上海市成人靜脈血淋巴細(xì)胞絕對(duì)值參考范圍調(diào)查與探討

劉曼嬌，岳 波，唐大海，黃國(guó)其

淋巴細(xì)胞是構(gòu)成機(jī)體免疫系統(tǒng)的主要細(xì)胞群，在機(jī)體免疫應(yīng)答中起重要作用，淋巴細(xì)胞的數(shù)量和功能的變化與超敏反應(yīng)、免疫缺陷病、自身免疫性疾病、持續(xù)性病毒感染、腫瘤等關(guān)系密切，因此研究淋巴細(xì)胞絕對(duì)值與相關(guān)疾病的關(guān)系具有重要意義。淋巴細(xì)胞絕對(duì)值是血常規(guī)中的一項(xiàng)參數(shù)，很多醫(yī)院的正常參考范圍都是直接引用《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第3版的標(biāo)準(zhǔn)，這樣顯然欠妥。筆者認(rèn)為，該參考范圍應(yīng)用前需加以驗(yàn)證，有條件的臨床實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)自身不同檢測(cè)系統(tǒng)建立各自人群特征的參考區(qū)間［1]。

1 對(duì)象與方法

1.1 對(duì)象 選取2012年3－11月來(lái)我院體檢的上海地區(qū)各企事業(yè)單位職工(包括部隊(duì)、傳媒、醫(yī)療、工廠、公安系統(tǒng)等)作為研究對(duì)象，年齡18～60歲，所有選取對(duì)象經(jīng)我院各項(xiàng)檢查(肝功能、腎功能、血脂、血糖、B超、胸透、心電圖等)排除異常者。檢驗(yàn)結(jié)果以均數(shù)±3倍標(biāo)準(zhǔn)差±3s)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行剔除，統(tǒng)計(jì)有效人數(shù)共3 081人，其中男1 778人，女1303人;按年齡分組，18～39歲為青年組，40～60歲為中年組，其中男青年組988人，男中年組790人，女青年組732人，女中年組571人。

1.2 標(biāo)本采集 檢測(cè)對(duì)象空腹，坐位，由檢驗(yàn)科人員使用真空管采血法采集。

1.3 儀器與試劑 日本Sysmex公司XT-1800i五分類(lèi)全自動(dòng)血液分析儀和配套原裝試劑。

1.4 檢測(cè)項(xiàng)目 白細(xì)胞計(jì)數(shù)(WBC)、淋巴細(xì)胞百分比(LY%)、淋巴細(xì)胞絕對(duì)值等24個(gè)項(xiàng)目。淋巴細(xì)胞絕對(duì)值采用激光流式細(xì)胞檢測(cè)結(jié)合核酸熒光染色技術(shù)。

1.5 檢測(cè)方法 Sysmex XT-1800i五分類(lèi)全自動(dòng)血液分析儀每半年由廠家進(jìn)行1次校準(zhǔn)，并進(jìn)行校準(zhǔn)驗(yàn)證。在校準(zhǔn)有效期內(nèi)參加上海市臨床檢驗(yàn)中心的室間質(zhì)量評(píng)價(jià)，結(jié)果均合格，確保檢測(cè)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確度。每日標(biāo)本檢測(cè)前采用高、低2個(gè)濃度水平質(zhì)控品進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)量控制，確保結(jié)果在控后才開(kāi)始檢測(cè)。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 使用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件包對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)，各組數(shù)據(jù)均符合正態(tài)性分布，統(tǒng)計(jì)各組均值)和標(biāo)準(zhǔn)差(s)，使用參數(shù)法x±1.96s確定95%可信區(qū)間(CI，即參考范圍)，按照NCCLS指南，各組間比較采用Z檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 按性別分組 男女2組均符合正態(tài)分布，男性淋巴細(xì)胞絕對(duì)值分布見(jiàn)圖1。男性為(2.18±0.59)×109/L，女性為(2.06±0.57)×109/L。采用Z 檢驗(yàn)進(jìn)行組間比較，男性高于女性，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。由±1.96s分別得出 95%CI:男性為(1.02～3.35)×109/L，女性為(0.94 ～3.18)×109/L。

