雙歧三聯(lián)活菌膠囊對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎患者CD4+CD24+調(diào)節(jié)T細(xì)胞及IL-10水平的影響研究

姜利佳++蔣益

[摘要] 目的 研究雙歧三聯(lián)活菌膠囊對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎患者CD4+、CD24+調(diào)節(jié)T細(xì)胞及IL-10水平的影響。 方法 選取134例潰瘍性結(jié)腸炎患者作為臨床研究資料，按照隨機(jī)對(duì)照原則將入組患者分為觀察組和對(duì)照組，各67例，對(duì)照組患者采用常規(guī)基礎(chǔ)治療，觀察組在對(duì)照組治療基礎(chǔ)上采用雙歧三聯(lián)活菌膠囊治療。比較兩組患者的療效及血清CD4+、CD24+調(diào)節(jié)T細(xì)胞及IL-10水平。結(jié)果 觀察組患者的臨床癥狀評(píng)分下降百分比顯著高于對(duì)照組，兩組患者治療后的結(jié)腸炎癥評(píng)分均顯著低于治療前，而組間比較顯示觀察組患者治療后的結(jié)腸炎癥評(píng)分均顯著低于對(duì)照組。兩組患者治療后的血清CD4+、CD24+調(diào)節(jié)T細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞的百分比及IL-10水平均較治療前顯著升高，組間比較發(fā)現(xiàn)觀察組患者治療后的血清CD4+、CD24+調(diào)節(jié)T細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞的百分比及IL-10水平均顯著高于對(duì)照組。結(jié)論 雙歧三聯(lián)活菌膠囊輔助治療潰瘍性結(jié)腸炎患者可以通過調(diào)節(jié)CD4+、CD24+調(diào)節(jié)T細(xì)胞及IL-10水平。

[關(guān)鍵詞] 雙歧三聯(lián)活菌膠囊；潰瘍性結(jié)腸炎；CD4+、CD24+調(diào)節(jié)T細(xì)胞；白介素-10

[中圖分類號(hào)] R574.62[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B[文章編號(hào)] 1673-9701（2014）18-0039-03

The study of bifidobacteria triple capsule on the levels of CD4 +, CD24 + regulatory T cells and IL-10 for patients with ulcerative colitis

JIANG Lijia1 JIANG Yi2

1.Department of Gastroenterology, Wenzhou Central Hospital in Zhejiang Province, Wenzhou 325000, China; 2.Department of Gastroenterology, the Second Affiliated Hospital of Wenzhou Medical College, Wenzhou 325000, China

[Abstract] Objective To observe bifidobacteria triple capsule on the levels of CD4+, CD24+ regulatory T cells and IL-10 for patients with ulcerative colitis. Methods Selected 134 cases of patients with ulcerative colitis clinical research data beds, in accordance with the principles of the randomized patients were divided into observation group and control group, with 67 cases in each. Control patients received conventional basic therapy, observation group received probiotics in capsule treatment on the basis of the control group. The efficacy of the two groups of patients and levels of serum CD4+, CD24+ T cells and IL-10 were compared. Results The patients in clinical symptom scores decreased significantly higher percentage, two groups of patients after treatment colitis disease scores were significantly lower than before treatment, and display observed between the two groups of patients after treatment colitis disease scores were significantly lower than the control group. Two groups of patients after treatment serum CD4 +, CD24 + regulatory T cells was significantly higher in CD4+T cells and the percentage of IL-10 levels than before treatment. Conclusion Probiotics capsules adjuvant treatment of ulcerative colitis patients can be adjusted by CD4 +, CD24 + regulatory T cells and IL-10 levels.

[Key words] Probiotics capsules; Ulcerative colitis; CD4+, CD24+ regulatory T cells; Interleukin-10

雙歧三聯(lián)活菌膠囊屬微生態(tài)制劑，在潰瘍性結(jié)腸炎患者的治療中具有重要地位，且經(jīng)過長(zhǎng)期的臨床應(yīng)用，其療效受到了廣泛認(rèn)可[1]。而對(duì)雙歧三聯(lián)活菌膠囊治療潰瘍性結(jié)腸炎的機(jī)制研究開始成為熱點(diǎn)，明確機(jī)制可以更好地把握適應(yīng)證，應(yīng)用針對(duì)性更強(qiáng)，可在一定程度上提高療效，潰瘍性結(jié)腸炎患者的免疫系統(tǒng)病因已經(jīng)達(dá)成共識(shí)[2]，雙歧三聯(lián)活菌膠囊是否可以通過改善腸道菌群微生態(tài)狀態(tài)而調(diào)節(jié)潰瘍性結(jié)腸炎患者的免疫功能，從而起到促進(jìn)治療的效果值得研究，本研究通過評(píng)估臨床癥狀評(píng)分、結(jié)腸炎癥評(píng)分，并檢測(cè)患者血清CD4+、CD24+調(diào)節(jié)T細(xì)胞及IL-10水平研究雙歧三聯(lián)活菌膠囊對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎患者免疫和炎癥反應(yīng)的影響，現(xiàn)報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1 臨床資料

