當(dāng)歸輪作和連作根際土壤中致病菌變化研究

葉文斌+樊亮

摘要：以當(dāng)歸（Angelica sinensis）“90-02”號(hào)為材料，采用大田試驗(yàn)研究連作對(duì)當(dāng)歸產(chǎn)量和品質(zhì)的影響，并測(cè)定了未種植當(dāng)歸的馬鈴薯田土壤（對(duì)照）和當(dāng)歸-馬鈴薯-當(dāng)歸輪作土壤、當(dāng)歸-當(dāng)歸連作土壤中尖孢鐮刀菌（Fusarium oxysporum Schl.）的數(shù)量。結(jié)果表明，連作導(dǎo)致當(dāng)歸產(chǎn)量下降，其根鮮重、分根數(shù)均極顯著下降，根長(zhǎng)顯著下降，對(duì)幼苗生長(zhǎng)以及生理特性也有較大影響；當(dāng)歸-馬鈴薯-當(dāng)歸輪作土壤、當(dāng)歸-當(dāng)歸連作土壤中尖孢鐮刀菌數(shù)量比種植馬鈴薯田土壤（對(duì)照）的均極顯著增多，分別是對(duì)照土壤中的12.63和12.90倍，當(dāng)歸-當(dāng)歸連作土壤中尖孢鐮刀菌數(shù)量與當(dāng)歸-馬鈴薯-當(dāng)歸輪作土壤的相比也極顯著增多。結(jié)果表明，當(dāng)歸連作障礙導(dǎo)致其產(chǎn)量和品質(zhì)均顯著降低，尖孢鐮刀菌數(shù)量增多是引起當(dāng)歸根腐病的主要原因，也可能是當(dāng)歸發(fā)育生長(zhǎng)的主要障礙因素之一。

關(guān)鍵詞：當(dāng)歸（Angelica sinensis）；連作障礙；尖孢鐮刀菌（Fusarium oxysporum Schl.）；數(shù)量變化

中圖分類(lèi)號(hào)：S567.53.044；Q945 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2014）18-4364-04

連作障礙是指在正常的栽培管理措施下，同一塊地連續(xù)多年種植相同作物（連作）造成作物產(chǎn)量降低、品質(zhì)變劣、生長(zhǎng)狀況變差、病蟲(chóng)害發(fā)生加劇的現(xiàn)象[1]。許多作物都存在連作障礙，如豆類(lèi)、水果類(lèi)和蔬菜類(lèi)[1-5]，許多中藥材植物連作障礙也非常嚴(yán)重，如附子、地黃、丹參、蒼術(shù)、西洋參、紫蘇和薏苡等[6-10]。有研究認(rèn)為連作障礙是作物根系分泌的自毒物質(zhì)積累引起化感作用而導(dǎo)致的生長(zhǎng)抑制作用[11]，也有學(xué)者認(rèn)為植物的連作障礙是土壤肥力下降引起的[1，4-5，8-10，12]；現(xiàn)在越來(lái)越多的學(xué)者認(rèn)為連作同一作物或同源作物會(huì)使特定的病原菌大量繁殖，導(dǎo)致土壤微生物群落及多樣性受到破壞，病原拮抗菌數(shù)量減少，微生物種類(lèi)單一，對(duì)下茬作物造成危害[11-13]，而輪作可以斷絕病原菌的營(yíng)養(yǎng)源從而減輕病害的發(fā)生，它能減緩連作障礙的發(fā)生。對(duì)于連作障礙的形成原因不同學(xué)者存在著不同的觀點(diǎn)。

