白介素-18在慢性丙型肝炎患者中的表達及意義研究＊

和文博，付 囡，趙 蕊，陳茂偉（廣西醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院感染性疾病科，南寧 530021）

全球攜帶丙型肝炎病毒（HCV）者約有1.7億人，慢性丙型肝炎（CHC）是肝硬化及肝細胞癌的常見病因［1］。由于乙型肝炎疫苗在嬰幼兒中廣泛接種，近年來乙型肝炎病毒的流行急劇下降［2］。這就使得HCV感染發(fā)展形成的慢性肝病顯得突出，但HCV感染慢性化的機制目前尚未明確。白介素-18（IL-18）主要由巨噬細胞、樹突細胞等抗原提呈細胞分泌，能夠誘導Th1細胞分化成熟并促進Th1細胞主導的細胞免疫，與Th1／Th2細胞共同作用于病毒的清除、疾病的慢性化等過程。有研究表明IL-18在抗病毒方面具有潛在價值［3］。本研究通過檢測CHC患者IL-18的表達情況及其與病毒復制、肝功能損害的關系，以探討IL-18在CHC病程中的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料選擇2012年12月至2013年4月本院門診及住院CHC患者47例為研究對象，其中男24例，女23例，年齡11月至50歲，平均年齡（29.19±11.74）歲，所有患者均符合2004年中華醫(yī)學會肝病學分會、傳染病與寄生蟲病學分會聯(lián)合發(fā)布的《丙型肝炎防治指南》中CHC診斷標準［4］。選擇同期高校體檢學生20例為健康對照組，其中男10例，女10例，年齡20～29歲，平均年齡（26.55±2.41）歲。以上納入研究對象均排除甲、乙、丁、戊型肝炎及心腦疾病、腎病、糖尿病等重大疾病。兩組一般資料比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2試劑與儀器采用湖北武漢華美生物工程有限公司定量檢測人血清IL-18的酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）試劑盒（檢測范圍：7.8～500pg／mL；產(chǎn)品編號：CSB-E07450h），嚴格按照說明書步驟操作；采用中山大學達安基因股份有限公司的HCV核酸檢測試劑盒（聚合酶鏈反應-熒光探針法）檢測HCV-RNA，檢測下限1.0×103copy／mL；全自動免疫分析儀（機器型號：ARCHITECT i2600sr，正常參考值：0.00～1.00S／CO）檢測HCV抗體（HCV-Ab）；全自動生化儀檢測丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）（機器型號：HITACHI 7600-020，正常參考范圍9～60 U／L）。

1.3 統(tǒng)計學處理采用SPSS16.0統(tǒng)計學軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，服從偏態(tài)分布的計量資料采用中位數(shù)（四分位間距）表示，兩組均數(shù)比較采用秩和檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義；采用Spearman相關分析，r=1表示兩變量呈完全正相關，r=-1表示兩變量呈完全負相關，r接近0表示兩變量順序關聯(lián)性很小。

2 結(jié) 果

2.1 IL-18在CHC患者組與健康對照組中的表達情況CHC患者組血清IL-18的濃度為118.52pg／mL高于對照組的11.09pg／mL，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

2.2 CHC患者IL-18表達情況與HCV-RNA的相關性47例CHC患者中HCV-Ab陽性20例，HCV-Ab陰性27例。HCV-Ab陽性患者IL-18水平為123.61pg／mL（P25、P75為60.31、160.45pg／mL）；HCV-Ab陰 性 患 者IL-18水 平 為118.52pg／mL（P25、P75為59.24、237.18pg／mL）。兩者間比較差異無統(tǒng)計學意義（Z=-0.320，P＞0.05）。HCV-RNA陽性患者定量檢測結(jié)果與IL-18水平進行相關性分析，結(jié)果顯示兩者間無顯著相關性（r=0.085），見圖1。

圖1 HCV-RNA陽性患者定量檢測結(jié)果與IL-18相關性分析

2.3 CHC患者IL-18表達情況與HCV-Ab的相關性47例CHC患者中HCV-RNA陽性15例、HCV-RNA陰性32例。HCV-RNA陽性患者IL-18水平為138.44pg／mL（P25、P75為92.20、162.06pg／mL）；HCV-RNA陰性患者IL-18水平為111.02pg／mL（P25、P75為56.11、211.07pg／mL）。兩者間比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。

