• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    反相高效液相色譜法測定東方草莓中兒茶素的含量

    2014-09-20 12:44:45,,,,,,,*
    食品工業(yè)科技 2014年17期
    關(guān)鍵詞:項下兒茶素草莓

    ,,,,,,,*

    (1.云南民族大學(xué)民族藥資源化學(xué)國家民委-教育部重點實驗室,昆明 650500;2.青海省食品藥品檢驗所,西寧 810016)

    反相高效液相色譜法測定東方草莓中兒茶素的含量

    李蓉1,劉海青2,楊春濤1,江志勇1,郭俊明1,駱桂法2,黃相中1,*

    (1.云南民族大學(xué)民族藥資源化學(xué)國家民委-教育部重點實驗室,昆明 650500;2.青海省食品藥品檢驗所,西寧 810016)

    建立東方草莓中(+)-兒茶素的含量測定方法。采用Agilent ZORBAX SB-C18色譜柱(4.6mm×150mm,5μm)分離;以乙腈-0.1%磷酸水為流動相進行梯度洗脫,流速為1mL/min,檢測波長為280nm,對10批東方草莓中的(+)-兒茶素進行了含量測定。結(jié)果表明:(+)-兒茶素的保留時間為14.543min,其線性范圍為0.0512~0.6400μg(R2=0.9999);加樣回收率為99.70%(RSD 2.67%)。所建方法操作簡單,穩(wěn)定可靠,可用于東方草莓的質(zhì)量評價。

    東方草莓,(+)-兒茶素,反相高效液相色潽法,含量測定,質(zhì)量控制

    東方草莓FragariaorientalisLozinsk.為薔薇科(Rosaceae)草莓屬植物,俗稱野草莓,為藥食同源性藥材。在我國主要分布于青海、甘肅、四川、陜西、山西以及東北、華中各省,朝鮮、蒙古及蘇聯(lián)遠東地區(qū)也有分布[1]。東方草莓藏藥名為“志達薩增”,干燥全草入藥,常用于血熱性化濃癥,肺胃瘀血,黃水病膿瘍[2],為藏藥經(jīng)典驗方“七十味珍珠丸(然鈉桑培)”[3]、“二十五味珍珠丸”[4]、“骨質(zhì)增生乙組合(壓迫神經(jīng)引起疼痛)”、“八味秦皮丸”[5]等的重要成分。

    長久以來,東方草莓作為藏藥中的常用重要品種,缺少統(tǒng)一的質(zhì)量標準衡定其質(zhì)量,為保證其用藥安全與藥效,本課題組對東方草莓的質(zhì)量進行了深入研究。目前尚未見有關(guān)東方草莓化學(xué)成分的具體報道。本課題組對其進行化學(xué)成分研究,經(jīng)分離、鑒定發(fā)現(xiàn)(+)-兒茶素為東方草莓中的一主要化學(xué)成分。(+)-兒茶素具有抗病毒、抗癌、降血糖、抗菌、清除自由基等作用[6-10]。因此,可將(+)-兒茶素作為東方草莓中的特征性成分。

    近年來,已有文獻報道用高效液相法測定綠茶、杜仲、苦楝皮中兒茶素的含量[11-15],但目前未見有關(guān)東方草莓中兒茶素含量測定的相關(guān)報道。本實驗用高效液相色譜法建立了東方草莓中(+)-兒茶素的含量測定方法,為東方草莓的質(zhì)量控制研究提供科學(xué)依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1材料與儀器

    (+)-兒茶素對照品 中國藥品生物制品鑒定所提供,批號為11877-201203,純度為97.20%;藥材 本實驗中使用了7個產(chǎn)地的10批藥材,見表1;乙腈、甲醇 色譜純;磷酸 分析純;水 超純水。

    表1 10批不同來源的東方草莓藥材Table 1 F. orientalis Lozinsk from 10 different sources

    Agilent 1200高效液相色譜儀、Agilent ZORBAX SB-C18色譜柱(4.6mm×150mm,5μm) 安捷倫科技有限公司;DIONEX ULtiMate 3000高效液相色譜儀 戴安公司;Waters XTerra? RP18色譜柱(5μm,3.9×150mm) Waters公司;S105DU電子分析天平、AR224CN電子天平 瑞士梅特勒公司;AS20500A數(shù)控超聲波清洗器 云南科儀玻有限公司;JP-150A-8高速多功能粉粹機 永康市久品工貿(mào)有限公司;DW100.P實驗室超純水機 上海和泰儀器有限公司。

    1.2實驗方法

    1.2.1 對照品溶液的制備 精密稱取(+)-兒茶素對照品1.28mg,置于50mL容量瓶中,加甲醇-水(1∶1)超聲溶解,定容,搖勻,過0.45μm的濾膜,即得 0.0256mg/mL的對照品溶液。