岷歸（Angelica sinensis）又稱(chēng)當(dāng)歸，具有廣泛的藥用價(jià)值，是最常用的中藥，民間素有“十方九歸”之說(shuō)[14]。岷縣當(dāng)歸肉多枝少，氣味香醇，個(gè)頭整齊，無(wú)論是質(zhì)量或數(shù)量，堪稱(chēng)全國(guó)第一，當(dāng)歸在甘肅省岷縣產(chǎn)量占全國(guó)總產(chǎn)量的70%。由鐮刀菌、腐霉菌和軟腐細(xì)菌侵染造成的當(dāng)歸根腐病使幼苗猝倒、萎蔫、根腐，使成藥期和貯藏期根部水浸狀腐爛，嚴(yán)重影響了當(dāng)歸的產(chǎn)量和質(zhì)量，致使岷縣當(dāng)歸藥材質(zhì)量不穩(wěn)定，嚴(yán)重影響了岷縣當(dāng)歸在OTC市場(chǎng)發(fā)展中的地位，同時(shí)也影響了岷縣當(dāng)歸在國(guó)內(nèi)外的聲譽(yù)[15]。長(zhǎng)期的農(nóng)業(yè)實(shí)踐表明，當(dāng)歸連作導(dǎo)致當(dāng)歸根腐病害頻發(fā)，當(dāng)歸生長(zhǎng)受到嚴(yán)重影響，農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上采用“其他作物-當(dāng)歸”輪作形式規(guī)避這一危害。加快解決這一問(wèn)題成為提高當(dāng)歸產(chǎn)量和質(zhì)量的關(guān)鍵，然而關(guān)于當(dāng)歸連作障礙的發(fā)生原因以及種植地土壤微生物的相關(guān)研究未見(jiàn)報(bào)道。本試驗(yàn)以甘肅道地藥材岷歸為研究對(duì)象，采用大田試驗(yàn)比較連作對(duì)當(dāng)歸產(chǎn)量和品質(zhì)的影響，揭示當(dāng)歸連作障礙機(jī)制，并測(cè)定新墾荒的種植馬鈴薯田的土壤、當(dāng)歸-馬鈴薯-當(dāng)歸輪作和當(dāng)歸-當(dāng)歸連作土壤中當(dāng)歸根腐病致病菌尖孢鐮刀菌（Fusarium oxysporum Schl.）的數(shù)量，并對(duì)其分離純化、培養(yǎng)和鑒定，為研究當(dāng)歸連作障礙機(jī)制和提高當(dāng)歸產(chǎn)量與品質(zhì)提供理論與試驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 大田試驗(yàn)地氣候和理化性質(zhì)

大田試驗(yàn)地位于甘肅省岷縣十里鎮(zhèn)甘寨川當(dāng)歸種植示范基地。試驗(yàn)地海拔約2 200 m，年平均日照時(shí)間為2 214.9 h，年平均氣溫為5.7 ℃，絕對(duì)低溫為-26.3 ℃，無(wú)霜期為120 d，年平均水量在817.8 mm左右，5～9月為雨季，占年總量的79.4%。試驗(yàn)地土壤理化性質(zhì)：有機(jī)質(zhì)含量為10.43 g/kg，總氮含量為1.82 g/kg，速效磷含量為10.47 mg/kg，速效鉀含量為30.09 mg/kg，離子交換量為6.97 cmol/kg，pH 6.86。

1.2 試驗(yàn)材料

供試材料為當(dāng)歸“90-02”，由中國(guó)科學(xué)院近代物理研究所和甘肅省定西市旱作農(nóng)業(yè)中心聯(lián)合選育并提供。

1.3 大田試驗(yàn)與產(chǎn)量測(cè)定

在岷縣種植當(dāng)歸期間（7月上旬），在已經(jīng)備好的試驗(yàn)田起畦，畦長(zhǎng)10 m，畦寬120 cm，畦高20 cm。在畦面上開(kāi)設(shè)條溝，溝深約15 cm，溝寬約25 cm，將當(dāng)歸種子放入條溝中，芽頭朝上，株距25 cm×25 cm，將開(kāi)溝的泥土覆蓋前溝，再行排種，依此類(lèi)推，種植用量為150 kg/hm2。種植前用農(nóng)家肥作為底肥，每公頃施350 kg[15]。翌年3月中旬出苗后，正常田間管理。試驗(yàn)處理組1：前茬種過(guò)當(dāng)歸后種植一茬馬鈴薯再種植當(dāng)歸的當(dāng)歸-馬鈴薯-當(dāng)歸輪作；試驗(yàn)處理組2：前茬種植過(guò)當(dāng)歸后，未經(jīng)種植馬鈴薯而留待當(dāng)歸種植時(shí)繼續(xù)種植當(dāng)歸的當(dāng)歸-當(dāng)歸連作。每個(gè)處理組面積各約200 m2。采收時(shí)（10月28日）分別取輪作和連作100 cm×100 cm樣方測(cè)定產(chǎn)量，并分別計(jì)算各樣方根數(shù)?？椒N后每個(gè)樣方選擇20根當(dāng)歸測(cè)量其長(zhǎng)度。每個(gè)處理用“五點(diǎn)采樣法”在四周和對(duì)角線交叉處共取5個(gè)樣方，每個(gè)指標(biāo)測(cè)定重復(fù)5次。