本研究選取2010年2月～2013年1月間本院收治的134例潰瘍性結(jié)腸炎患者作為研究資料，所有患者均經(jīng)輔助檢查并結(jié)合病史確診為潰瘍性結(jié)腸炎，其中男73例，女61例，年齡23～63歲，平均（45.61±5.82）歲，其中輕度69例，中度65例，病程0.5～4年，平均（1.41±0.33）年。本組患者入組前均未接受可能影響本研究觀察指標(biāo)的治療和藥物，所有患者均無(wú)重要臟器功能損害及血液系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)疾病。按照隨機(jī)對(duì)照原則將所有患者分為兩組各67例，兩組患者在年齡、性別、病變程度以及病程方面無(wú)顯著差異，具有可比性。見表1。

表1 兩組患者一般資料比較

1.2 治療方法

觀察組患者采用抗生素+5-氨基水楊酸制劑奧沙拉嗪鈉膠囊（浙江眾益藥業(yè)有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H20010061）的常規(guī)治療方案，對(duì)照組患者在觀察組常規(guī)治療方案的基礎(chǔ)上加用雙歧三聯(lián)活菌膠囊（上海信誼藥廠有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字S10950032）0.21 g 口服，2次/d，兩組患者均接受6個(gè)月的完整規(guī)律治療。

1.3 觀察指標(biāo)

1.3.1 臨床癥狀評(píng)分兩組患者均于治療前及治療后6個(gè)月時(shí)進(jìn)行臨床癥狀評(píng)分，具體評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)[3]為：每天大便1～2次記0分，3次記1分，4～5次記2分，6次及以上記3分；大便成形記0分，軟便記1分，稀糊狀便記2分，稀水樣便記3分，無(wú)血便記0分，便中帶血絲記1分，便中帶血塊記2分，便血記3分；無(wú)腹痛記0分，輕度腹痛記1分，中度腹痛記2分，重度腹痛記3分；無(wú)里急后重記0分，有里急后重記1分；無(wú)腹脹記0分，有腹脹記1分。

1.3.2 結(jié)腸炎癥評(píng)分[4]所有患者均在治療前及治療6個(gè)月后接受腸鏡檢查，術(shù)中于病變最活躍處取活檢6塊，取3個(gè)高倍視野的觀察指標(biāo)平均值為最終結(jié)果，按照以下分級(jí)進(jìn)行評(píng)分，正常評(píng)0分，輕微黏膜及上皮下炎性滲出、水腫，片狀黏膜糜爛及毛細(xì)血管擴(kuò)裝，黏膜肌層正常記1分，標(biāo)本的50%以上具有1分評(píng)級(jí)特征者評(píng)為2分，以中性粒細(xì)胞滲出為主伴潰瘍深達(dá)黏膜肌層或黏膜下層評(píng)為3分，標(biāo)本的50%以上具有3分評(píng)級(jí)特征者評(píng)為4分。臨床癥狀評(píng)分下降百分比=（治療前評(píng)分-治療后評(píng)分）/治療前評(píng)分×100%。

1.3.3 血清CD4+、CD24+調(diào)節(jié)T細(xì)胞及IL-10水平所有患者均于治療前及治療6個(gè)月后接受CD4+、CD24+調(diào)節(jié)T細(xì)胞及IL-10水平測(cè)定，采用流式細(xì)胞儀測(cè)定CD4+、CD24+調(diào)節(jié)T細(xì)胞水平，采用ELISA法測(cè)定IL-10水平，所有操作均嚴(yán)格按照規(guī)范進(jìn)行。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，臨床癥狀評(píng)分下降百分比、結(jié)腸炎癥評(píng)分、血清CD4+、CD24+調(diào)節(jié)T細(xì)胞及IL-10水平用（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)， P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1 臨床癥狀評(píng)分及結(jié)腸炎癥評(píng)分

本研究結(jié)果顯示，觀察組患者的臨床癥狀評(píng)分下降百分比顯著高于對(duì)照組（P=0.000），兩組患者治療后的結(jié)腸炎癥評(píng)分均顯著低于治療前（t=36.6060，P=0.000；t=7.0189，P=0.000），而組間比較顯示觀察組患者治療后的結(jié)腸炎癥評(píng)分均顯著低于對(duì)照組（P=0.000），見表2。

表2 臨床癥狀評(píng)分及結(jié)腸炎癥評(píng)分（x±s）

注：與治療前相比，*P<0.05；與對(duì)照組相比，#P<0.05

2.2血清CD4+、CD24+調(diào)節(jié)T細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞的百分比及IL-10水平

本研究結(jié)果顯示，兩組患者治療后的血清CD4+、CD24+調(diào)節(jié)T細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞的百分比及IL-10水平均較治療前顯著升高（t=23.7768、8.4307，P=0.000、0.000；t=10.2217，2.0285，P=0.000，0.031），組間比較發(fā)現(xiàn)觀察組患者治療后的血清CD4+、CD24+調(diào)節(jié)T細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞的百分比及IL-10水平均顯著高于對(duì)照組（P=0.000、0.000），見表3。