    1.2.2 供試品溶液的制備 經(jīng)優(yōu)選后的供試品溶液制備方法:取本品粉末0.30g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入甲醇-水(1∶1)10mL,密塞后稱定此時具塞錐形瓶重量,放置1h,超聲處理20min,放冷,再稱定質(zhì)量,用甲醇-水(1∶1)溶液補足減失的重量,搖勻,過濾,取續(xù)濾液過0.45μm的濾膜,即得供試品溶液。

    1.2.3 色譜條件 Agilent ZORBAX SB-C18色譜柱(4.6mm×150mm,5μm),柱溫:35℃;流動相乙腈(A)-0.1%磷酸(B),梯度洗脫(0~6min,6% A;6~20min,6%~8% A;20~ 25min,8%~10% A);檢測波長280nm;流速1.0mL/min。

    1.2.4 加樣回收率測定樣品的制備 精密稱得(+)-兒茶素對照品2.45mg,置10mL容量瓶中,加甲醇-水(1∶1)溶液適量,超聲溶解并稀釋至刻線,搖勻即得對照品溶液(濃度為0.2450mg/mL)。取已知含量的東方草莓樣品(8號)6份,每份0.30g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入甲醇-水(1∶1)溶液9mL、濃度為0.2450mg/mL的對照品溶液1mL,共10mL溶液,密塞后稱定此時具塞錐形瓶重量,按照1.2.2方法制備供試品溶液。

    2 結(jié)果與分析

    2.1提取工藝的確定

    對提取溶劑的考察時,考慮到東方草莓中鞣質(zhì)豐富,在文獻[11-13,15-19]的基礎(chǔ)上,本實驗不僅用水、乙醇-水(1∶1)、甲醇-水(1∶1)、乙醇和甲醇作為提取溶劑,還用了丙酮和乙醚,結(jié)果發(fā)現(xiàn)丙酮和乙醚在回流和超聲條件下幾乎不能將東方草莓中的(+)-兒茶素溶出,乙醇-水(1∶1)和甲醇-水(1∶1)對(+)-兒茶素的提取效率較好且相當,從節(jié)省經(jīng)濟考慮,選擇甲醇-水(1∶1)為最佳提取溶劑??疾炝顺暫突亓?種提取方法,結(jié)果表明兩者的差別不大。由于兒茶素有4個同分異構(gòu)體,長時間受熱易發(fā)生差向立體異構(gòu)化反應(yīng),轉(zhuǎn)變?yōu)槠渫之悩?gòu)體[20],因此,本實驗用室溫超聲提取,以避免加熱對樣品測定的影響。對藥材的浸泡時間和超聲時間進行了考察,結(jié)果表明,藥材用甲醇-水(1∶1)浸泡60min后室溫超聲提取20min,(+)-兒茶素的提取率較高。實驗結(jié)果詳見表2。

    表2 東方草莓中(+)-兒茶素的提取工藝Table 2 Extraction process of(+)-catechin in F. orientalis Lozinsk

    2.2色譜條件的選擇

    2.2.1 波長的選擇 兒茶素類化合物屬典型的黃烷醇類化合物[10],具有兩個吸收帶,即E2帶和B帶,分別在210nm左右和270~280nm處[21]。本實驗曾采用雙波長(210nm和280nm)檢測,但由于210nm作為檢測波長時基線漂移嚴重,所以選用280nm單波長檢測。

    2.2.2 流動相的選擇 參考文獻[11-14,19],本實驗曾采用甲醇-0.1%磷酸水(10∶90)、乙腈-0.1%磷酸水(8∶92)等度洗脫,從供試品的分離情況和出峰時間等綜合分析,最后選擇以乙腈-0.1%磷酸水按1.2.3項下優(yōu)選的色譜條件可保證分離度并避免干擾。

    2.3標準曲線的建立

    精密吸取以上對照品溶液2、10、15、20、25μL進樣,按照1.2.3項下的色譜條件進行分析。以對照品的進樣量(μg)為橫坐標(X),對照品峰面積為縱坐標(Y),進行回歸處理,得回歸方程:Y=510.23X-1.0499(R2=0.9999),線性范圍為0.0512~0.6400μg。(見圖1)

    圖1 (+)-兒茶素的標準曲線Fig. 1 Standard curve of(+)-catechin

    2.4方法學(xué)考察

    2.4.1 耐用性考察 選擇不同型號的高效液相色譜儀(DIONEX ULtiMate 3000)、不同型號的色譜柱依照1.2.3項下優(yōu)選的色譜條件進行耐用性實驗。理論塔板數(shù)以(+)-兒茶素峰計算不低于8000,此時指標成分能與其他相鄰峰分離,分離度>1.5。此時,對照品和供試品液相圖譜見圖2。

