頭孢匹林鈉注射液的人體藥代動(dòng)力學(xué)研究

杜曉琳，雍小蘭，黃娟，馮仕銀，李楠，王藍(lán)天

（中國(guó)人民解放軍成都軍區(qū)總醫(yī)院 臨床藥學(xué)科，四川 成都 610083）

頭孢匹林鈉注射液的人體藥代動(dòng)力學(xué)研究

杜曉琳，雍小蘭，黃娟，馮仕銀，李楠，王藍(lán)天

（中國(guó)人民解放軍成都軍區(qū)總醫(yī)院 臨床藥學(xué)科，四川 成都 610083）

目的研究頭孢匹林鈉注射液在健康成年人體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)。方法12名健康志愿者分別按照0.5，1.0，4.0 g單次和1.0 g劑量13次靜脈滴注頭孢匹林鈉注射液后，用HPLC-MS／MS法測(cè)定血漿和尿液中頭孢匹林的濃度，用WinNonLin 6.3軟件計(jì)算主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。結(jié)果受試者0.5，1.0，4.0 g單次或1.0 g多次注射試驗(yàn)藥物后，頭孢匹林鈉的主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)：Cmax分別為（34.86±6.93），（74.77±24.23），（319.0±44.5），（89.26±28.04）μg／mL；AUC0-t分別為（12.86±3.46），（28.31±7.46），（163.21±34.57），（27.30±7.22）μg／（mL·h）；t1／2分別為（0.55±0.21），（0.72±0.22），（0.71±0.27），（0.72±0.25）；1.0 g單次給藥后8 h尿液中頭孢匹林鈉的累積排泄率為（44.9±12.66）%。結(jié)論靜脈滴注頭孢匹林鈉注射液0.5～4.0 g，在中國(guó)健康志愿者的體內(nèi)呈線性藥代動(dòng)力學(xué)特征，連續(xù)給藥在體內(nèi)無(wú)蓄積，藥物尿液排泄量較大。

頭孢匹林鈉；液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜；藥代動(dòng)力學(xué)

島津LC-20A型高效液相色譜；API3200型三重四級(jí)桿串聯(lián)質(zhì)譜儀，配備電噴霧電離源（ESI源）以及Analyst1.5.1軟件，美國(guó)ABI公司；Millipore超純水系統(tǒng)（美國(guó)Millipore公司）；AB135-S型十萬(wàn)分之一天平（瑞士Mettler Toledo公司）。

1.2 受試者選擇 本試驗(yàn)方案經(jīng)過(guò)中國(guó)人民解放軍成都軍區(qū)總醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。受試者均為簽署書面知情同意書的健康男性或女性，年齡（22.0±0.9）歲，體質(zhì)量（56.9±8.3）kg，身高（1.65±0.08）m，體重指數(shù)（20.9±1.6）kg／m。受試者試驗(yàn)前胸片、心電圖、血壓、血常規(guī)、尿常規(guī)、肝、腎功、輸血前九項(xiàng)等檢查均正常，無(wú)藥物過(guò)敏史及慢性病史、不嗜煙酒，3個(gè)月內(nèi)未參加過(guò)其他藥物試驗(yàn)，2周內(nèi)未服用過(guò)任何藥物，3個(gè)月內(nèi)未參加過(guò)獻(xiàn)血。

1.3 給藥方法與樣本采集 采用隨機(jī)、開放、三交叉試驗(yàn)設(shè)計(jì)。12名健康受試者按體重指數(shù)隨機(jī)分為3組，于試驗(yàn)前1日入住I期試驗(yàn)病房，禁食至少10 h，不禁水過(guò)夜。每位受試者分別接受0.5，1.0，4.0 g單次和1.0 g多次共4周期進(jìn)行靜脈滴注給藥，10min滴注完，3周期單次試驗(yàn)結(jié)束后進(jìn)行多次試驗(yàn)，每個(gè)給藥周期間隔3天洗脫期，多次給藥共連續(xù)滴注4天，每6 h一次，每次劑量為1.0 g，總計(jì)13次第13次給藥后（即第四天晨）按照單次給藥時(shí)間點(diǎn)采集血漿樣本。

每周期試驗(yàn)，分別于用藥前（0 h）及開始滴注后5、10、20、30、45min和 1、1.25、1.5、2.0、2.25、2.5、3、4、6 h分別采集靜脈血2m L，分離血漿，置－80℃冰箱保存?zhèn)錅y(cè)。1 g劑量組各受試者收集用藥前（0 h）及用藥后0～2 h、2～4 h、4～6 h和6～8 h尿樣，置－80℃冰箱中保存?zhèn)錅y(cè)。

1.4 樣本檢測(cè)及前處理方法

1.4.1 色譜條件 色譜柱：ZORBAX Eclipse XDB-C18 column（5μm，150mm×4.6mm）；乙腈 －0.1%乙酸（10：90，v／v）為流動(dòng)相進(jìn)行等度洗脫，流速1 mL／min，柱后1：1分流，柱溫40℃。