1.4 當(dāng)歸植株生長(zhǎng)生理特性測(cè)定

大田種植60 d后，待當(dāng)歸植株生長(zhǎng)旺盛時(shí)，按照隨機(jī)原則剪取當(dāng)歸植株頂部健康生長(zhǎng)的第2、3片全展葉，帶回實(shí)驗(yàn)室備用。用分光光度法測(cè)定葉綠素含量，用苯酚法測(cè)定可溶性糖含量，用標(biāo)準(zhǔn)曲線法測(cè)定游離脯氨酸的含量，用硫代巴比妥酸法測(cè)定丙二醛含量[16]；按照參考文獻(xiàn)[16，17]的方法，各取定量的當(dāng)歸葉片加入少量的緩沖溶液，低溫研磨成勻漿，采用高速冷凍離心制得不同酶的粗提液，測(cè)定超氧化物歧化酶（SOD）、過(guò)氧化物酶（POD）和過(guò)氧化氫酶（CAT）活性。

1.5 致病菌的鑒定與根際土壤中致病菌數(shù)量的測(cè)定

選取發(fā)病植株并切取病株根莖木質(zhì)部病健交界處，將組織切成0.5 cm×0.5 cm大小的薄片，先用流水清洗5～6次，用0.1% HgCl2消毒8 min后再將葉片分離出，用無(wú)菌去離子水清洗5～6次后，放入超凈工作臺(tái)備用。將滅菌的PDA培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿內(nèi)，然后在無(wú)菌條件下將患病組織1～2片貼在培養(yǎng)基中放入25 ℃光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)5 d，然后挑離培養(yǎng)的孢子純化菌種[18，19]。將致病菌在PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)5～7 d后，觀察菌落的外觀、形態(tài)、菌絲體的顏色以及菌株分泌的色素在培養(yǎng)基中的顏色，鑒定后培養(yǎng)備用。用抖根法[15]將當(dāng)歸根際土壤和未種植過(guò)當(dāng)歸的馬鈴薯根際土壤（作為對(duì)照，該馬鈴薯土壤與當(dāng)歸根際土壤同質(zhì)地）裝到無(wú)菌取樣袋中。所有土壤樣品立即帶回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行無(wú)菌培養(yǎng)和菌群落數(shù)目測(cè)定。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

所有數(shù)據(jù)用SPSS 17.0軟件統(tǒng)計(jì)分析。不同耕作處理下，當(dāng)歸采收后的產(chǎn)量指標(biāo)用單因素方差（One-way）分析進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)（P<0.05或P<0.01）；土壤中的致病菌數(shù)量測(cè)定結(jié)果用單因素方差分析結(jié)合SSR多重比較統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 連作對(duì)當(dāng)歸產(chǎn)量的影響

由表1可知，當(dāng)歸-當(dāng)歸連作的當(dāng)歸產(chǎn)量（根鮮重）明顯下降，與當(dāng)歸-馬鈴薯-當(dāng)歸輪作比較差異極顯著（P<0.01），當(dāng)歸-馬鈴薯-當(dāng)歸輪作產(chǎn)量為當(dāng)歸-當(dāng)歸連作的2.99倍。在連作條件下，當(dāng)歸產(chǎn)后根鮮重和分根數(shù)都明顯下降，根也受到了生長(zhǎng)抑制的影響，而當(dāng)歸產(chǎn)量在連作和當(dāng)歸-馬鈴薯-當(dāng)歸輪作條件下相比較，當(dāng)歸的分根數(shù)極顯著地降低（P<0.01），而根長(zhǎng)則顯著減少（P<0.05）。輪作條件下的當(dāng)歸分根數(shù)約為連作條件下的2倍，根長(zhǎng)也比當(dāng)歸連作條件下的長(zhǎng)。