    表3 精密度實驗Table 3 Precision of the measured results

    表4 重現(xiàn)性實驗Table 4 Reproducibility of the measured results

    表5 回收率實驗Table 5 Recoveries of the measured results

    圖2 對照品溶液(A)及供試品溶液(B)的HPLC圖Fig. 2 The HPLC chromatogran of the standard solution(A)and the sample solution(B)

    2.4.2 精密度考察 吸取2.1下的對照品溶液(濃度為0.0256 mg/mL),按照1.2.3項下優(yōu)選的色譜條件測定,連續(xù)進樣5次,每次10μL,分別記錄峰面積。RSD為0.30%,表明系統(tǒng)的精密度良好。結(jié)果見表3。

    2.4.3 重現(xiàn)性考察 取8號來源的東方草莓6份,按1.2.2項下優(yōu)選的提取工藝制備供試品溶液,分別依照1.2.3項下優(yōu)選的色譜條件測定,進樣量為10μL,計算藥材中兒茶素含量。平均值為0.0493mg/mL,RSD為2.89%。結(jié)果見表4。

    2.4.4 回收率的測定 取1.2.4項下供試品溶液依1.2.3項下優(yōu)選的色譜條件分別測定,進樣量為5μL,平均回收率為99.70%,RSD為2.67%。結(jié)果見表5。

    2.4.5 穩(wěn)定性實驗 分別吸取同一供試品溶液,依照1.2.3項下優(yōu)選的色譜條件,在0、2、5、8、12、15、20、24、38、45、50、65h進樣10μL,測定檢定成分峰面積。結(jié)果表明,供試品溶液8h內(nèi)RSD為0.27%,12h內(nèi)RSD為1.25%,24h內(nèi)RSD為1.37%,65h內(nèi)RSD為1.38%,供試品溶液在65h內(nèi)穩(wěn)定。結(jié)果見表6。

    2.5樣品的含量測定

    取7個產(chǎn)地的10批藥材粉末,每個樣品平行2份,按照1.2.2優(yōu)選的提取工藝制備供試品溶液,依1.2.3項下優(yōu)選的色譜條件分別測定,進樣量為5~30μL,測定結(jié)果見表7。

    表6 穩(wěn)定性實驗Table 6 Experiment results of the sample stability

    表7 10批不同來源的東方草莓藥材中(+)-兒茶素的含量Table 7 Content of(+)-catechin in F. orientalis Lozinsk. from 10 different sources

    3 結(jié)論

    本實驗采用高效液相色譜法測定了東方草莓中(+)-兒茶素含量,分別考察了不同提取溶劑、提取方法及提取時間對東方草莓中(+)-兒茶素提取率的影響,得出東方草莓中(+)-兒茶素提取工藝(詳見1.2.2項方法),并建立了色譜分析條件(詳見1.2.3項方法)。該方法操作簡單易行,精密度高,重現(xiàn)性和穩(wěn)定性好,回收率為99.70%,可用于東方草莓中(+)-兒茶素含量測定。

    經(jīng)查閱文獻[18],兒茶素類化合物在加熱條件下不穩(wěn)定。為保證測定結(jié)果的準確性,本實驗所使用的對照品溶液現(xiàn)配現(xiàn)用(如果不能在當天完成分析測試,需將對照品溶液置于低溫冰箱中保存,時間為2~3d)。通過對供試品溶液的穩(wěn)定性考察,結(jié)果表明供試品溶液可在低溫下存放2~2.5d;由于供試品的制備方法簡便,測定周期短,建議現(xiàn)配制現(xiàn)用。

    從表6的測定結(jié)果說明,蛇莓中的(+)-兒茶素含量明顯高于東方草莓;不同產(chǎn)地的藥材中(+)-兒茶素含量有差別,西藏地區(qū)>青海地區(qū)>成都地區(qū)??梢?(+)-兒茶素的含量與東方草莓生長的地理特征有著直接關(guān)系,并且海拔越高東方草莓中的(+)-兒茶素含量越高。

    [1]吳征鎰主編.中國植物志(37卷)[M].北京:科學(xué)出版社,2004:235.

    [2]賈敏如,李星煒.中國民族藥志要[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2005:281.

    [3]加永澤培,杜元灝.藏藥七十味珍珠丸對大鼠腦缺血梗塞面積的影響[J].西藏醫(yī)藥雜志.2012,33(3):56-57.

    [4]王智森,趙獻超,王凱梅,等.二十五味珍珠丸治療腦出血后遺癥臨床療效觀察[J].中西醫(yī)結(jié)合研究,2013,8,5(4):172-175.

    [5]中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標準[S].藏藥第一冊.1995:241.

    [6]孫文基,繩金房.天然活性成分簡明手冊[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,1998:109.