圖1 男性淋巴細(xì)胞分布直方圖

2.2 按年齡分組 各年齡組均符合正態(tài)分布，見(jiàn)表1。采用Z檢驗(yàn)分別進(jìn)行同性別組間比較，男青年組略高于男中年組，女青年組略高于女中年組，但差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。

表1 上海市不同性別不同年齡組間淋巴細(xì)胞絕對(duì)值比較

2.3 95%CI 將本次調(diào)查的95%CI與其他文獻(xiàn)和《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第3版比較，見(jiàn)表2。由于淋巴細(xì)胞絕對(duì)值符合正態(tài)分布，所以可以由x±1.96s算出95%CI，反過(guò)來(lái)，可以由95%CI推出均值和標(biāo)準(zhǔn)差。先計(jì)算出每個(gè)參考范圍的均值和標(biāo)準(zhǔn)差，然后采用Z檢驗(yàn)分別與本結(jié)果進(jìn)行比較。除了南充地區(qū)女性和本地區(qū)的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義外，其他地區(qū)和本地區(qū)的差異都有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。由于操作規(guī)程中的參考范圍來(lái)源的樣本量未知，無(wú)法進(jìn)行Z檢驗(yàn)，故將本次調(diào)查的均值作為樣本均數(shù)，操作規(guī)程的均值作為總體均數(shù)，采用t檢驗(yàn)進(jìn)行比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。

表2 上海市成人淋巴細(xì)胞絕對(duì)值調(diào)查結(jié)果與其他文獻(xiàn)比較(×109/L)

2.4 參考范圍的驗(yàn)證 按照NCCLS指南，驗(yàn)證參考范圍需要20例以上正常人群標(biāo)本，假如受試者中不超過(guò)10%的觀測(cè)值落在起始報(bào)告的界限之外，試劑生產(chǎn)廠商或其他實(shí)驗(yàn)室報(bào)告的95%參考限可以有效地應(yīng)用于接收實(shí)驗(yàn)室。將本次調(diào)查新建立的淋巴細(xì)胞絕對(duì)值參考范圍為參考范圍Ⅰ，操作規(guī)程中的參考范圍為參考范圍Ⅱ，用本次調(diào)查的3 081例樣本分別對(duì)2個(gè)參考范圍進(jìn)行驗(yàn)證，分別統(tǒng)計(jì)落在2個(gè)參考范圍之外的百分比，見(jiàn)表3。結(jié)果顯示兩者都可以有效地應(yīng)用于本實(shí)驗(yàn)室。

2.5 參考范圍的應(yīng)用 分別用2個(gè)參考范圍對(duì)我院2012年5－9月住院患者的淋巴細(xì)胞絕對(duì)值結(jié)果進(jìn)行判讀統(tǒng)計(jì)，共13 675例，其中男9 107例，女4 568例，結(jié)果超出參考范圍的視為陽(yáng)性，分別統(tǒng)計(jì)2個(gè)參考范圍各自判讀的陽(yáng)性率，見(jiàn)表4。參考范圍Ⅰ判讀的男性陽(yáng)性率約為參考范圍Ⅱ的1.52倍，參考范圍Ⅰ判讀的女性陽(yáng)性率約為參考范圍Ⅱ的1.52倍。