2.2 連作對(duì)當(dāng)歸幼苗中葉綠素含量的影響

葉綠素是植物光合作用物質(zhì)生產(chǎn)的主要元件，與植物生產(chǎn)關(guān)系密切。由表2可以看出，當(dāng)歸輪作有助于提高幼苗植物的光合作用，提高光和效率，當(dāng)歸連作下當(dāng)歸幼苗葉片葉綠素a含量與當(dāng)歸-馬鈴薯-當(dāng)歸輪作相比極顯著降低（P<0.01），葉綠素b和類(lèi)胡蘿卜素含量與當(dāng)歸-馬鈴薯-當(dāng)歸輪作相比顯著降低和升高（P<0.05），葉綠素a/葉綠素b與當(dāng)歸-馬鈴薯-當(dāng)歸輪作相比極顯著降低（P<0.01），葉綠素含量與當(dāng)歸-馬鈴薯-當(dāng)歸輪作相比極顯著降低（P<0.01）。

2.3 連作對(duì)當(dāng)歸幼苗中可溶性糖、游離脯氨酸和丙二醛含量的影響

由表3可知，當(dāng)歸連作下當(dāng)歸幼苗中可溶性糖含量和丙二醛含量與當(dāng)歸-馬鈴薯-當(dāng)歸輪作相比都極顯著升高（P<0.01）；連作下當(dāng)歸幼苗中游離脯氨酸含量與當(dāng)歸-馬鈴薯-當(dāng)歸輪作相比有顯著的升高（P<0.05）。結(jié)果表明，當(dāng)歸連作后細(xì)胞膜脂質(zhì)的過(guò)氧化程度增大，破壞了當(dāng)歸幼苗細(xì)胞膜的通透性，引起主動(dòng)抗逆的應(yīng)答機(jī)制，增加了滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)可溶性糖、游離脯氨酸和丙二醛物質(zhì)的積累。

2.4 連作對(duì)當(dāng)歸幼苗SOD、POD和CAT的影響

由表4可知，不同耕作處理下當(dāng)歸幼苗體內(nèi)的3種酶活性都發(fā)生了很大的變化。當(dāng)歸連作下幼苗葉片中SOD、POD和CAT活性與當(dāng)歸-馬鈴薯-當(dāng)歸輪作相比均極顯著地降低（P<0.01）。這可能與輪作后增加了微生物的多樣性，減少了致病菌對(duì)當(dāng)歸幼苗的傷害有關(guān)。

2.5 當(dāng)歸根腐病菌種的培養(yǎng)與初步鑒定

在PDA培養(yǎng)基上當(dāng)歸根腐病菌菌落呈乳白色、白色，菌絲較短、短絨狀，氣生菌絲不發(fā)達(dá)，中間有明顯的隆起，菌落背面為淺黃色，由內(nèi)向外逐漸變淡（圖1）。分生孢子梗螺旋式伸長(zhǎng)、不分枝，較長(zhǎng)；大型分生孢子兩端尖削或頂端尖，紡錘形至鐮刀形彎曲或端直，具2～5隔，多數(shù)為3隔，大小為5.0 μm×30.0～37.5 μm；小型分生孢子數(shù)量少，梭形至腎臟形，單胞，無(wú)隔膜，大小為4.5～5.0 μm×5.0～10.0 μm；后垣孢子頂生或間生，橢圓形或球形，平滑（圖2）。由此確定，該菌株為半知菌亞門(mén)絲孢綱瘤座孢目瘤座孢科鐮刀菌屬的尖孢鐮刀菌（F. oxysporum）。

2.6 當(dāng)歸根際土壤與對(duì)照土壤尖孢鐮刀菌數(shù)量比較

當(dāng)歸連作根際土壤與馬鈴薯種植地對(duì)照土壤中尖孢鐮刀菌數(shù)量的比較結(jié)果見(jiàn)表5。經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析和SSR多重比較可知，當(dāng)歸連作根際土壤與當(dāng)歸-馬鈴薯-當(dāng)歸輪作土壤中的尖孢鐮刀菌數(shù)量比對(duì)照土壤的數(shù)量都極顯著增加（P<0.01），而且當(dāng)歸連作與當(dāng)歸-馬鈴薯-當(dāng)歸輪作的根際土壤尖孢鐮刀菌數(shù)量差異也呈極顯著差異（P<0.01），這種現(xiàn)象表明在種植馬鈴薯后，土壤中尖孢鐮刀菌數(shù)量是很少的，當(dāng)種植當(dāng)歸后，土壤中尖孢鐮刀菌數(shù)量增加明顯，且當(dāng)歸連作下尖孢鐮刀菌數(shù)量也明顯增加。這說(shuō)明，尖孢鐮刀菌是當(dāng)歸生產(chǎn)中連作障礙的主要因素之一。

