西寧地區(qū)健康人群血清總膽紅素參考區(qū)間的調(diào)查

劉淑敏，黎明

(1、青海紅十字醫(yī)院檢驗(yàn)科，青海 西寧810000；2、青海省人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，青海 西寧810002)

生物參考區(qū)間是解釋檢驗(yàn)結(jié)果、分析檢驗(yàn)信息的一個(gè)基本尺度和依據(jù)[1]。臨床檢驗(yàn)對(duì)象由于性別、年齡、居住地區(qū)、季節(jié)、種族等不同，其生物參考區(qū)間存在差異[2]。實(shí)驗(yàn)室為臨床提供檢驗(yàn)項(xiàng)目可靠的生物參考區(qū)間，才能使臨床對(duì)患者或健康體檢者的診斷治療有明確的指引[3]。根據(jù)ISO15189《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室-質(zhì)量和能力的專用要求》[4]的要求，建立或引用適合本實(shí)驗(yàn)室的生物參考區(qū)間，為臨床提供準(zhǔn)確的診斷依據(jù)。為了解本地區(qū)健康人群的總膽紅素水平，并建立適合本地區(qū)的參考區(qū)間，現(xiàn)對(duì)230例體檢者進(jìn)行調(diào)查如下。

1 材料與方法

1.1 隨機(jī)抽取2012年6月-12月在本院進(jìn)行體檢的健康者380例，年齡 14～75歲，平均 36.5歲，選擇其中240例，其調(diào)查問卷內(nèi)容符合要求，相關(guān)檢查均無疾病。

1.2 儀器和試劑 (1)儀器：OLYMPUS AU-2700全自動(dòng)生化分析儀。(2)試劑：奧林巴斯原裝試劑，試劑批號(hào)：BIL-D10511標(biāo)準(zhǔn)品：BECKMAN COULTER SYSTEM CALIBRATOR 批 號(hào) ：BIL-T10511 BIL-D10511質(zhì)控品：中值 BECKMAN COULTER CONTROL SERUM 1批號(hào)：0029A-2013/4/1高值：BECKMAN COULTER CONTROL SERUM 2批號(hào)：0030A-2013/5/1。

1.3 方法 (1)早晨空腹采靜脈血于血清管。嚴(yán)格按照本室SOP上機(jī)操作。選擇健康個(gè)體的具體條件[5]：沒有任何影響檢測結(jié)果的生理特征；未服用藥物或進(jìn)行飲食治療；發(fā)育、精神正常，無心血管、肺腎肝膽胰等器質(zhì)性疾?。蝗齻€(gè)月內(nèi)無輸血史和手術(shù)史；一月內(nèi)未患任何疾?。粙D女不在月經(jīng)期、妊娠期和哺乳期；無酗酒史。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 使用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS13.0進(jìn)行運(yùn)算和統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果

2.1 240例健康參考個(gè)體總膽紅素測定結(jié)果。見表1。按照NCCLSC28-A2文件推薦方法,取20例健康參考個(gè)體對(duì) 《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》(第三版)推薦的總膽紅素參考區(qū)間 3.4～17.1μmol/L進(jìn)行驗(yàn)證,參考區(qū)間驗(yàn)證不通過，需建立適應(yīng)本實(shí)驗(yàn)室的生物參考區(qū)間。同時(shí),查閱資料文獻(xiàn)顯示,總膽紅素存在性別生物差異,按照NCCLSC28-A2文件要求,建立區(qū)間時(shí)分組,每組收集120健康參考個(gè)體.數(shù)據(jù)從小到大排列,判斷剔除離群值,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)不成高斯分布，采用百分位法確定2.5%和97.5%位數(shù)的參考限確定參考區(qū)間。

2.2 離群值結(jié)果判斷 剔除異常值和錯(cuò)誤數(shù)值，回收有效問卷380份,選擇其中240例(男120例女120例)健康人群進(jìn)行分析。離群值的處理：數(shù)據(jù)從小到大排列后判斷是否有離群點(diǎn)：數(shù)據(jù)中疑似離群點(diǎn)可通過1/3規(guī)則進(jìn)行判斷，D是一個(gè)極端觀測值(大的或小的值)和緊接著的極端觀測值(第二大或第二小的值)之間的絕對(duì)差值，R是所有觀測值的全距，即最大極值和最小極值的差值。差值D和數(shù)據(jù)全距R相除。求D/R比值，D/R=1/3為臨界值，如果某個(gè)觀測值的D值等于或大于1/3R值，則該極端值應(yīng)予刪除。男性：(26.09～25.9)/(26.09～6.2)=0.010，D/R≤1/3。 女性：(23.74～23.40)/(23.74～4.30)=0.017，D/R≤1/3，2組數(shù)據(jù)不存在離群點(diǎn)，所以保留所有數(shù)據(jù)。