表3 2個(gè)參考范圍的驗(yàn)證后差異比較

表4 2個(gè)參考范圍判讀13 675例標(biāo)本的陽(yáng)性率比較

3 討論

本次調(diào)查顯示，18～60歲之間的男性淋巴細(xì)胞絕對(duì)值高于女性，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。同性別之間，青年組淋巴細(xì)胞絕對(duì)值略高于中年組，這種現(xiàn)象和國(guó)外文獻(xiàn)報(bào)道的淋巴細(xì)胞絕對(duì)值有隨年齡的增高而遞減的趨勢(shì)相吻合［7]。本次調(diào)查中同性別2個(gè)年齡組間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可能是由于在18～60歲這個(gè)年齡段中，淋巴細(xì)胞絕對(duì)值受年齡的影響比較小，因此可以把青年組和中年組合并作為1個(gè)年齡組來(lái)設(shè)立參考范圍。

由表2可以看出，上海地區(qū)淋巴細(xì)胞絕對(duì)值參考范圍與大部分地區(qū)存在差異。因此，不同地區(qū)、不同實(shí)驗(yàn)室應(yīng)該建立各自檢測(cè)系統(tǒng)的參考區(qū)間［8]。國(guó)際臨床化學(xué)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)聯(lián)合會(huì)(IFCC)建議，每個(gè)有條件的臨床實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)不同檢測(cè)系統(tǒng)建立各自人群特征的參考區(qū)間［9]。本次調(diào)查初步建立了本實(shí)驗(yàn)室上海地區(qū)成人靜脈血淋巴細(xì)胞絕對(duì)值的參考范圍。

美國(guó)CLIA-88要求實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證廠家的參考區(qū)間是否適合實(shí)驗(yàn)室患者的群體［6]。觀察2個(gè)參考范圍的驗(yàn)證結(jié)果發(fā)現(xiàn)，兩者都符合落在參考范圍之外的觀測(cè)值不超過(guò)10%的條件，即2個(gè)參考范圍都可以有效地應(yīng)用于本實(shí)驗(yàn)室，2個(gè)參考范圍都可以在一定程度上減少假陽(yáng)性。由表4可以看出，用參考范圍Ⅰ判讀淋巴細(xì)胞絕對(duì)值結(jié)果得到的陽(yáng)性率約為參考范圍Ⅱ的1.52倍，即參考范圍Ⅰ比參考范圍Ⅱ多檢出了52%存在淋巴細(xì)胞絕對(duì)值異常的患者。但2個(gè)參考范圍都符合NCCLS指南，都可以有效減少假陽(yáng)性，但參考范圍Ⅰ比參考范圍Ⅱ提高了檢測(cè)淋巴細(xì)胞絕對(duì)值異常的靈敏度，所以與操作規(guī)程比較，本次調(diào)查得到的淋巴細(xì)胞絕對(duì)值參考范圍更適合本實(shí)驗(yàn)室。

本次調(diào)查新建立的參考范圍提高了檢測(cè)淋巴細(xì)胞絕對(duì)值異常的靈敏度，可以減少一部分患者的漏診和誤診。某些淋巴系的血液病(比如漿細(xì)胞白血病、慢淋等)在早期出現(xiàn)外周血淋巴細(xì)胞絕對(duì)值的輕微升高時(shí)，用操作規(guī)程中的參考范圍判讀可能就是陰性，未能引起臨床重視，導(dǎo)致延遲診斷或漏診;而用新的淋巴細(xì)胞絕對(duì)值參考范圍判讀可能就是陽(yáng)性，能夠及時(shí)提醒臨床進(jìn)行相關(guān)方面的排查。在某些病毒感染的病例中，淋巴細(xì)胞絕對(duì)值升高不明顯，用新參考范圍判讀是陽(yáng)性，可以及時(shí)發(fā)現(xiàn)病毒感染，而用操作規(guī)程中的參考范圍判斷可能就是陰性，此時(shí)患者如果再伴隨疼痛、緊張等因素導(dǎo)致WBC生理性升高，那么臨床就很可能誤診為細(xì)菌感染。所以本次建立的新的淋巴細(xì)胞絕對(duì)值參考范圍或許可以減少一些細(xì)菌感染的誤診，降低抗生素的誤用。

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