    [7]曾亮,黃建安,李赤翎,等.兒茶素的抑菌效果及機理研究[J].食品工業(yè)科技,2009,30(5):89-92.

    [8]Jankun J,Selman S H,Swiercz R,etal. Why drinking green tea could prevent cancer[J]. Nature,1997,387(5):561-561.

    [9]Sakanaka S,Aizawa M,Kim M,etal. Inhibitory effects of green tea polyphenols on growth and cellular adherence of an oral bacterium,Porphyromonas gingvalis[J]. Biosci Biotechnol Biochem.,1996,60(5):745-749.

    [10]劉超,陳若蕓.兒茶素及其類似物的化學(xué)和生物活性研究進展[J].中國中藥雜志,2004,29(10):1017-1021.

    [11]Tetsuhisa G,Yuko Y,Masaaki K,etal. Simultaneous analysis of individual catechins and caffeine in green tea[J]. Journal of Chromatography A,1996,749:295-299.

    [12]Henning S M,Claudia F L,Lee H W,etal. Catechin content of 18 teas and a green tea extract supplement correlates with the antioxidant capacity[J]. Nutrition and Cancer,2003,45(2):226-235.

    [13]Chen Q S,Zhao J W,Chaitep S,etal. Simultaneous analysis of main catechins contents in green tea(Camellia sinensis(L.))by Fourier transform near infrared reflectance(FT-NIR)spectroscopy[J]. Food Chemistry,2009,113:1272-1277.

    [14]曹丹,楊莉,侴桂新,等.苦楝皮中兒茶素的含量測定研究[J].中國藥學(xué)雜志,2010,45(17):1035-1037.

    [15]賈智若,李兵,李耀華,等.反相高效液相色譜法測定杜仲中兒茶素的含量[J].中國實驗方劑學(xué)雜志,2013,19(5):117-119.

    [16]夏晶,夏斌峰,季申. 反相高效液相色譜法測定拳參中兒茶素的含量[J].中國中藥雜志,2007,32(11):1103-1104.

    [17]王麗娟,張鳳有.HPLC法測定蒙成藥亞順-12中的兒茶素的含量[J].中國民族醫(yī)藥雜志,2012,6:53-54.

    [18]王鋼力,于健東,田金改,等.兒茶藥材化學(xué)成分分析——反相高效液相色譜法測定兒茶中的兒茶素和表兒茶素的含量[J].藥物分析雜志,1999,19(2):88-90.

    [19]潘金火,嚴國俊,盧歡.反相HPLC測定金蕎麥藥材和飲片中表兒茶素的含量.中國藥學(xué)雜志,2010,45(14):1093-1096.

    [20]陸蘊如主編.中藥化學(xué)[M].北京:學(xué)苑出版社,1997:135-136.

    [21]戴軍,王洪新,陳尚衛(wèi),等.茶葉及茶多酚中兒茶素的高效液相色譜分析方法研究[J].色譜,2001,19(5):398-402.

    Content determination of catechin inFragariaorientalisLozinsk. by RP-HPLC

    LiRong1,LiuHai-qing2,YangChun-tao1,JiangZhi-yong1,GuoJun-ming1,LuoGui-fa2,HuangXiang-zhong1,*

    (1. Key Laboratory of National Medicine Supported Jointly By State Ethnic Affairs Commission and Ministry of Education,Yunnan University of Nationalities,Kunming 650500,China;2. Qinghai Provincial Institute For Food and Drug Control,Xining 810016,China)

    The purpose was to establish the method of(+)-catechin inFragariaorientalisLozinsk. The samples were performed on Agilent ZORBAX SB-C18(4.6mm×150mm,5μm)column,eluted gradiently with mixture of acetonitrile-0.1% phosphate solution at a flow rate of 1mL/min,and detected at 280nm. With this method,(+)-catechin in 10 batches ofF.orientalisLozinsk. was determined. Results showed that(+)-catechin retention time was 14.543min. The calibration curves had good linearity within the range of 0.0512~0.6400μg(R2=0.9999). The average recovery of(+)-catechin was 99.70%(RSD 2.67%). The method was easy and stable,and could be used for the quantitative analysis ofF.orientalisLozinsk.