3 討論

當(dāng)歸輪作與連作相比，輪作后產(chǎn)量提高，分根數(shù)也都有明顯的升高。連作下當(dāng)歸幼苗中葉綠素和滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)可溶性糖、游離脯氨酸以及丙二醛的含量與輪作相比都受到了不同程度的影響；幼苗葉片中3種保護(hù)酶SOD、POD和CAT的活性都表現(xiàn)出顯著的降低。為了研究根部致病菌和根際土壤中主要存在的微生物，通過(guò)分離、純化、培養(yǎng)和鑒定后確定根部致病菌為半知菌亞門(mén)絲孢綱瘤座孢目瘤座孢科鐮刀菌屬的尖孢鐮刀菌（F. oxysporum）。

當(dāng)歸連作根際土壤中尖孢鐮刀菌數(shù)量和當(dāng)歸-馬鈴薯-當(dāng)歸輪作中的數(shù)量比對(duì)照土壤中的數(shù)量極顯著增加，而且通過(guò)對(duì)不同耕種次序的土壤菌落進(jìn)行培養(yǎng)研究得到了證實(shí)，這說(shuō)明，是由于尖孢鐮刀菌引起連作障礙，影響了當(dāng)歸的正常生長(zhǎng)和降低了當(dāng)歸的產(chǎn)量，尖孢鐮刀菌是當(dāng)歸生產(chǎn)中連作障礙的主要因素之一。不同的耕作處理使當(dāng)歸幼苗的生長(zhǎng)發(fā)育和產(chǎn)量差距都很明顯，這是由于不同的耕作次序使得當(dāng)歸土壤中致病菌的數(shù)量不同引起的，因?yàn)楫?dāng)歸根部的微生態(tài)系統(tǒng)是當(dāng)歸-種植地土壤微生物-環(huán)境相互作用的復(fù)雜系統(tǒng)，如何處理3者之間的關(guān)系可能是解決當(dāng)歸連作障礙問(wèn)題的關(guān)鍵，在這個(gè)復(fù)雜的系統(tǒng)之中，當(dāng)歸致病菌尖孢鐮刀菌扮演著重要的角色，連作后當(dāng)歸根際尖孢鐮刀菌數(shù)量增多，感染當(dāng)歸后所產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物在當(dāng)歸體內(nèi)局部積累過(guò)多，破壞葉綠體結(jié)構(gòu)而加速葉綠素分解，使葉綠素含量降低，影響到當(dāng)歸植物幼苗光合作用，紊亂了正常的生理代謝過(guò)程，進(jìn)而影響當(dāng)歸根的生長(zhǎng)和有機(jī)物質(zhì)的積累，降低了當(dāng)歸產(chǎn)量。植物在逆境時(shí)為了適應(yīng)和對(duì)抗不利條件，體內(nèi)會(huì)積累大量的可溶性糖、游離脯氨酸和丙二酮等滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)[16，20]。當(dāng)歸連作后當(dāng)歸幼苗體內(nèi)調(diào)節(jié)物質(zhì)明顯升高，這可能調(diào)節(jié)當(dāng)歸幼苗細(xì)胞內(nèi)的滲透壓，穩(wěn)定細(xì)胞中酶分子的活性構(gòu)象，保護(hù)酶免受直接的傷害，增強(qiáng)當(dāng)歸的適應(yīng)能力和生活力，而且連作還會(huì)降低當(dāng)歸體內(nèi)SOD、POD、CAT這3種酶的活性，破壞不同保護(hù)酶的平衡，引起當(dāng)歸生理生化過(guò)程的紊亂，最終導(dǎo)致生長(zhǎng)抑制；也可能是致病菌產(chǎn)生的孢子絲或者次生代謝產(chǎn)物與帶負(fù)電荷的當(dāng)歸細(xì)胞中的核酸結(jié)合引起染色體畸變、降低DNA和RNA活性，干擾核酸代謝[16]，最終導(dǎo)致的當(dāng)歸產(chǎn)量和品質(zhì)的下降。這些不利于當(dāng)歸生長(zhǎng)和發(fā)育的生理變化都與尖孢鐮刀菌的數(shù)量和所產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物有著緊密的關(guān)聯(lián)，所以尖孢鐮刀菌是當(dāng)歸生產(chǎn)中連作障礙的主要因素之一。而當(dāng)歸連作障礙的原因是一個(gè)非常復(fù)雜的生物學(xué)和農(nóng)學(xué)問(wèn)題，要徹底解決和弄清楚其機(jī)理有待更加深入的研究。

參考文獻(xiàn)：

[1] 郭冠瑛，王豐青，范華敏，等.地黃化感自毒作用與連作障礙機(jī)制的研究進(jìn)展[J].中國(guó)現(xiàn)代中藥，2012，14（6）：35-39.