1.4.2質(zhì)譜條件 離子源：離子噴霧離子化源；離子噴射電壓：5500 V；溫度：550℃；源內(nèi)氣體 1（GS1，N2）壓力：60 psi；源內(nèi)氣體 2（GS2，N2）壓力：60 psi；氣簾氣（N2）壓力：50 units；正離子方式檢測(cè)；掃描方式為多重反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）；頭孢匹林鈉和內(nèi)標(biāo)解簇電壓（DP）為30 V；碰撞能量（CE）為25 eV；用于定量分析的離子對(duì)分別為 m／z 424.1→292.1（頭孢匹林鈉），m／z 348.1→158.1（內(nèi)標(biāo)頭孢氨芐）。

1.4.3 血漿樣本處理 取50μL頭孢匹林鈉工作液、50μL空白血漿及50μL內(nèi)標(biāo)工作液（25μg／mL頭孢氨芐）混勻，加入500μL乙腈，混勻，4℃低溫離心（1 000 r／min，10min）將上清液轉(zhuǎn)至圓底玻璃試管，加入2mL純水、1.5mL二氯甲烷，漩渦萃取5min，再置 4℃低溫離心（2 500 r／min，5min），取上層水層進(jìn)樣5μL。

1.4.4 尿液樣本處理 取50μL頭孢匹林鈉工作液、50μL空白尿樣及50μL內(nèi)標(biāo)工作液（25μg／mL頭孢氨芐）混勻，加入2.5mL純水，混合后靜置取上清液進(jìn)樣5μL。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 用WinNonLin 6.3軟件采用非房室模型計(jì)算藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)，用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

2 結(jié)果

2.1 血藥濃度－時(shí)間曲線 12例健康受試者單次與多次注射頭孢匹林鈉后的血藥濃度均計(jì)入統(tǒng)計(jì)，其血藥濃度－時(shí)間曲線結(jié)果見圖1。

圖1 單劑量（a）和多劑量（b）靜脈滴注頭孢匹林鈉后平均血漿濃度－時(shí)間曲線圖Fig.1 Mean plasma concentration-time curves of cephapirin after single-dose（a）and multi-dose（b）of cephapirin sodium intravenously pumping to volunteers

2.2 尿藥濃度 12例健康受試者單次滴注1 g頭孢匹林鈉后，0～2 h、2～4 h、4～6 h和 6～8 h尿藥累積排泄率分別為（40.81±4.53）%、（44.77±12.64）%、（44.88±12.66）%和（44.90±12.66）%。

2.3 藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù) 12名健康受試者靜脈滴注頭孢匹林鈉0.5、1.0和4.0 g以及多次靜滴1.0 g后主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)見表1。

表1 頭孢匹林鈉在中國(guó)受試者體內(nèi)的主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)Tab.1 Pharmacokinetic parameters of cephapirin in Chinese volunteers

2.4 安全性評(píng)價(jià) 12名受試者均完成全部試驗(yàn)，在整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程中對(duì)受試者進(jìn)行了心電圖、生命體征和實(shí)驗(yàn)室檢查，未見與試驗(yàn)相關(guān)的不良事件發(fā)生、無(wú)受試者主訴的任何不適以及藥物過(guò)敏反應(yīng)，本試驗(yàn)藥物在試驗(yàn)劑量下安全性良好。

3 討論

已發(fā)表的頭孢匹林鈉檢測(cè)方法包括光譜［5］、熒光法［6-7］、液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法［8-9］和紫外法［10］等方法，但未見 HPLC-MS／MS法同時(shí)檢測(cè)人體血漿及尿液樣本的研究，本試驗(yàn)首次建立了HPLC-MS／MS法檢測(cè)人體血漿及尿液樣本中頭孢匹林鈉的濃度，并且應(yīng)用于中國(guó)人體頭孢匹林鈉藥代動(dòng)力學(xué)行為的研究中。試驗(yàn)結(jié)果表明，12位受試者Cmax、AUC0-t、AUC0-∞參數(shù)的平均值在0.5、1.0和4.0 g劑量?jī)?nèi)線性關(guān)系良好，其線性回歸r值分別為0.8970、0.9515和0.9498。1.0 g連續(xù)給藥4 d（q 6 h），蓄積指數(shù)［1／（1-e-λzτ）］為 1.01±0.01，提示頭孢匹林鈉 1.0 g劑量多次給藥后并無(wú)蓄積，消除行為與1.0 g單劑量給藥類似。

12名健康受試者靜脈滴注頭孢匹林鈉后8 h平均尿藥排泄率為給藥劑量的44.90%，在2 h內(nèi)頭孢匹林鈉的平均尿藥排泄率已經(jīng)達(dá)到40.81%，為總排泄量的90.9%，2～8 h的尿藥濃度已經(jīng)明顯下降，提示頭孢匹林鈉尿中排泄速度快，排泄率較高。

［1］Bodner SJ，Koenig MG.Clinical and in vitro evaluation of cephapirin：a new parenteral cephalosporin［J］.The American journal of themedical sciences，1972，263（1）：43-51.

［2］Bran JL，Levison ME，Kaye D.Clinical and in vitro evaluation of cephapirin，a new cephalosporin antibiotic［J］.Antimicrobial Agents and Chemotherapy，1972，1（1）：35-40.