    FragariaorientalisLozinsk.;(+)-catechin;assay;quality control

    2013-12-25 *通訊聯(lián)系人

    李蓉(19 -),碩士研究生,主要從事天然藥物活性成分及質(zhì)量控制研究。

    國家藥典委員會項目(M11);國家自然科學(xué)基金項目(21262047);云南民族大學(xué)傳統(tǒng)傣藥藥用物質(zhì)基礎(chǔ)研究創(chuàng)新團隊。

    TS207.3

    A

    1002-0306(2014)17-0000-00

    10.13386/j.issn1002-0306.2014.17.001

    猜你喜歡
    項下兒茶素草莓
    超高效液相色譜法測定茶葉中的兒茶素
    貨貿(mào)項下外匯業(yè)務(wù)
    中國外匯(2019年10期)2019-08-27 01:58:22
    服貿(mào)項下外匯業(yè)務(wù)
    中國外匯(2019年10期)2019-08-27 01:58:22
    UCP600項下電子簽字剖析
    中國外匯(2019年22期)2019-05-21 03:15:02
    信用證項下的退單爭議
    中國外匯(2019年21期)2019-05-21 03:04:22
    草莓
    空腹吃草莓
    采草莓
    小青蛙報(2014年7期)2014-03-21 21:21:14
    全甲基化沒食子兒茶素沒食子酸酯的制備
    兒茶素酶促制備茶黃素的研究進展
    茶葉通訊(2014年2期)2014-02-27 07:55:38
    亚洲成人久久性| 国产男人的电影天堂91| 亚洲av熟女| 亚洲人与动物交配视频| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 夫妻性生交免费视频一级片| 99热网站在线观看| 99久久无色码亚洲精品果冻| 极品教师在线视频| av在线亚洲专区| 精品一区二区三区人妻视频| www日本黄色视频网| 男女边吃奶边做爰视频| 亚洲欧美日韩高清专用| 免费人成在线观看视频色| 在线天堂最新版资源| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 亚洲一区高清亚洲精品| 欧美日本视频| 午夜福利高清视频| 国产高清视频在线观看网站| 99久久精品国产国产毛片| 一本一本综合久久| 晚上一个人看的免费电影| 久久亚洲国产成人精品v| 午夜福利高清视频| 久久久精品欧美日韩精品| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 日韩一区二区视频免费看| 身体一侧抽搐| a级毛片a级免费在线| 日韩 亚洲 欧美在线| 欧美最黄视频在线播放免费| 男人舔奶头视频| 哪里可以看免费的av片| 国产美女午夜福利| 国产伦精品一区二区三区四那| 亚洲成人久久性| 国产亚洲91精品色在线| 亚洲四区av| 国产在视频线在精品| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 黄色配什么色好看| 欧美高清成人免费视频www| 精品一区二区三区视频在线| 国产亚洲精品久久久com| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 日日摸夜夜添夜夜爱| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 亚洲欧美日韩高清专用| 性欧美人与动物交配| 中文在线观看免费www的网站| 免费av观看视频| 国产黄片美女视频| 久久热精品热| 草草在线视频免费看| 观看美女的网站| 成年免费大片在线观看| av国产免费在线观看| 深爱激情五月婷婷| 亚洲一区高清亚洲精品| 国产精品1区2区在线观看.| 亚洲欧美成人综合另类久久久 | 午夜精品国产一区二区电影 | 一级二级三级毛片免费看| 99热这里只有是精品在线观看| 国产精品人妻久久久久久| 日韩av不卡免费在线播放| 久久精品综合一区二区三区| 精品人妻熟女av久视频| av在线亚洲专区| 亚洲欧美精品专区久久| 国产成人a∨麻豆精品| 亚洲不卡免费看| 国产黄片美女视频| 国产成人精品婷婷| 桃色一区二区三区在线观看| av在线亚洲专区| 国产 一区精品| 天美传媒精品一区二区| 亚洲国产精品国产精品| 日本黄大片高清| 国产精品一区二区三区四区久久| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 波多野结衣巨乳人妻| 久久久午夜欧美精品| 久久久精品欧美日韩精品| 女人被狂操c到高潮| 精品少妇黑人巨大在线播放 | 女人十人毛片免费观看3o分钟| 校园春色视频在线观看| 天堂中文最新版在线下载 | 中文在线观看免费www的网站| av免费观看日本| 久久人人爽人人爽人人片va| 成年免费大片在线观看| 日韩,欧美,国产一区二区三区 | 久久久久久久久久久丰满| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 亚洲av男天堂| 一进一出抽搐动态| 99久久九九国产精品国产免费| 国内揄拍国产精品人妻在线| 国产片特级美女逼逼视频| av专区在线播放| 波多野结衣高清无吗| 精品久久久久久成人av| 亚洲第一区二区三区不卡| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 少妇丰满av| 亚洲精品影视一区二区三区av| 精品人妻一区二区三区麻豆| 欧美+亚洲+日韩+国产| 听说在线观看完整版免费高清| 桃色一区二区三区在线观看| 插逼视频在线观看| 综合色av麻豆| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| .