn)，每個(gè)參數(shù)5d的值與預(yù)期值之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表3。

表3 hGH所有測定的多元回歸分析

3 討 論

臨床實(shí)驗(yàn)室在將新檢測系統(tǒng)用于體外診斷前，有必要對其可接受性能作出初步評價(jià)，而選擇良好的檢測系統(tǒng)是保證患者檢測結(jié)果可靠的前提［3］。檢測系統(tǒng)主要評價(jià)性能包括準(zhǔn)確度、精密度、測量線性范圍及攜帶污染等［4-6］。CLSI EP10-A2文件主要用于評價(jià)臨床實(shí)驗(yàn)室定量分析方法的初步性能，以偏差、截距及斜率指標(biāo)來評價(jià)分析方法的準(zhǔn)確度；以非線性度來評價(jià)方法的線性；以總不精密度和漂移度來評價(jià)其精密度；以攜帶污染率評價(jià)儀器的互染性。該指南具有簡便、用時(shí)短、可操作性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)［7-9］。但是，EP10-A2文件只能對檢測系統(tǒng)的分析性能進(jìn)行初步評價(jià)，如果要對其全面評價(jià)，需按CLSI的EP5-A、EP6-P、EP7-P、EP9-A等文件對其精密度、非線性、抗干擾力、方法學(xué)比較等進(jìn)行全面試驗(yàn)［10-11］。

通過偏差圖及線性圖可以目測離群點(diǎn)和線性，有1個(gè)離群點(diǎn)的某一批分析數(shù)據(jù)均應(yīng)棄去，用另一次分析來替代，并查找離群原因。本研究的偏差圖中未發(fā)現(xiàn)離群點(diǎn)，而且實(shí)測值與靶值間線性很好（r2＞0.95）。按照EP-10A2文件要求，實(shí)驗(yàn)的允許總誤差及允許總不精密度均可由各實(shí)驗(yàn)室自行設(shè)定。本文采用廠家說明書要求作為評判標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果表明允許總誤差和總不精密度均符合廠家要求。同時(shí)，在多元回歸分析中，斜率、截距、線性及漂移的單樣本t檢驗(yàn)，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），也表明偏差的初步評價(jià)符合應(yīng)用要求。EP10-A2文件指出，當(dāng)允許總誤差及總不精密度均可接受時(shí)，無需進(jìn)行多元回歸分析。本文為了評估樣本攜帶污染率的大小，按照EP10-A2文件的方法計(jì)算每天5個(gè)多元回歸分析參數(shù)（即斜率、截距、攜帶污染率、非線性及漂移度）的值及t值，并采用單樣本t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果每個(gè)參數(shù)5d的值與預(yù)期值間，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），表明DXI800化學(xué)發(fā)光分析儀測定hGH的攜帶污染率較低，其抗互染力符合使用要求。

綜上所述，DXI800化學(xué)發(fā)光儀對hGH定量測定經(jīng)用CLSI EP10-A2文件所提供的方法進(jìn)行初步評價(jià)，其偏差及總不精密度均在廠家允許范圍內(nèi)，線性較好，攜帶污染率較低，穩(wěn)定性較好，能滿足臨床常規(guī)檢測及科研需求。

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