表3 血清CD4+、CD24+調(diào)節(jié)T細(xì)胞及IL-10水平

注：與治療前相比，*P<0.05；與對(duì)照組相比，#P<0.05

3 討論

潰瘍性結(jié)腸炎患者的發(fā)病機(jī)制尚未完全明確，但腸道菌群功能以及免疫功能失調(diào)均與潰瘍性結(jié)腸炎的發(fā)生和發(fā)展存在密切的聯(lián)系[4]，微生態(tài)制劑在調(diào)節(jié)腸道正常菌群功能方面的作用已經(jīng)被驗(yàn)證[6]，雙歧三聯(lián)活菌膠囊主要包括長(zhǎng)型雙歧桿菌、保加利亞乳桿菌以及嗜熱鏈球菌3種細(xì)菌，此三種細(xì)菌均是腸道重要的益生菌，在維持腸道微生態(tài)平衡、防御致病菌和病毒入侵、促進(jìn)腸道正常菌群生長(zhǎng)繁殖方面作用顯著[7]。既往潰瘍性結(jié)腸炎以抗生素抗感染，5-氨基水楊酸制劑等對(duì)癥治療為主[8]，但療效差強(qiáng)人意，已有研究[9]證實(shí)應(yīng)用微生態(tài)制劑聯(lián)合治療潰瘍性結(jié)腸炎療效顯著，但對(duì)于其起效機(jī)制的研究尚不多見。

患者機(jī)體免疫功能失調(diào)是潰瘍性結(jié)腸炎發(fā)病的重要因素，且與其病情發(fā)展密切相關(guān)[10]，而微生態(tài)制劑在調(diào)節(jié)腸道正常菌群功能的同時(shí)，對(duì)于患者的免疫功能是否也能起到有效的調(diào)節(jié)作用值得研究。調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在調(diào)節(jié)功能性T細(xì)胞亞群功能方面具有重要作用，在多種免疫系統(tǒng)相關(guān)疾病的發(fā)生發(fā)展中均具有重要意義。有研究提出CD4+、CD24+調(diào)節(jié)T細(xì)胞具有免疫無(wú)能性與抑制性兩大功能特征，主要通過抑制自身反應(yīng)性T細(xì)胞的免疫反應(yīng)，從而減少TGF-β、IL-10等細(xì)胞因子的分泌，在自身免疫性疾病中具有重要意義[11]。CD4+、CD24+調(diào)節(jié)T細(xì)胞的產(chǎn)生可能與腸道菌群存在一定的關(guān)系，有研究[12]認(rèn)為腸道長(zhǎng)期暴露在正常菌群的外源性抗原中，可以在一定程度上誘導(dǎo)CD4+、CD24+調(diào)節(jié)T細(xì)胞的產(chǎn)生，也有研究[13]認(rèn)為腸道菌群可以抑制非成熟樹突狀細(xì)胞的成熟，側(cè)面促進(jìn)CD4+、CD24+調(diào)節(jié)T細(xì)胞的發(fā)育和增殖，以維持正常菌群的免疫功能，因此推測(cè)微生態(tài)制劑調(diào)節(jié)腸道正常菌群功能可能通過以上機(jī)制改善患者的免疫功能從而達(dá)到輔助治療潰瘍性結(jié)腸炎患者的作用。IL-10是重要的炎癥因子，主要由Th2細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞以及活化的B細(xì)胞產(chǎn)生，其可以通過抑制單核細(xì)胞的活性，抑制腸道炎癥反應(yīng)[14]。雙歧三聯(lián)活菌膠囊所含益生菌在腸道增殖后的代謝產(chǎn)物也是調(diào)節(jié)腸道內(nèi)環(huán)境的重要物質(zhì)，可以在一定程度上調(diào)節(jié)腸道黏膜的免疫功能，促進(jìn)IL-10的表達(dá)水平，這也是雙歧三聯(lián)活菌膠囊輔助治療潰瘍性結(jié)腸炎的可能機(jī)制。

本研究結(jié)果顯示采用雙歧三聯(lián)活菌膠囊輔助治療的潰瘍性結(jié)腸炎患者，治療6個(gè)月后臨床癥狀評(píng)分下降百分比以及顯著高于對(duì)照組，結(jié)腸炎癥評(píng)分顯著低于對(duì)照組。外周血CD4+、CD24+調(diào)節(jié)T細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞的百分比及IL-10水平均顯著高于對(duì)照組。由此總結(jié)，CD4+、CD24+調(diào)節(jié)T細(xì)胞和IL-10在潰瘍性結(jié)腸炎患者的發(fā)病和發(fā)展中存在重要作用和意義，雙歧三聯(lián)活菌膠囊輔助治療的潰瘍性結(jié)腸炎患者可以調(diào)節(jié)腸道菌群功能，提高CD4+、CD24+調(diào)節(jié)T細(xì)胞和IL-10水平的表達(dá)，提高療效。

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（收稿日期：2014-01-21）

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（收稿日期：2014-01-21）