[2] MITHTFER A. Suppression of plant defense in rhizobialegume symbiosis[J]. Trends in Plant Science，2002，30（7）：440-444.

[3] YU J O，SU F Y，MING F Z. Effects of root exudates and aqueous root extracts of cucumber （Cucumis sativus） and allelochemicals on photosynthesis and autioxidant in cucumber[J]. Biochemical Systematics and Ecology，2003，31（2）：129-139.

[4] KITAZAWA H，ASAO T，BAN T，et al. Autotoxicity of root exudates from strawberry in hydroponic culture[J]. The Journal of Horticultural Science and Biotechnology，2005，80（6）：677-680.

[5] HAO Z P，WANG Q，CHRISTIE P，et al. Allelopathic potential of watermelon tissues and root exudates[J]. Scientia Horticulturae，2007，112（3）：315-320.

[6] 張歡強(qiáng)，慕小倩，梁宗鎖，等.附子連作障礙效應(yīng)初步研究[J].西北植物學(xué)報(bào)，2007，27（10）：2112-2115.

[7] 李春格，李曉鳴，王敬國(guó).大豆連作對(duì)土體和根際微生物群落功能的影響[J].生態(tài)學(xué)報(bào)，2006，26（4）：1144-1149.

[8] 張辰露，孫 群，葉 青.連作對(duì)丹參生長(zhǎng)的障礙效應(yīng)[J].西北植物學(xué)報(bào)，2005，25（5）：1029-1034.

[9] 郭蘭萍，黃璐琦，蔣有緒，等.蒼術(shù)根莖及根際土水提物生物活性研究及化感物質(zhì)的鑒定[J].生態(tài)學(xué)報(bào)，2006，26（2）：528-535.

[10] 趙楊景，楊峻山，王玉萍，等.西洋參、紫蘇籽和薏苡根水提物的化感作用[J].中草藥，2004，35（4）：452-455.

[11] 馬云華，魏 珉，王秀峰.日光溫室連作黃瓜根區(qū)微生物區(qū)系及酶活性的變化[J].應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào)，2004，15（6）：1005-1008.

[12] 張淑香，高子勤.連作障礙與根際微生態(tài)研究Ⅱ.根系分泌物與酚酸物質(zhì)[J].應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào)，2000，11（1）：152-156.

[13] YANG C H，CROWLEY D E，MENGE J A. 16S rDNA finger printing of rhizosphere bacterial communities associated with healthy and phytophora infected avocado roots[J]. FEMS Microbiology Ecology，2001，35（2）：129-136.

[14] 趙慶芳，劉 靚，李巧峽，等.15種植物水提液對(duì)當(dāng)歸根腐病抑制活性的初步篩選[J].西北師范大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2012，48（2）：66-69.

[15] 林茂茲，黃少華，陳巧巧，等.太子參連作障礙及其根際土壤尖孢鐮刀菌數(shù)量變化[J].云南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2012，27（5）：716-722.

[16] 中國(guó)科學(xué)院上海植物生理研究所，上海市植物生理學(xué)會(huì).現(xiàn)代植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)指南[M].北京：科學(xué)出版社，1999.95-96，127，303，305.

[17] 葉文斌，樊 亮，贠漢伯.Pb2+對(duì)甘肅紋黨種子萌發(fā)和幼苗生理特性的影響[J].西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2012，21（12）：142-148.

[18] 葉文斌，張和平，樊 亮.中草藥蒼耳、黃瑞鄉(xiāng)水浸液對(duì)小麥條銹病菌的抑制作用[J].中國(guó)農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報(bào)，2013，15（1）：102-108.

[19] 趙慶芳，趙培強(qiáng)，郭鵬輝，等.17種植物水提物對(duì)黃芪根腐病菌的抑制活性初步研究[J].西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2009，37（3）：163-167.

[20] 劉娥娥，宗 會(huì)，郭振飛，等.干旱、鹽和低溫脅迫對(duì)水稻幼苗脯氨酸含量的影響[J].熱帶亞熱帶植物學(xué)報(bào)，2000，8（3）：235-238.