2.4 CHC患者IL-18表達情況與ALT的相關性47例CHC患者ALT與IL-18采用Spearman秩相關分析，結(jié)果顯示兩者無顯著相關性（r=0.291），見圖2。

圖2 CHC患者IL-18表達情況與ALT的相關性

3 討 論

HCV感染導致的慢性肝病是嚴重威脅人類健康的全球性問題。免疫機制被認為在CHC發(fā)病中占有重要位置，其中HCV可通過抑制宿主免疫細胞如細胞毒性T淋巴細胞（CTL）等導致HCV持續(xù)感染［5］。CTL是機體感染HCV后的主要效應細胞，需在Th細胞分泌的相關細胞因子調(diào)節(jié)下發(fā)揮作用。Gigi等［6］研究結(jié)果顯示，在CHC患者血清中Th1分泌的干擾素-γ（IFN-γ）降低，Th2分泌的IL-10呈現(xiàn)高表達。Th細胞除自身分泌的細胞因子外還與抗原提呈細胞分泌的細胞因子共同作用于機體感染病毒后的免疫反應，在病毒清除及疾病發(fā)展中共同發(fā)揮作用。IL-18是抗原提呈細胞分泌的細胞因子之一，可誘導Th1細胞的分化成熟并促進Th1細胞主導的細胞免疫。另外，IL-18可以增強CTL細胞毒性活性，又作為IFN-γ的誘導因子，由此有學者提出IL-18可能與抗病毒有一定關系［3］。

目前國內(nèi)外對IL-18在CHC患者中的表達及意義少有研究，且結(jié)論也不統(tǒng)一。本研究結(jié)果顯示，IL-18在CHC患者血清中表達高于健康人（P＜0.05），表明血清IL-18表達水平的升高與CHC感染密切相關。IL-18的升高可能通過促進Th1細胞主導的細胞免疫、誘導機體IFN-γ的產(chǎn)生，從而促進HCV的清除。本研究的結(jié)果與Yue等［7］、張琳等［8］學者的研究結(jié)果一致。但Schvoerer等［9］研究結(jié)果表明，CHC患者與健康組對照組IL-18水平比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。

國外研究結(jié)果顯示，HCV-RNA陽性患者IL-18的表達水平較HCV-RNA陰性患者顯著升高，提出IL-18水平升高可對病毒在肝臟中的持續(xù)表達及復制產(chǎn)生抑制作用［10］。本研究中為了解HCV病毒復制情況與IL-18的關系，比較了HCVRNA陽性患者與陰性患者間IL-18的濃度差異，結(jié)果顯示兩組間無明顯差異（P＞0.05），通過HCV-RNA定量檢測結(jié)果與IL-18含量的相關性分析，結(jié)果顯示兩者間無顯著相關性（r=0.085，P＞0.05），提示IL-18與病毒復制情況無明顯關系。

IL-18是機體促炎因子之一，國內(nèi)外的研究結(jié)果提示HCV會刺激機體巨噬細胞分泌IL-1β和IL-18，從而導致肝臟炎癥、肝功能損傷，而且IL-18升高水平與ALT升高呈正相關［10-12］。本研究對ALT正常與異常組的CHC患者IL-18水平進行Spearman相關分析，結(jié)果顯示ALT與IL-18無明顯相關性（r=0.291，P＞0.05）。結(jié)論與之前研究報道有所不同，可能與本次研究納入的ALT正常和輕度異常病例數(shù)占總病例數(shù)的比例偏高，導致數(shù)據(jù)偏倚有關。因此，關于ALT和IL-18的關系有待擴大ALT中重度異常病例比例，進一步分析研究。

綜上所述，本研究中CHC患者血清IL-18呈現(xiàn)高表達，提示IL-18可能在丙型肝炎慢性感染過程中發(fā)揮一定作用。另外，IL-18與HCV復制及其所致的肝損傷無明顯關系。

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