2.3 作Z檢驗(yàn)，確定檢驗(yàn)項(xiàng)目是否存在生物差異，存在差異進(jìn)行分組。將數(shù)據(jù)代入Z檢驗(yàn)公式得Z=4.097。Z*=3(naverage/120)1/2=3[(n1+n2)/240]1/2=3[(120+120)/240]1/2=3。計(jì)算Z判斷限值判斷是否需要分組：Z=4.097>Z*=3,所以總膽紅素要按性別分組分別統(tǒng)計(jì)。

2.4 總膽紅素生物參考區(qū)間的確定 分析兩組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，若呈高斯正態(tài)分布可按x±1.96s表示95%數(shù)據(jù)分布范圍，若數(shù)據(jù)不呈高斯正態(tài)分布則用百分位數(shù)法確定2.5%和97.5%位數(shù)的參考限，以此確定參考區(qū)間。兩組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分布都不成高斯正態(tài)分布，可按用百分位數(shù)法確定2.5%～97.5%位數(shù)的參考限，以確定參考區(qū)間。本研究總膽紅素生物參考區(qū)間為男性 6.6～25.7μmol/L、女性 4.9～22.5μmol/L。

表1 240例健康參考個(gè)體總膽紅素測定結(jié)果

3 討論

本調(diào)查結(jié)果顯示，西寧地區(qū)健康人群血清總膽紅素參考區(qū)間比《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》(第3版)[6]推薦的高。膽紅素在體內(nèi)有兩個(gè)來源，一是衰老紅細(xì)胞，被肝、脾、骨髓的單核-巨噬細(xì)胞分解，釋放血紅蛋白，后者在限速酶血紅素氧合酶-1的催化下分解為膽綠素、一氧化碳、二價(jià)鐵離子，膽綠素在膽綠素轉(zhuǎn)化酶作用下還原為膽紅素，這種方式生成占膽紅素的80%以上，稱主流膽紅素。另外20%的膽紅素來源于骨髓幼稚細(xì)胞的血紅蛋白(無效造血)和體內(nèi)含有亞鐵血紅素的蛋白質(zhì)(如過氧化氫酶、過氧化物酶及細(xì)胞色素氧化酶與肌紅蛋白等)，稱分流膽紅素。由此可知，血清膽紅素與血紅蛋白存在一定的相關(guān)性，提示西寧地區(qū)血清總膽紅素較平原地區(qū)高，原因可能是地處高原，造成缺氧，Hb相對(duì)升高，進(jìn)而膽紅素的來源也相對(duì)升高，導(dǎo)致本地區(qū)總膽紅素偏高。

因此，我們應(yīng)建立適合本地區(qū)總膽紅素的生物參考區(qū)間。國際化學(xué)委員會(huì)提出的方法[7]，每個(gè)實(shí)驗(yàn)室均應(yīng)建立適用于本實(shí)驗(yàn)室的臨床檢測項(xiàng)目的生物參考區(qū)間，在引用試劑說明書或其它書刊文獻(xiàn)提供的或轉(zhuǎn)移其它實(shí)驗(yàn)室的生物參考區(qū)間之前，必須對(duì)其進(jìn)行驗(yàn)證，以確保適用于本實(shí)驗(yàn)室。西寧地區(qū)為高原地區(qū)，《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》(第3版)推薦的血清總膽紅素的參考區(qū)間經(jīng)驗(yàn)證不適用本地區(qū)，我們通過對(duì)健康體檢人群的調(diào)查分析，采用適合本地區(qū)的血清總膽紅素的參考區(qū)間，為臨床提供可靠的參考區(qū)間。實(shí)驗(yàn)室為臨床提供檢驗(yàn)項(xiàng)目可靠的生物參考區(qū)間，才能使臨床對(duì)患者或健康體檢者的診斷治療有明確的指引[2]。

本文通過收集240例健康參考個(gè)體，建立本地區(qū)總膽紅素生物參考區(qū)間，考慮存在性別差異，需分組建立。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)經(jīng)Z檢驗(yàn)，Z=4.097，Z*=3，Z>Z*,分組后的均值間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，需分2組統(tǒng)計(jì)，分別確定總本地區(qū)總膽紅素生物參考區(qū)間為男性 6.6～25.7μmol/L、女性 4.9～22.5μmol/L。且男性高于女性，與國內(nèi)文獻(xiàn)報(bào)道[8，9]相符?？赡芘c男、女的內(nèi)分泌水平、勞動(dòng)強(qiáng)度等存在差異有關(guān)。

檢測項(xiàng)目因不同的實(shí)驗(yàn)方法等因素，參考區(qū)間存在差異。建立的參考區(qū)間應(yīng)定期邀請(qǐng)臨床醫(yī)師參加實(shí)驗(yàn)室生物參考區(qū)間的評(píng)審可以彌補(bǔ)信息開源的不足，獲取本地區(qū)人群生命體變化的資料、疾病診治的新進(jìn)展，以保證生物參考區(qū)間的適用性。

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