參考文獻(xiàn)：

[1] 郭冠瑛，王豐青，范華敏，等.地黃化感自毒作用與連作障礙機(jī)制的研究進(jìn)展[J].中國(guó)現(xiàn)代中藥，2012，14（6）：35-39.

[2] MITHTFER A. Suppression of plant defense in rhizobialegume symbiosis[J]. Trends in Plant Science，2002，30（7）：440-444.

[3] YU J O，SU F Y，MING F Z. Effects of root exudates and aqueous root extracts of cucumber （Cucumis sativus） and allelochemicals on photosynthesis and autioxidant in cucumber[J]. Biochemical Systematics and Ecology，2003，31（2）：129-139.

[4] KITAZAWA H，ASAO T，BAN T，et al. Autotoxicity of root exudates from strawberry in hydroponic culture[J]. The Journal of Horticultural Science and Biotechnology，2005，80（6）：677-680.

[5] HAO Z P，WANG Q，CHRISTIE P，et al. Allelopathic potential of watermelon tissues and root exudates[J]. Scientia Horticulturae，2007，112（3）：315-320.

[6] 張歡強(qiáng)，慕小倩，梁宗鎖，等.附子連作障礙效應(yīng)初步研究[J].西北植物學(xué)報(bào)，2007，27（10）：2112-2115.

[7] 李春格，李曉鳴，王敬國(guó).大豆連作對(duì)土體和根際微生物群落功能的影響[J].生態(tài)學(xué)報(bào)，2006，26（4）：1144-1149.

[8] 張辰露，孫 群，葉 青.連作對(duì)丹參生長(zhǎng)的障礙效應(yīng)[J].西北植物學(xué)報(bào)，2005，25（5）：1029-1034.

[9] 郭蘭萍，黃璐琦，蔣有緒，等.蒼術(shù)根莖及根際土水提物生物活性研究及化感物質(zhì)的鑒定[J].生態(tài)學(xué)報(bào)，2006，26（2）：528-535.

[10] 趙楊景，楊峻山，王玉萍，等.西洋參、紫蘇籽和薏苡根水提物的化感作用[J].中草藥，2004，35（4）：452-455.

[11] 馬云華，魏 珉，王秀峰.日光溫室連作黃瓜根區(qū)微生物區(qū)系及酶活性的變化[J].應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào)，2004，15（6）：1005-1008.

[12] 張淑香，高子勤.連作障礙與根際微生態(tài)研究Ⅱ.根系分泌物與酚酸物質(zhì)[J].應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào)，2000，11（1）：152-156.

[13] YANG C H，CROWLEY D E，MENGE J A. 16S rDNA finger printing of rhizosphere bacterial communities associated with healthy and phytophora infected avocado roots[J]. FEMS Microbiology Ecology，2001，35（2）：129-136.

[14] 趙慶芳，劉 靚，李巧峽，等.15種植物水提液對(duì)當(dāng)歸根腐病抑制活性的初步篩選[J].西北師范大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2012，48（2）：66-69.

[15] 林茂茲，黃少華，陳巧巧，等.太子參連作障礙及其根際土壤尖孢鐮刀菌數(shù)量變化[J].云南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2012，27（5）：716-722.

[16] 中國(guó)科學(xué)院上海植物生理研究所，上海市植物生理學(xué)會(huì).現(xiàn)代植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)指南[M].北京：科學(xué)出版社，1999.95-96，127，303，305.

[17] 葉文斌，樊 亮，贠漢伯.Pb2+對(duì)甘肅紋黨種子萌發(fā)和幼苗生理特性的影響[J].西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2012，21（12）：142-148.

[18] 葉文斌，張和平，樊 亮.中草藥蒼耳、黃瑞鄉(xiāng)水浸液對(duì)小麥條銹病菌的抑制作用[J].中國(guó)農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報(bào)，2013，15（1）：102-108.

[19] 趙慶芳，趙培強(qiáng)，郭鵬輝，等.17種植物水提物對(duì)黃芪根腐病菌的抑制活性初步研究[J].西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2009，37（3）：163-167.

[20] 劉娥娥，宗 會(huì)，郭振飛，等.干旱、鹽和低溫脅迫對(duì)水稻幼苗脯氨酸含量的影響[J].熱帶亞熱帶植物學(xué)報(bào)，2000，8（3）：235-238.