国产精品久久| 97超视频在线观看视频| 亚洲成人久久爱视频| 亚洲无线观看免费| 我的女老师完整版在线观看| 午夜激情福利司机影院| 白带黄色成豆腐渣| 长腿黑丝高跟| 中文字幕制服av| 在线观看免费视频日本深夜| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 国产老妇女一区| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 麻豆国产av国片精品| 赤兔流量卡办理| 国产一区二区三区av在线 | 边亲边吃奶的免费视频| 一区二区三区四区激情视频 | 日韩强制内射视频| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 成年女人看的毛片在线观看| 超碰av人人做人人爽久久| 99热这里只有精品一区| av.在线天堂| 我的女老师完整版在线观看| 久久99热6这里只有精品| a级毛片免费高清观看在线播放| 2022亚洲国产成人精品| 国产成人一区二区在线| 日本在线视频免费播放| 国产精品三级大全| .国产精品久久| 男女边吃奶边做爰视频| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 久久久久国产网址| 亚洲人成网站高清观看| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜 | 日韩在线高清观看一区二区三区| 午夜a级毛片| 亚洲七黄色美女视频| 国产精品久久久久久久久免| 欧美区成人在线视频| 高清日韩中文字幕在线| 最近的中文字幕免费完整| 国产精品人妻久久久久久| 日日啪夜夜撸| 男女视频在线观看网站免费| 日韩一区二区视频免费看| 午夜福利在线在线| 亚洲精品影视一区二区三区av| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 国产乱人视频| 天美传媒精品一区二区| 国产在线精品亚洲第一网站| 久久人人精品亚洲av| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 别揉我奶头 嗯啊视频| 欧美三级亚洲精品| 男女边吃奶边做爰视频| 亚洲不卡免费看| 亚洲电影在线观看av| 国产一区二区在线av高清观看| 免费在线观看成人毛片| 在线观看免费视频日本深夜| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 日本三级黄在线观看| 久久精品91蜜桃| 亚洲国产欧美人成| 亚洲不卡免费看| 国产精品一区二区性色av| 亚洲无线在线观看| 欧美高清性xxxxhd video| 在线播放国产精品三级| 午夜福利高清视频| 免费搜索国产男女视频| 久久这里有精品视频免费| 人人妻人人澡欧美一区二区| 身体一侧抽搐| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 免费看日本二区| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 色播亚洲综合网| 99热网站在线观看| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 夜夜爽天天搞| 天天一区二区日本电影三级| 禁无遮挡网站| 黄片无遮挡物在线观看| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 欧美3d第一页| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 亚洲国产精品久久男人天堂| 人妻少妇偷人精品九色| 亚洲精品国产成人久久av| 一进一出抽搐gif免费好疼| 亚洲av成人精品一区久久| 禁无遮挡网站| 我要搜黄色片| 久久精品影院6| 国产私拍福利视频在线观看| 国产高清激情床上av| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 国产成人一区二区在线| 久久久a久久爽久久v久久| 日韩一区二区视频免费看| 国产v大片淫在线免费观看| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 国产精品嫩草影院av在线观看| 国产美女午夜福利| 99久久人妻综合| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 国产成人freesex在线| 免费观看在线日韩| 国产免费一级a男人的天堂| 国内揄拍国产精品人妻在线| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 超碰av人人做人人爽久久| 亚洲内射少妇av| 嫩草影院新地址| 午夜免费激情av| 99热6这里只有精品| 亚洲一区高清亚洲精品| 欧美三级亚洲精品| 国产成人a∨麻豆精品| 精品国内亚洲2022精品成人| 国产伦精品一区二区三区视频9| 国产成人aa在线观看| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 欧美一区二区国产精品久久精品| 婷婷色综合大香蕉| 天美传媒精品一区二区| 看黄色毛片网站| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 国产亚洲91精品色在线| 嫩草影院精品99| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 国产一区二区在线av高清观看| av视频在线观看入口| 国产亚洲精品久久久com| 久久久国产成人免费| 日韩,欧美,国产一区二区三区 | 欧美性猛交黑人性爽| 欧美另类亚洲清纯唯美| 91aial.com中文字幕在线观看| 亚洲精品国产av成人精品| 久久亚洲国产成人精品v| 日韩中字成人| 少妇熟女欧美另类| 国产高潮美女av| 91久久精品国产一区二区成人| 99热精品在线国产| 久久精品国产清高在天天线| 欧美3d第一页| 99国产极品粉嫩在线观看| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 91狼人影院| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 在线免费观看不下载黄p国产| 在线观看66精品国产| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 十八禁国产超污无遮挡网站| 国内揄拍国产精品人妻在线| 免费看日本二区| 日韩人妻高清精品专区| 99riav亚洲国产免费| 伦精品一区二区三区| 五月玫瑰六月丁香| 久久人妻av系列| 美女大奶头视频| 久99久视频精品免费| 国产精品1区2区在线观看.