［3］Chisholm DR，Leitner F，Misiek M，et al.Laboratory studies with a new cephalosporanic acid derivative［J］.Antimicrobial Agents and Chemotherapy，1969，9（2）：244-246.

［4］Barza M，Melethil S，Berger S，et al.Comparative pharmacokinetics of cefamandole，cephapirin，and cephalothin in healthy subjects and effect of repeated dosing［J］.Antimicrobial Agents and Chemotherapy，1976，10（3）：421-425.

［5］Omar MA，Abdelmageed OH，Attia TZ.Kinetic spectrofluorimetric determination of certain cephalosporins in human plasma［J］.Talanta，2009，77（4）：1394-1404.

［6］Benito-Pe?a E，Moreno-BondiMC，Orellana G，et al.Development of a novel and automated fluorescent immunoassay for the analysis of betalactam antibiotics［J］.Journal of Agricultural and Food Chemistry.2005，53（17）：6635-6642.

［7］Okerman L，DeWasch K，Van Hoof J，SmedtsW.Simultaneous deter mination of different antibiotic residues in bovine and in porcine kidneys by solid-phase fluorescence immunoassay［J］.Journalof AOAC International，2003，86（2）：236-240.

［8］Turnipseed SB， Storey JM， Clark SB， Miller KE.Analysis of veterinary drugs andmetabolites inmilk using quadrupole time-of-flight liquid chromatography-mass spectrometry［J］.Journal of Agricultural and Food Chemistry，2011，59（14）：7569-7581.

［9］Ghidini S，Zanardi E，Varisco G，Chizzolini R.Residues of betalactam antibiotics in bovine milk：confirmatory analysis by liquid chromatography tandem mass spectrometry after microbial assay screening［J］.Food Additives and Conta minants，2003，20（6）：528-534.

［10］Signs SA，F(xiàn)ile TM，Tan JS.High-pressure liquid chromatographic method for analysis of cephalosporins［J］.Antimicrobial Agents and Chemotherapy，1984，26（5）：652-655.

（編校：吳茜）

Pharmacokinetics of cephapirin sodium in healthy volunteers

DU Xiao-lin，YONG Xiao-lan，HUANG Juan，F(xiàn)ENG Shi-yin，LINan，WANG Lan-tian

（Department of Clinical Pharmacy，Chengdu Military General Hospital，Chengdu 610083，China）

ObjectiveTo investigate the pharmacokinetics of cephapirin sodium in healthy volunteers.MethodsTwelve healthy volunteers were enrolled and administered with single doses of0.5，1.0，4.0 g ormultiple doses of1.0 g cephapirin sodium injection by intravenous drip infusion.The concentrations of cephapirin in human plasma and urine were determined by HPLC-MS／MS.Themain pharmacokinetic parameters were calculated with WinNonLin 6.3 software.ResultsThemain pharmacokinetic parameters of cephapirin after single dose of 0.5，1.0，4.0 g and 1.0 g multiple dose cephapirin sodium injection were as follows：Cmaxwere（34.86±6.93），（74.77±24.23），（319.0±44.5），（89.26±28.04）μg／mL，AUC0-twere（12.86±3.46），（28.31±7.46），（163.21±34.57），（27.30±7.22）μg／（mL·h），t1／2were（0.55±0.21），（0.72±0.22），（0.71±0.27），（0.72±0.25），accumulative urine excretion rate of8 h（1 g）was（44.9±12.66）%.ConclusionThe process of cephapirin in the dosage range of 0.5～4.0 g show linear dynamic feature.There is no accumulation aftermultiple dosing.Cephapirin sodium wasmuch eliminated from urine in parent drug.

cephapirin sodium；LC-MS／MS；pharmacokinetics

R 969.1

A

1005－1678（2014）03－0151－03

頭孢匹林鈉是半合成的第一代頭孢菌素，作用機(jī)制為抑制細(xì)菌細(xì)胞壁合成，對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌作用強(qiáng)［1-3］，1986年經(jīng)FDA批準(zhǔn)在美國(guó)上市。已報(bào)道［4］的藥代參數(shù)數(shù)據(jù)不能滿足現(xiàn)在的用藥需求，所以按照2009年11月國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局（CFDA）的批準(zhǔn)進(jìn)行頭孢匹林鈉注射液臨床試驗(yàn)，分析其在中國(guó)人體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)特征，為II期臨床試驗(yàn)制定給藥方案提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 藥物、試劑與儀器 頭孢匹林鈉注射用粉針劑（遼寧海思科制藥有限公司，規(guī)格：1 g／支，批號(hào)：110201）；頭孢匹林鈉原料藥（遼寧海思科制藥有限公司，批號(hào)：110201，純度：99.3%），頭孢氨芐標(biāo)準(zhǔn)品（中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)：130408-200710，純度：99.4%）；色譜純乙腈購(gòu)自美國(guó) FisherScientific，水為Millipore超純水，其他試劑為分析純。

杜曉琳，女，碩士，主管藥師，研究方向：藥代動(dòng)力學(xué)。E-mail：duxiaolinqq＠126.com。