參考文獻(xiàn)：

[1] 郭冠瑛，王豐青，范華敏，等.地黃化感自毒作用與連作障礙機(jī)制的研究進(jìn)展[J].中國(guó)現(xiàn)代中藥，2012，14（6）：35-39.

[2] MITHTFER A. Suppression of plant defense in rhizobialegume symbiosis[J]. Trends in Plant Science，2002，30（7）：440-444.

[3] YU J O，SU F Y，MING F Z. Effects of root exudates and aqueous root extracts of cucumber （Cucumis sativus） and allelochemicals on photosynthesis and autioxidant in cucumber[J]. Biochemical Systematics and Ecology，2003，31（2）：129-139.

[4] KITAZAWA H，ASAO T，BAN T，et al. Autotoxicity of root exudates from strawberry in hydroponic culture[J]. The Journal of Horticultural Science and Biotechnology，2005，80（6）：677-680.

[5] HAO Z P，WANG Q，CHRISTIE P，et al. Allelopathic potential of watermelon tissues and root exudates[J]. Scientia Horticulturae，2007，112（3）：315-320.

[6] 張歡強(qiáng)，慕小倩，梁宗鎖，等.附子連作障礙效應(yīng)初步研究[J].西北植物學(xué)報(bào)，2007，27（10）：2112-2115.

[7] 李春格，李曉鳴，王敬國(guó).大豆連作對(duì)土體和根際微生物群落功能的影響[J].生態(tài)學(xué)報(bào)，2006，26（4）：1144-1149.

[8] 張辰露，孫 群，葉 青.連作對(duì)丹參生長(zhǎng)的障礙效應(yīng)[J].西北植物學(xué)報(bào)，2005，25（5）：1029-1034.

[9] 郭蘭萍，黃璐琦，蔣有緒，等.蒼術(shù)根莖及根際土水提物生物活性研究及化感物質(zhì)的鑒定[J].生態(tài)學(xué)報(bào)，2006，26（2）：528-535.

[10] 趙楊景，楊峻山，王玉萍，等.西洋參、紫蘇籽和薏苡根水提物的化感作用[J].中草藥，2004，35（4）：452-455.

[11] 馬云華，魏 珉，王秀峰.日光溫室連作黃瓜根區(qū)微生物區(qū)系及酶活性的變化[J].應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào)，2004，15（6）：1005-1008.

[12] 張淑香，高子勤.連作障礙與根際微生態(tài)研究Ⅱ.根系分泌物與酚酸物質(zhì)[J].應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào)，2000，11（1）：152-156.

[13] YANG C H，CROWLEY D E，MENGE J A. 16S rDNA finger printing of rhizosphere bacterial communities associated with healthy and phytophora infected avocado roots[J]. FEMS Microbiology Ecology，2001，35（2）：129-136.

[14] 趙慶芳，劉 靚，李巧峽，等.15種植物水提液對(duì)當(dāng)歸根腐病抑制活性的初步篩選[J].西北師范大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2012，48（2）：66-69.

[15] 林茂茲，黃少華，陳巧巧，等.太子參連作障礙及其根際土壤尖孢鐮刀菌數(shù)量變化[J].云南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2012，27（5）：716-722.

[16] 中國(guó)科學(xué)院上海植物生理研究所，上海市植物生理學(xué)會(huì).現(xiàn)代植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)指南[M].北京：科學(xué)出版社，1999.95-96，127，303，305.

[17] 葉文斌，樊 亮，贠漢伯.Pb2+對(duì)甘肅紋黨種子萌發(fā)和幼苗生理特性的影響[J].西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2012，21（12）：142-148.

[18] 葉文斌，張和平，樊 亮.中草藥蒼耳、黃瑞鄉(xiāng)水浸液對(duì)小麥條銹病菌的抑制作用[J].中國(guó)農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報(bào)，2013，15（1）：102-108.

[19] 趙慶芳，趙培強(qiáng)，郭鵬輝，等.17種植物水提物對(duì)黃芪根腐病菌的抑制活性初步研究[J].西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2009，37（3）：163-167.

[20] 劉娥娥，宗 會(huì)，郭振飛，等.干旱、鹽和低溫脅迫對(duì)水稻幼苗脯氨酸含量的影響[J].熱帶亞熱帶植物學(xué)報(bào)，2000，8（3）：235-238.