生長激素受體在宮頸癌組織中的表達及其意義

胡 玲，秦江霞，王天紅，陳敦金 (.廣東省廣州市花都區(qū)胡忠醫(yī)院婦產(chǎn)科，廣東 廣州 50800;.廣州醫(yī)學院第三附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科，廣東 廣州 50000)

宮頸癌是最常見的婦科惡性腫瘤，占女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤的半數(shù)以上。我國每年有10萬左右的新發(fā)病例，約占世界總數(shù)的1/4［1］。多數(shù)宮頸癌患者就診時已達中晚期，化療成為其重要輔助治療方法，但患者大多同時合并營養(yǎng)不良、低蛋白血癥及免疫功能低下，限制了化療的順利進行。生長激素(Growth hormone，GH)通過GHR產(chǎn)生生物學效應。臨床上己證實重組人生長激素(Recombinant human growth hormone，rh-GH)能促進蛋白質(zhì)合成、糾正負氮平衡、促進傷口愈合及提高機體免疫功能［2－5］。但rhGH能否應用于惡性腫瘤患者還存在爭議，值得進一步研究。本試驗應用免疫組化法檢測宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變、不同分化程度的宮頸癌組織及其癌旁正常組織中GHR的表達情況，探討其在宮頸癌組織中表達規(guī)律，為臨床宮頸癌患者術(shù)后合理應用rhGH提供實驗依據(jù)和理論依據(jù)?，F(xiàn)報告如下。

1 材料和方法

1.1 材料：隨機抽取2000年1月～2009年1月我院及廣州醫(yī)學院第三附屬醫(yī)院手術(shù)及門診活檢宮頸標本120例，患者年齡40～65歲，平均50.2歲。其中宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變30例(Ⅰ級7例，Ⅱ級10例，Ⅲ級13例)，宮頸鱗癌60例。臨床分期采用國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟(FIGO)2000年修訂的臨床分期標準，Ⅰ期16例，Ⅱ期21例，Ⅲ期23例，其中44例做盆腔淋巴結(jié)清掃術(shù)，發(fā)現(xiàn)有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者31例;高分化25例，中分化20例，未分化15例。另取同批患者癌旁正常宮頸組織30例作對照所有取材的標本均經(jīng)過病理診斷證實為宮頸癌、宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變或癌旁正常宮頸組織，術(shù)前均未接受過放療及化療。

1.2 方法：所有標本均經(jīng)過甲醛固定，石蠟包埋，常規(guī)病理切片。免疫組化采用鏈霉素抗生物素蛋白－過氧化物酶(SP)法檢測GHR的表達。鼠抗人GHR單克隆抗體購自英國serotee公司，具體步驟嚴格按試劑盒說明書進行，陽性片由英國serotee公司提供，用PBS緩沖液代替一抗作陰性對照。判斷標準：GHR陽性細胞為細胞膜、細胞漿出現(xiàn)棕黃色染色顆粒為陽性染色。400倍光鏡下觀察，每片隨機取5個視野，計算陽性與陰性細胞數(shù)，最后計算陽性百分率。細胞陽性染色≤10%為陰性表達，染色＞10%為陽性表達。

1.3 統(tǒng)計學處理：應用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件對試驗數(shù)據(jù)進行χ2檢驗和Fisher確切概率法，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 GHR在不同宮頸組織中的表達情況：GHR在癌旁正常宮頸組織、宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變及宮頸癌組織中表達的陽性率逐漸增高，分別為40.0%、46.7%、70.0%。宮頸癌組織中GHR陽性表達率顯著高于宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變和癌旁正常宮頸組織(P＜0.05)，但后兩者之間差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，見表1和圖1～3。

表1 GHR在正常癌旁組織、宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變及宮頸癌組織中的表達

圖1 GHR在正常癌旁組織組織的表達(SP法×400)

圖2 GHR在CIN組織的表達(SP法×400)

圖3 GHR在宮頸癌組織的表達(SP法×400)

2.2 GHR在宮頸癌組織中的表達與臨床病理特征之間的關(guān)系：GHR在宮頸癌組織中的表達與臨床分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)(P＜0.05);與腫瘤浸潤深度無關(guān)(P＞0.05)，見表2。

表2 GHR在宮頸癌組織中的表達與臨床病理特征之間的關(guān)系

3 討論

多數(shù)宮頸癌患者就診時已達中晚期，化療成為其重要輔助治療方法，傳統(tǒng)化療藥物以細胞毒性藥物為主，其治療指數(shù)狹小，毒副反應大，對正常組織細胞、臟器的生理功能有一定的破壞作用，并抑制機體免疫功能和骨髓造血功能等，常導致患者無法順利完成化療。因此進一步探索研究如何降低化療藥物毒副反應是癌癥治療的重要課題。生長激素通過生長激素受體發(fā)揮生理作用，具有促進蛋白質(zhì)合成，維持氮平衡;能增加脂肪氧化分解和糖異生，提高提高機體免疫力等功能。人生長激素受體分子是一個含620個氨基酸的單糖蛋白，分子量為70KD，位于細胞膜表面。重組人生長激素是人工合成的生長激素，理論上生長激素具有潛在的促進細胞生長作用，故對腫瘤患者應用rhGH的安全性存在爭議。研究表明，在正常組織和腫瘤組織中，GHR的表達存在著不同程度的異常，這些異常和腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移都有著密切的關(guān)系［6］。有報道，GH缺乏能抵抗化學物質(zhì)誘發(fā)的乳腺癌，但輸注GH后能促進乳腺上皮細胞再生和腺泡發(fā)育［7］。另一方面，體外試驗發(fā)現(xiàn)GH對人結(jié)腸、胃、肺、乳腺、卵巢、前列腺癌和黑色素瘤細胞沒有顯著的促增殖分裂作用［8］。宮頸細胞在其癌變過程中，生物學特性發(fā)生變化的同時，GHR是否依然存在和表達情況如何未見文獻報道。從本組試驗的結(jié)果來看，宮頸癌組織GHR的表達水平比宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變組織及正常宮頸組織明顯增高(P＜0.05)，說明GHR的表達在宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展過程中起著非常重要的作用。TNM分期越高，GHR的表達水平越高，三者間的差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);未分化患者的GHR的表達最高，高分化、中分化患者中的GHR的表達率低，三組之間的差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，提示GHR的表達與宮頸癌的進展密切相關(guān)。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者的GHR的表達率較未轉(zhuǎn)移者明顯增高(P＜0.05)，說明GHR表達與宮頸癌盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。因此檢測腫瘤組織中GHR的表達，對了解腫瘤的侵襲、淋巴轉(zhuǎn)移等病情進展、指導選擇治療方案以及預測預后有重要作用。生長激素受體拮抗劑培維索孟其通過阻止生長激素與生長激素受體結(jié)合，阻止信號轉(zhuǎn)導過程，達到治療目的，已被廣泛應用于垂體腺瘤。本研究中發(fā)現(xiàn)GHR在宮頸癌中表達率較高，針對GHR為靶向治療是否也同樣可以用于宮頸癌的治療，值得進一步研究。

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