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    TBX3 基因在不同分子亞型乳腺癌中的表達(dá)及臨床意義

    2014-09-17 10:58:28陸云姝梁洪享吳克瑾
    實用癌癥雜志 2014年10期
    關(guān)鍵詞:B型A型亞型

    黃 燕 丁 罡 陳 峰 陸云姝 張 明 梁洪享 吳克瑾

    乳腺癌是目前最常見的女性惡性腫瘤,是婦女死亡的頭號殺手,嚴(yán)重威脅女性的身心健康[1]。TBX3基因是屬于調(diào)控發(fā)育相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子,它與腫瘤的發(fā)生發(fā)展關(guān)系密切[2],它在乳腺癌、肝癌、肺癌、惡性黑色素瘤等多種腫瘤中高表達(dá)[3-6]。TBX3基因與乳腺癌的分子指標(biāo)ER、PR、Her-2的相關(guān)性研究已成為乳腺癌研究的熱點之一[5-6],但它與乳腺癌分子亞型的相關(guān)性研究較少,尚無有相關(guān)報道,TBX3與乳腺癌的分子亞型及預(yù)后的關(guān)系尚不明確。本實驗研究TBX3基因在乳腺癌組織中的表達(dá)水平與ER、PR、Her-2、Ki-67等指標(biāo)表達(dá)關(guān)系的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步研究它與乳腺癌分子亞型的相關(guān)性,現(xiàn)報告如下。

    1 材料與方法

    1.1 一般資料

    選取2011年1月-2013年12月在上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬新華醫(yī)院崇明分院行手術(shù)切除的102例乳腺癌病例,臨床資料完整,術(shù)前未行放化療或靶向治療,病理標(biāo)本保存完好。102例乳腺癌患者均為女性,年齡38~93歲,平均年齡61.90歲,≤65歲60例,>65歲42例;臨床分期(102例中96例行術(shù)后分期,6例因行單純切除術(shù)未能分期):Ⅰ期45例,Ⅱ期31例,Ⅲ期20例;月經(jīng)情況:未絕經(jīng)24例,絕經(jīng)78例;免疫組化:ER(-)32例,ER(+)70例;Her-2(-)40例,Her-2(+)62例;Ki-67低表達(dá)(<14%)49例,Ki-67高表達(dá)(≥14%)53例。luminal A型40例、luminal B型33例、Her-2陽性型18例、Basal-like型11例。并選擇22例同期行手術(shù)的良性乳腺腫瘤及10例乳腺癌切緣陰性組織分別作為對照組。所有的標(biāo)本均經(jīng)10%甲醛固定、常規(guī)石蠟包埋、切片備用。

    1.2 主要試劑與方法

    人TBX3多克隆抗體:abcam公司,英國。免疫組化二步法染色嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作,抗原修復(fù)采用高壓修復(fù)法,陰性對照組:PBS磷酸緩沖液代替一抗作為陰性對照。

    1.3 陽性結(jié)果判斷

    免疫組織化學(xué)反應(yīng)結(jié)果的評判標(biāo)準(zhǔn)參考許良中[7]的免疫組化評價標(biāo)準(zhǔn),光鏡下隨機(jī)觀察4~5個不重疊的高倍(×200)視野,計數(shù)100~200個細(xì)胞,細(xì)胞染色陽性表達(dá)為境界清晰、突出于背景的棕黃色或棕褐色顆粒。根據(jù)陽性細(xì)胞數(shù)和著色強(qiáng)度進(jìn)行半定量分析,陽性細(xì)胞數(shù):無陽性細(xì)胞為0分,1%~30%為1分,31%~70%為2分,71%~100%為3分;著色強(qiáng)度:不著色為0分,淺棕色為1分,棕黃色為2分,棕揭色為3分。兩項分?jǐn)?shù)累計:0分為陰性(-),1、2分為弱陽性(+),3、4分為陽性(++),5、6分為強(qiáng)陽性(+++)。結(jié)果分為陰性(-)及陽性(+~+++)兩組進(jìn)行分析。

    1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

    應(yīng)用SAS 8.02統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,乳腺癌與良性組織TBX3表達(dá)率的比較,臨床及病理因素中TBX3表達(dá)率的差異均采用χ2檢驗,分子分型中各組之間的多重比較采用Nemenyi檢驗,P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 乳腺癌與乳腺良性疾病組織中TBX3表達(dá)的差異