| 激情 狠狠 欧美| 成人综合一区亚洲| 91麻豆精品激情在线观看国产| 免费观看的影片在线观看| 在线播放国产精品三级| 亚洲第一电影网av| 日韩欧美在线乱码| 悠悠久久av| 99热网站在线观看| 丰满人妻一区二区三区视频av| 国产精品一及| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 午夜激情欧美在线| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 2022亚洲国产成人精品| 国产精品一及| 69人妻影院| 亚洲最大成人手机在线| 舔av片在线| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 大型黄色视频在线免费观看| 只有这里有精品99| 国产精品无大码| 高清日韩中文字幕在线| 国产精品,欧美在线| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄 | 亚洲美女搞黄在线观看| 最近的中文字幕免费完整| 天天躁日日操中文字幕| 好男人视频免费观看在线| 日本黄色片子视频| av福利片在线观看| a级毛片a级免费在线| 欧美成人免费av一区二区三区| 欧美日韩国产亚洲二区| 国产精品,欧美在线| 日韩 亚洲 欧美在线| 麻豆av噜噜一区二区三区| 国产在线男女| 免费看a级黄色片| 偷拍熟女少妇极品色| 亚洲一区高清亚洲精品| 啦啦啦韩国在线观看视频| 熟女电影av网| 日韩av不卡免费在线播放| 搡女人真爽免费视频火全软件| 国产精品久久视频播放| 99久久无色码亚洲精品果冻| 最后的刺客免费高清国语| 麻豆国产av国片精品| 成人午夜精彩视频在线观看| 波多野结衣高清无吗| 精品一区二区三区人妻视频| 寂寞人妻少妇视频99o| www.色视频.com| 久久久色成人| 亚洲国产色片| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 免费电影在线观看免费观看| 欧美成人a在线观看| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 国产亚洲精品久久久久久毛片| av免费观看日本| 亚洲欧洲日产国产| 在线观看午夜福利视频| 少妇人妻精品综合一区二区 | 精品久久久噜噜| 麻豆一二三区av精品| 成人亚洲欧美一区二区av| 欧美日韩精品成人综合77777| 五月玫瑰六月丁香| 青青草视频在线视频观看| 男人狂女人下面高潮的视频| 久久热精品热| 高清毛片免费观看视频网站| 黄色欧美视频在线观看| 看非洲黑人一级黄片| 国产精品一区www在线观看| 国产伦在线观看视频一区| 成人国产麻豆网| 禁无遮挡网站| 99热精品在线国产| 日本免费一区二区三区高清不卡| 欧美一区二区亚洲| 精品国内亚洲2022精品成人| 国产老妇女一区| 深夜精品福利| 最后的刺客免费高清国语| 看片在线看免费视频| 在线观看免费视频日本深夜| 嫩草影院新地址| 99热这里只有是精品在线观看| 精品久久久噜噜| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 一进一出抽搐gif免费好疼| 在线免费观看的www视频| 免费观看人在逋| av女优亚洲男人天堂| 国产高清三级在线| 神马国产精品三级电影在线观看| 哪里可以看免费的av片| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 日本成人三级电影网站| 少妇的逼好多水| 麻豆国产av国片精品| 国内精品一区二区在线观看| 国产成人精品婷婷| 国产大屁股一区二区在线视频| 久久国产乱子免费精品| 国产老妇伦熟女老妇高清| 亚洲色图av天堂| 中国国产av一级| 一本精品99久久精品77| eeuss影院久久| 亚洲欧美日韩高清专用| 91精品一卡2卡3卡4卡| 亚洲国产精品sss在线观看| 99在线视频只有这里精品首页| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 久久久久久国产a免费观看| 天堂影院成人在线观看| 国产精品无大码| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 亚洲av中文av极速乱| 午夜激情福利司机影院| 中文欧美无线码| 国产一级毛片在线| 亚洲欧美成人综合另类久久久 | 天天一区二区日本电影三级| 好男人视频免费观看在线| 你懂的网址亚洲精品在线观看 | 亚洲欧美日韩高清在线视频| 国产一区二区激情短视频| 亚洲欧美成人精品一区二区| 99国产精品一区二区蜜桃av| 全区人妻精品视频| 51国产日韩欧美| 神马国产精品三级电影在线观看| 国产精品蜜桃在线观看 | 免费看av在线观看网站| 男人舔女人下体高潮全视频| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 99热只有精品国产| 看黄色毛片网站| 天美传媒精品一区二区| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 亚洲国产色片| 亚洲自拍偷在线| 成人亚洲精品av一区二区| 草草在线视频免费看| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久 | 亚洲欧洲国产日韩| 久久久精品大字幕| av在线天堂中文字幕| 婷婷亚洲欧美| 男人和女人高潮做爰伦理| 亚洲精品自拍成人| 午夜福利成人在线免费观看| 亚洲美女搞黄在线观看| 日韩欧美三级三区| 免费av观看视频| 欧美日韩乱码在线| 九九在线视频观看精品| 国产亚洲av嫩草精品影院| 国产爱豆传媒在线观看| 99久国产av精品| 婷婷六月久久综合丁香| 99精品在免费线老司机午夜| 哪里可以看免费的av片| 亚洲在久久综合| 国模一区二区三区四区视频| 成人毛片60女人毛片免费| 青春草国产在线视频 | 午夜爱爱视频在线播放| 国产一区二区三区av在线 | 九色成人免费人妻av| 久久久欧美国产精品| 日韩成人av中文字幕在线观看| .