MACC1在胃癌中的表達及其與血管形成的關(guān)系

楊 勇，胡孔旺

(1.安徽省淮北市濉溪縣人民醫(yī)院普外科，安徽淮北 235100;2.安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院普外科，安徽合肥 230022)

胃癌轉(zhuǎn)移的過程與腫瘤的血管形成有密切的關(guān)系，研究發(fā)現(xiàn)結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移相關(guān)基因1(Metastasis associated in colon cancer 1，MACC1)在多種腫瘤中高表達［1－4］，參與腫瘤的發(fā)生發(fā)展;但MACC1在胃癌組織中的表達以及其余血管形成的關(guān)系研究還較少。本研究通過檢測MACC1在胃癌組織中的表達與臨床病理特征之間的關(guān)系及其與MVD之間的關(guān)系，探討其與臨床病理特征之間以及與胃癌血管形成的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 收集我院近2007年1月—2013年12月手術(shù)切除標本45例，其中男性25例，女性20例，年齡42～75歲，平均年齡52歲，手術(shù)之前未接受過放療及化療的患者，收集手術(shù)標本癌組織，同時另取距離癌組織邊緣5 cm非腫瘤的癌旁組織石蠟標本，10%甲醛固定石蠟包埋，病理切片備用，病歷資料完整，有相關(guān)的組織學(xué)證據(jù)。

1.2 試劑 兔抗人MACC1抗體購自英國Abcam公司，CD34抗體購自美國Santa Cruz公司，免疫組織化學(xué)試劑盒和DAB試劑盒購自北京中杉金橋生物技術(shù)公司。

1.3 方法 免疫組織化學(xué)檢測:免疫組化染色采用鏈霉素－生物素過氧化物酶(S-P)染色法，操作方法根據(jù)試劑盒說明書操作結(jié)合文獻［5］，采用 DAB顯色。MACC1抗體和CD34抗體使用按照說明書進行實驗操作，并用磷酸鹽緩沖液(PBS)設(shè)立陰性對照。

1.4 結(jié)果判讀 MACC1免疫組化結(jié)果為細胞漿著色，根據(jù)腫瘤細胞陽性率進行評分:0分，陰性;1分(+)，陽性率30%;2分(++)，陽性率30% ～70%;3分(+++)，陽性率70%;評分1 分即為陽性［6］。

MVD計算MVD計算根據(jù)文獻進行判讀計算［6］，先在低倍鏡下找腫瘤組織內(nèi)微血管密度最高的區(qū)域(熱點)，然后換×200鏡下，每5個視野的總數(shù)，再除以5，取平均值，即為該腫瘤的MVD。

2 結(jié)果

2.1 MACC1在胃癌組織中的表達 胃癌組織中高表達MACC1，表達部位主要位于細胞質(zhì)中，呈棕黃色顆粒狀物質(zhì)(圖1)。在胃癌組織中MACC1的表達明顯高于癌旁組織(圖2)(P＜0.05)。在胃癌組織中MACC1的表達與胃癌的患者的年齡、性別無關(guān)，而與胃癌的大小、分期、分化、浸潤以及淋巴轉(zhuǎn)移有關(guān)，見表1。

圖1 MACC1在胃癌組織中的陽性表達(S-P染色，×400)

圖2 MACC1在癌旁組織中的陰性表達(S-P染色，×400)

表1 MACC1的表達與胃癌臨床病理特征的關(guān)系(n=45)

2.2 CD34的表達和MVD測定 免疫組化染色用CD34標記胃癌組織血管，其主要表達在血管內(nèi)皮細胞膜，微血管染色呈棕黃色(圖3)。計算胃癌組織中的微血管的數(shù)，發(fā)現(xiàn)MACC1陽性的胃癌組織其微血管密度高于MACC1陰性的胃癌組織(P ＜0.05)，見表2。

圖3 免疫組化顯示胃癌組織中的微血管(S-P染色，×200)

表2 胃癌中MACC1表達與MVD之間的關(guān)系

3 討論

MACC1基因定位于染色體7P21.1，其可作為結(jié)腸癌和胃癌等腹膜播散的標記分子，與腫瘤的轉(zhuǎn)移有著密切的關(guān)系;研究發(fā)現(xiàn)MACC1在結(jié)腸癌、胃癌、卵巢癌以及肝癌中都呈高表達［1－4］，其與腫瘤的發(fā)生發(fā)展有著密切的關(guān)系，在肝癌中其表達越高，生存期越短［4］。本研究發(fā)現(xiàn)，MACC1在胃癌組織中表達高于癌旁組織，且差異明顯，說明其參與胃癌的發(fā)生發(fā)展。

進一步發(fā)現(xiàn)MACC1的表達還與胃癌的大小、分期、分化、浸潤和轉(zhuǎn)移有著密切的關(guān)系，胃癌腫瘤大、分期晚、分化差、浸潤較深以及有淋巴轉(zhuǎn)移者MACC1表達較多。在很多腫瘤中MACC1的表達與患者的預(yù)后密切相關(guān)，其是影響預(yù)后的指標之一，其單核苷酸的多態(tài)性與大腸癌的發(fā)病早及預(yù)后差相關(guān)［7－10］。動物實驗也發(fā)現(xiàn)MACC1過表達促進胃癌細胞生長、增殖、運動、侵襲和轉(zhuǎn)移［2，11－12］，本研究的也進一步證實在胃癌中MACC1與胃癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。

胃癌的發(fā)生發(fā)展與胃癌的血管形成有著密切的聯(lián)系，胃癌體積達到一定程度就必須有血供才能維持正常的生長需要，而腫瘤血管的形成有很多因素參與其中，本研究發(fā)現(xiàn)胃癌組織中MACC1的表達與胃癌的微血管密度有著一定的關(guān)系，陽性表達MACC1的胃癌組織中其血管密度較高，說明MACC1與胃癌組織的血管形成有著一定的聯(lián)系，胃癌中MACC1的表達，可能促進血管的形成，其可能的機制可能是與MACC1促進腫瘤的血管形成有關(guān)，使得胃癌組織中血管形成較多，從而促進腫瘤的生長、浸潤、分化以及轉(zhuǎn)移有關(guān)，其機制可能與MACC1高表達促進腫瘤MMP-2、MMP-9的表達，從而促進腫瘤的血管的形成［13－15］，但是其促進胃癌血管生成的具體機制尚不完全明確，需進一步的深入研究，總之，MAAC1在胃癌組織中高表達，與胃癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，并促進胃癌的血管形成。

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