    TBX3主要定位于細(xì)胞核,其陽性表達(dá)為境界清晰、突出于背景的黃色或棕黃色。結(jié)果顯示TBX3在乳腺癌與乳腺良性腫瘤組織中的表達(dá)存在統(tǒng)計學(xué)顯著差異(P=0.0052<0.05),見表1。

    表1 乳腺癌與乳腺良性腫瘤組織中TBX3表達(dá)(例,%)

    2.2 TBX3在乳腺癌與切緣陰性的癌旁組織中表達(dá)情況

    102例乳腺癌組織中,TBX3表達(dá)陽性率為75.49%;10例切緣陰性的癌旁組織中,TBX3表達(dá)陽性率為30.00%;經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析顯示,TBX3在乳腺癌與切緣陰性的癌旁組織中的表達(dá)存在統(tǒng)計學(xué)顯著差異(P=0.0055<0.05)

    2.3 TBX3與乳腺癌臨床病理因素的關(guān)系

    本組結(jié)果顯示,TBX3表達(dá)與患者年齡、有無絕經(jīng)、Her-2狀態(tài)無顯著相關(guān)性(P>0.05),與乳腺癌臨床分期、ER狀態(tài)及Ki-67值有顯著相關(guān)性(P<0.05),見表2。

    表2 TBX3表達(dá)與乳腺癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系(例,%)

    2.4 TBX3表達(dá)與乳腺癌組織分子分型的關(guān)系

    本組結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析顯示在不同分子亞型乳腺癌組織中TBX3表達(dá)存在統(tǒng)計學(xué)差異(P值=0.0200,P<0.05),見表3,Basal-like型乳腺癌TBX3陽性表達(dá)率明顯低于另外3種分子亞型,結(jié)果還顯示TBX3表達(dá)Basal-like型與luminal A型、luminal B型比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05);luminal A型與luminal B型、Basal-like型與Her-2陽性型、luminal A型與Her-2陽性型、luminal B型與Her-2陽性型間TBX3表達(dá)比較,無顯著性差異(P>0.05)。

    表3 不同分子亞型乳腺癌中TBX3表達(dá)情況(例,%)

    3 討論

    乳腺癌是一個多基因突變驅(qū)動的疾病,目前新發(fā)現(xiàn)的與乳腺癌相關(guān)的癌基因包括AKT2,ARID1B,CASP8,CDKN1B,MAP3K1,MAP3K13,NCOR1,SMARCD1 和TBX3等[8-9]。TBX基因家族也稱T-box,它具有高度保守的DNA結(jié)合區(qū)—T區(qū),T區(qū)具有回文結(jié)構(gòu)的雙鏈DNA的兩個位點,其中的一個位點與靶基因的啟動子特點序列相結(jié)合形成半位結(jié)合體,這個半位結(jié)合體通過與不同的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合發(fā)揮不同的作用[10]。人類對TBX3的認(rèn)識首先是在對尺骨-乳腺綜合癥(ulnar-mammary syndrome,UMS)的研究中逐漸發(fā)現(xiàn)的,UMS是由于TBX3突變或缺失引起的一種嚴(yán)重的家族性顯性遺傳病,是由于TBX3基因發(fā)生點突變,引起所表達(dá)的TBX3蛋白碳端的抑制區(qū)缺失,導(dǎo)致TBX3功能障礙,臨床上主要表現(xiàn)為乳腺、四肢發(fā)育障礙伴心臟畸形等先天性缺陷[11-13]。