国产精品久久| 亚洲国产色片| 国产精品无大码| 亚洲第一电影网av| 国产精品日韩av在线免费观看| 色5月婷婷丁香| 色播亚洲综合网| 寂寞人妻少妇视频99o| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 成人国产麻豆网| 天堂网av新在线| 九九热线精品视视频播放| 国产激情偷乱视频一区二区| 波多野结衣高清作品| 亚洲在线观看片| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 99久久精品热视频| 中文字幕制服av| 亚洲精品成人久久久久久| a级毛色黄片| 最好的美女福利视频网| 色视频www国产| 3wmmmm亚洲av在线观看| 在线播放国产精品三级| 高清日韩中文字幕在线| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 亚洲久久久久久中文字幕| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 一边摸一边抽搐一进一小说| 伦理电影大哥的女人| 国产高清有码在线观看视频| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 一夜夜www| 国产精品99久久久久久久久| 狠狠狠狠99中文字幕| 一级黄色大片毛片| 国内精品宾馆在线| 成年女人看的毛片在线观看| 久久九九热精品免费| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 成熟少妇高潮喷水视频| av免费观看日本| 亚洲图色成人| 99久久精品热视频| 国产大屁股一区二区在线视频| 久久久久久久久久黄片| 嘟嘟电影网在线观看| 2021天堂中文幕一二区在线观| 一级黄片播放器| 亚洲真实伦在线观看| 国产69精品久久久久777片| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 美女 人体艺术 gogo| 两个人的视频大全免费| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 日本免费一区二区三区高清不卡| 午夜激情欧美在线| 久久欧美精品欧美久久欧美| 桃色一区二区三区在线观看| 日本色播在线视频| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 深爱激情五月婷婷| 天堂中文最新版在线下载 | 中文字幕av成人在线电影| 99热这里只有精品一区| 久久久精品94久久精品| 伦理电影大哥的女人| 精品人妻熟女av久视频| 色噜噜av男人的天堂激情| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 一级二级三级毛片免费看| 精品不卡国产一区二区三区| 国产中年淑女户外野战色| 韩国av在线不卡| 亚洲欧美成人综合另类久久久 | 久久久午夜欧美精品| 日本三级黄在线观看| 国产精品爽爽va在线观看网站| 九草在线视频观看| 国产精品一区www在线观看| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 午夜精品一区二区三区免费看| 日本免费a在线| 人妻夜夜爽99麻豆av| 欧美极品一区二区三区四区| 国产精品日韩av在线免费观看| 波野结衣二区三区在线| 成人av在线播放网站| 草草在线视频免费看| 日韩欧美在线乱码| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 人人妻人人澡欧美一区二区| 99热这里只有是精品50| 校园人妻丝袜中文字幕| 三级国产精品欧美在线观看| 晚上一个人看的免费电影| 国产成人福利小说| 婷婷精品国产亚洲av| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 黑人高潮一二区| 黄色配什么色好看| 麻豆国产av国片精品| 精品国产三级普通话版| 中文字幕av在线有码专区| 亚洲va在线va天堂va国产| 久久国产乱子免费精品| av专区在线播放| 97热精品久久久久久| 亚洲真实伦在线观看| 亚洲在线观看片| 免费搜索国产男女视频| 国产极品天堂在线| 亚洲在线观看片| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 直男gayav资源| 国产精品日韩av在线免费观看| 欧美区成人在线视频| 久久草成人影院| 变态另类丝袜制服| 久久久久久久久久久免费av| 久久精品夜色国产| 97超视频在线观看视频| 在线播放无遮挡| av卡一久久| 国产爱豆传媒在线观看| 又爽又黄无遮挡网站| 精品久久久久久久久亚洲| 人妻久久中文字幕网| 精品国产三级普通话版| 亚洲人成网站高清观看| 国产高清视频在线观看网站| 麻豆一二三区av精品| 观看美女的网站| 亚洲av二区三区四区| 高清毛片免费观看视频网站| 国产免费一级a男人的天堂| 秋霞在线观看毛片| 久久人人精品亚洲av| 欧美极品一区二区三区四区| www.色视频.com| 啦啦啦观看免费观看视频高清|