高效液相色譜在藥物分析中的應(yīng)用

陳藍(lán) 劉冠男

高效液相色譜法是一種非常重要的化學(xué)分離分析手段，廣泛運(yùn)用于鑒別、雜質(zhì)檢查、含量測定、體內(nèi)分析等藥物分析測試與藥物質(zhì)量分析方法的建立。

高效液相色譜（HPLC）是20世紀(jì)60年代末70年代初出現(xiàn)并發(fā)展起來的一項(xiàng)分離分析技術(shù)，隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，色譜也不斷的被改進(jìn)與完善。由于其具有高分離速率，高分離效率，高檢測靈敏度等特點(diǎn)，高效液相成為化學(xué)、醫(yī)學(xué)、工業(yè)、農(nóng)學(xué)、商檢和法檢等學(xué)科領(lǐng)域中重要的分離分析技術(shù)。尤其是藥物，直接關(guān)系到人的生命健康，只有對藥品的研制、生產(chǎn)、經(jīng)營和使用各個環(huán)節(jié)進(jìn)行全面的動態(tài)的藥物分析研究和監(jiān)測控制，才能確保藥品使用的安全、有效與合理。因此，高效液相色譜廣泛運(yùn)用于藥物分析的各個方面。

1高效液相色譜在藥物鑒別中的應(yīng)用

在H P L C法中，保留時(shí)間與組分的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)有關(guān)，是定性的參數(shù)，可用于藥物的鑒別，中國藥典采用此法進(jìn)行藥物鑒別。由于西紅花價(jià)格昂貴，經(jīng)常出現(xiàn)假品偽品，常見偽品有紅花、菊花、玉米須、蓮須、紙漿等；其摻偽現(xiàn)象比較復(fù)雜，給真?zhèn)舞b別和優(yōu)劣評價(jià)帶來難度。安慧景采用高效液相色譜法對西紅花及其偽品的特征成分進(jìn)行鑒別，確定正品西紅花中沒有綠原酸和羥基紅花黃素A，并建立了HPLC-DAD含量測定方法，通過測定樣品中的綠原酸、HSYA，一次性鑒別西紅花、常見偽品菊花、紅花，并測定摻偽量。此方法不僅能鑒別藥材及提取物是否摻偽，而且能確定所摻偽品的種類并估測摻偽量，是對西紅花摻偽鑒別方法的有益探討和嘗試[1]。隨著高效液相色譜技術(shù)的發(fā)展和在藥典中的重要性不斷提高，出現(xiàn)了一些采用高效液相色譜法鑒別藥物的新方法。例如，克拉霉素、利福平滴眼液、崗梅等七種冬青屬中草藥以及南北五味子的鑒別等[2-5]。這些新方法的發(fā)展無疑為進(jìn)一步完善、開發(fā)藥物鑒別的方法提供了一種新的思路。

2高效液相色譜在藥物雜質(zhì)檢查中的應(yīng)用

隨著H P L C 技術(shù)的不斷發(fā)展，有不少藥物分析工作者研究和探討了H P L C法在藥物的有關(guān)物質(zhì)檢查方面的應(yīng)用，并建立了一些新方法。例如，鹽酸噻吩諾啡、奧沙西泮原料藥及其片劑、鹽酸喹那普利原料藥、氟他胺中有關(guān)物質(zhì)的檢查等[6-9]。這些方法簡便、可行且專屬性較強(qiáng)，是藥物雜質(zhì)檢測的新發(fā)展。程磊等通過合成胸腺法新雜質(zhì)對照品后確證其結(jié)構(gòu)，并進(jìn)行雜質(zhì)測定的方法學(xué)研究測得各雜質(zhì)相對于胸腺法新的校正因子，從而建立一種高效液相色譜測定胸腺法新及其制劑中雜質(zhì)的方法，并可對含量超過0.1%的雜質(zhì)進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定[10]。胡政華等建立苯磺酸左旋氨氯地平片中右旋雜質(zhì)的HPLC檢查方法，該方法專屬性強(qiáng)，重復(fù)性好，結(jié)果準(zhǔn)確，是手性藥物中雜質(zhì)分析方法的進(jìn)步[11]。

3高效液相色譜在藥物含量測定中的應(yīng)用

用高效液相色譜法測定合成藥及其制劑的含量，可以消除藥物中的雜質(zhì)、制劑中的附加劑及共存藥物的干擾。張美娟采用高效液相色譜法測定舒心糖漿中阿魏酸的含量，所建立的方法分離效果好、靈敏、準(zhǔn)確、簡便[12]。此外，高效液相色譜在復(fù)方制劑中藥物含量測試中也有廣泛應(yīng)用，如月乃湯中甘草的鑒別和甘草酸含量測定[13]以及復(fù)方葛斛膠囊中葛根素含量的測定等[14]。

4高效液相色譜在體內(nèi)藥物分析中的應(yīng)用

與氣相色譜法相比，高效液相色譜法不受樣品揮發(fā)性、熱穩(wěn)定性及相對分子質(zhì)量的限制，只需把樣品制成溶液即可測定，非常適用于高沸點(diǎn)、熱穩(wěn)定性差、相對分子量大的有機(jī)合成藥物。張莉等建立了一種快速、準(zhǔn)確測定大鼠血清中（E）-3-（3，5-二羥基-4-異丙基苯基）丙烯酸含量的反相HPLC分析方法，該方法準(zhǔn)確可靠，重現(xiàn)性好，可用于臨床前藥代動力學(xué)研究中血藥濃度的測定[15]。付洪瑜等建立大鼠血漿中卡瓦內(nèi)酯麻醉椒苦素的液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用（LC-MS）定量分析方法，并用于大鼠體內(nèi)藥物動力學(xué)研究，該分析方法特異性好、分析速度快、靈敏度高，可用于臨床前藥物動力學(xué)研究[16]。

綜上所述，高效液相色譜法分析速度快、分離效率高、檢測靈敏度高、檢測自動化、適用范圍廣、組分易回收、樣品處理簡單。高效液相色譜法還可以在檢查雜質(zhì)的同時(shí)進(jìn)行含量測定， 為分析工作節(jié)約了時(shí)間，同時(shí)也降低了分析成本。因此在藥物分析的各個方面都有優(yōu)勢。該文原載于中國社會科學(xué)院文獻(xiàn)信息中心主辦的《環(huán)球市場信息導(dǎo)報(bào)》雜志http：//www.ems86.com總第547期2014年第15期-----轉(zhuǎn)載須注名來源近年來， HPLC 法在儀器、檢測器、固定相等方面都有很大的發(fā)展，與其他分析技術(shù)的聯(lián)用也越來越成熟。如高效液相色譜儀和電感耦合等離子體質(zhì)譜儀聯(lián)用、高效液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用以及高效液相色譜-傅立葉變換紅外吸收光譜聯(lián)用等多種技術(shù)。高效液相色譜與其他技術(shù)的聯(lián)用是高效液相色譜今后的主要發(fā)展方向，也將是今后質(zhì)量規(guī)范化、國際化的重要途徑。

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（作者單位：中國計(jì)量學(xué)院）