    TBX3不但與乳腺的發(fā)育有關(guān),還與乳腺癌的形成和進(jìn)展相關(guān),國內(nèi)學(xué)者[14]使用熒光定量PCR的方法比較了51例新鮮乳腺癌及相應(yīng)的癌旁組織TBX3表達(dá)的情況,發(fā)現(xiàn)TBX3基因在癌組織中的表達(dá)高于癌旁組織,葉海英等[15]研究發(fā)現(xiàn)乳腺癌組織中Tbx3基因的陽性率為73.58%,明顯高于正常乳腺組織中的陽性率14.29%,ER陽性乳腺癌組織中TBX3基因的陽性率為84.38%,明顯高于ER陰性的陽性率57.14%;有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移乳腺癌組織中TBX3基因的陽性率為86.21%,明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的陽性率58.33%(14/24);Her-2陽性乳腺癌組織中TBX3基因的陽性率為93.75%,明顯高于Her-2陰性的陽性率64.86%,Douglas等[5]研究亦表明TBX3在分期較晚的乳腺癌中高度表達(dá),這說明TBX3與乳腺癌有關(guān),亦初步證實了TBX3與乳腺癌分子標(biāo)記物ER、PR、Her-2之間的相關(guān)性。我們的研究結(jié)果與鄧軍[6]、葉海英等[15]的研究結(jié)論相仿,認(rèn)為TBX3基因與乳腺癌有關(guān),并且在中晚期、ER陽性、Ki-67過表達(dá)的乳腺癌中高表達(dá),這提示TBX3基因與乳腺癌的預(yù)后因素有關(guān)。

    乳腺癌根據(jù)分子水平為基礎(chǔ)的分子亞型已經(jīng)廣泛應(yīng)用于臨床,并作為指導(dǎo)制定治療方案、判斷療效、預(yù)測預(yù)后的重要標(biāo)準(zhǔn)之一,目前臨床上常用的乳腺癌分子分型方法為2011年《St.Gallen早期乳腺癌初始治療國際專家共識》中提出的4分法:luminal A型、luminal B型、人表皮生長因子受體2過表達(dá)型、基底細(xì)胞樣型。具體每型的分子特征是:①luminal A型:免疫組織化檢測結(jié)果為ER 陽性或/和PR陽性,Her-2陰性,Ki-67<14%[16]。luminal A型是乳腺癌最為常見的類型,其發(fā)病率占乳腺癌 40%~50%,并且預(yù)后較其它亞型最好[17]。②luminal B型:免疫組織化檢測結(jié)果為ER陽性或PR陽性,Her-2陽性;或者ER陽性或/和PR陽性,Her-2陰性,Ki-67≥14%。luminal B 型發(fā)病率約占乳腺癌的 8%,復(fù)發(fā)風(fēng)險最高[18]。③Her-2過表達(dá)型:分子特征為ER、PR陰性,HER-2 陽性,Ki-67多為高表達(dá)。此型患者的 5 年無病生存和總生存率最差[19]。④基底細(xì)胞樣型乳腺癌(basal-like breast carcinoma,BLBC):BLBC的分子特征為ER(-)和 PR(-)/HER-2(-),主要表現(xiàn)為三陰性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC),即:雌激素受體(ER) 、孕激素受體(PR) 、人表皮生長因子受體 2(Her-2) 均為陰性表達(dá)的乳腺癌。占乳腺癌的 8%~20%,臨床表現(xiàn)為高度侵襲性,較多發(fā)生局部或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移,較少發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,預(yù)后最差[20]。本研究發(fā)現(xiàn),TBX3在乳腺癌四種分子亞型中的表達(dá)是不同的,從結(jié)果數(shù)據(jù)可以看出:TBX3在Basal-like型乳腺癌中低表達(dá),在luminal A型、luminal B型乳腺癌中高表達(dá),這提示TBX3與luminal A型、luminal B型乳腺癌的關(guān)系密切,可作為luminal型乳腺癌惡性標(biāo)志物之一,而對Basal-like型關(guān)系不密切,不能作為其惡性標(biāo)志物。TBX3基因與乳腺癌預(yù)后有關(guān),但是否能作為乳腺癌預(yù)后因子之一,還有待于進(jìn)一步隨訪及行預(yù)后分析。

    綜上所述,TBX3基因與乳腺癌的關(guān)系密切,TBX3在乳腺癌組織中的表達(dá)與腫瘤分期、ER、Ki-67的狀態(tài)、分子亞型有關(guān),但由于腫瘤信號途徑的錯綜復(fù)雜,TBX3在腫瘤中形成、發(fā)展、轉(zhuǎn)移等過程中的信號通路仍不十分清晰,相信隨著對TBX3基因進(jìn)一步深入的研究,TBX3基因?qū)碛型蔀橹委熌[瘤的新靶點[21]。

    [1] Benson JR,Jatoi I.The global breast cancer burden〔J〕.Future Oncol,2012,8(6):697-702.

    [2] 鄧 軍,劉友生.Tbx3基因功能研究及其在腫瘤演進(jìn)中的作用〔J〕.第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報,2005,27(4):363-365.

    [3] 劉 楠,董千澤,王恩華,等.TBX3在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及其對肺癌細(xì)胞增殖和侵襲能力的影響〔J〕.中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報,2012,41(4):360-363.

    [4] Burgucu D,Guney K,Sahinturk D,et al.Tbx3 represses P-TEN and is over-expressed in head and neck squamous cell carcinoma〔J〕.BMC Cancer,2012,12:481.

    [5] Douglas NC,Papaioannou VE.The T-box transcription factors TBX2 and TBX3 in mammary gland development and breast cancer〔J〕.J Mammary Gland Biol Neoplasia,2013,18(2):143-147.

    [6] 鄧 軍,劉友生,黃濤生,等.人乳腺癌組織中Tbx3基因表達(dá)變化及其意義〔J〕.解放軍醫(yī)學(xué)雜志,2005,30(6):512-514.

    [7] 徐良中,楊文濤.免疫組織化學(xué)反應(yīng)結(jié)果的判斷標(biāo)準(zhǔn)〔J〕.中國癌癥雜志,1996,6(04):229-231.

    [8] Stephens PJ,Tarpey PS,Davies H,et al.The landscape of cancer genes and mutational processes in breast cancer〔J〕.Nature,2012,486(7403):400-404.

    [9] Nik-Zainal S,Alexandrov LB,Wedge DC,et al.Mutational processes molding the genomes of 21 breast cancers〔J〕.Cell,2012,149(5):979-993.

    [10] Tada M,Smith JC.T-targets:clues to understanding the fu-nctions of T-box proteins〔J〕.Dev Growth Differ,2001,43(1):1-11.

    [11] Davenport TG,Jerome-Majewska LA,Papaioannou VE.Ma-mmary gland,limb and yolk sac defects in mice lacKing Tbx3,the gene mutated in human ulnar mammary syndrome〔J〕.Development,2003,130(10):2263-2273.

    [12] Bamshad M,Lin RC,Law DJ,et al.Mutations in human TBX3 alter limb,apocrine and genital development in ulnar-mammary syndrome〔J〕.Nat Genet,1997,16(3):311-315.

    [13] Linden H,Williams R,King J,et al.Ulnar Mammary syndrome and TBX3:expanding the phenotype〔J〕.Am J Med Genet A,2009,149A(12):2809-2812.

    [14] 陳忠華,呂光明,季天海,等.TBX3基因mRNA在乳腺癌中表達(dá)的檢測及其意義〔J〕.南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報,2009,29(1):87-89.

    [15] 葉英海,陳琦凡,葉正亮,等.Tbx3基因在乳腺癌組織中的表達(dá)和臨床意義〔J〕.中國醫(yī)師進(jìn)修雜志,2010,35(14):1-2.

    [16] Prat A,Cheang MC,Martín M,et al.Prognostic significance of progesterone receptor-positive tumor cells within immunohistochemically defined luminal A breast cancer〔J〕.J Clin Oncol,2013,31(2):203-209.

    [17] Dawood S,Hu R,Michelle D,et al.Defining breast cancer prognosis based on molecular phenotypes:results from a large cohort study〔J〕.Breast Cancer Res Treat,2011,126(1):185-192.

    [18] Cancello G,Maisonneuve P,Rotmensz N,et al.Progesterone receptor loss identifies Luminal Bbreast cancer subgroups at higher risk of relapse〔J〕.Ann of Oncol,2012,24(3):661-668.

    [19] Xue C,Wang X,Peng R,et al.Distribution,clinicopathologic features and survival of breast cancer subtypes in Southern China〔J〕.Cancer Sci,2012,103(9):1679-1687.

    [20] Dey N,Smith BR,Leyland-Jones B.Targeting basal-like b-reast cancers〔J〕.Curr Drug Targets,2012,13(12):1510-1524.

    [21] Lu J,Li XP,Dong Q,et al.TBX2 and TBX3:the special v-alue for anticancer drug targets〔J〕.Biochim Biophys Acta,2010,1806(2):268-274.

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