道地藥材單葉蔓荊內(nèi)生真菌生態(tài)分布*

譚玉琴 張紅芳 樊有賦 彭 琴 詹壽發(fā) 陳 曄

(九江學(xué)院藥學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院 江西九江 332000)

道地藥材單葉蔓荊內(nèi)生真菌生態(tài)分布*

譚玉琴 張紅芳 樊有賦 彭 琴 詹壽發(fā) 陳 曄

(九江學(xué)院藥學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院 江西九江 332000)

文章研究不同產(chǎn)地單葉蔓荊內(nèi)生真菌生態(tài)分布，結(jié)果顯示，從不同產(chǎn)地單葉蔓荊植株中分離獲得內(nèi)生真菌257株，分別屬于4綱5目6科26屬。研究發(fā)現(xiàn)不同產(chǎn)地單葉蔓荊內(nèi)生真菌的種類與分布均存在差異，以江西都昌多寶產(chǎn)單葉蔓荊內(nèi)生真菌的生物多樣性最為豐富，共67株，而廣東汕頭產(chǎn)單葉蔓荊植株中分離獲得內(nèi)生真菌最少；不同地理?xiàng)l件和生長環(huán)境的單葉蔓荊內(nèi)生真菌種類和分布存在差異，從湖濱沙灘荒洲產(chǎn)單葉蔓荊分得內(nèi)生真菌菌株數(shù)最多，湖中沙灘荒洲產(chǎn)單葉蔓荊分得內(nèi)生真菌菌株最少。該研究為揭示單葉蔓荊內(nèi)生真菌對(duì)其藥用品質(zhì)的形成，探討內(nèi)生真菌與單葉蔓荊道地藥材相關(guān)性提供依據(jù)。

產(chǎn)地，單葉蔓荊，內(nèi)生真菌，生態(tài)分布

單葉蔓荊(Vitex trifolia )為馬鞭草科牡荊屬多年生落葉藤本灌木植物，自然分布于江西、山東、浙江、福建、廣東等沙灘地，具有很強(qiáng)的抗逆能力。單葉蔓荊為傳統(tǒng)中藥，具有疏風(fēng)散熱，鎮(zhèn)靜止痛，行氣散瘀，清利頭目等功效。單葉蔓荊作為江西地道藥材[1,2]，有關(guān)單葉蔓荊道地性研究主要重于外部生態(tài)環(huán)境對(duì)其藥材道地性的影響，缺乏對(duì)單葉蔓荊內(nèi)環(huán)境的研究，尤其是植物內(nèi)生真菌對(duì)其藥材優(yōu)良品質(zhì)的形成研究鮮見報(bào)道。筆者以單葉蔓荊為材料，研究不同產(chǎn)地單葉蔓荊內(nèi)生真菌分布和生態(tài)分布規(guī)律，以期為揭示單葉蔓荊內(nèi)生真菌對(duì)其藥用品質(zhì)的形成，探討內(nèi)生真菌與單葉蔓荊道地藥材相關(guān)性，將有助于闡明單葉蔓荊道地性的形成機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

201 1 年9月-2012年10月于江西都昌多寶、撫州大港、星子蓼花、吳城吉山、新建厚田，廣東汕頭、山東威海等地各采集60株單葉蔓荊健康植株。保存于無菌自封袋中帶回實(shí)驗(yàn)室。供試培養(yǎng)基為PDA固(液體)培養(yǎng)基。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 內(nèi)生真菌的分離純化、鑒定 按常規(guī)組織分離方法，進(jìn)行內(nèi)生真菌的分離純化、鑒定[3-6]。

1.2.2 真菌的多樣性分析 真菌種群的多樣性水平采用Shannon-wiener指數(shù)(H)、Pielou均勻度指數(shù)(J)和Margalef豐富度指數(shù)(R)進(jìn)行分析[7]。

H=-∑[ni/NLn(ni/N)]；J=H/InS；R=(S-1)/lnN

其中ni為第i個(gè)種的個(gè)體數(shù)目，N為群落中所有種的總個(gè)體數(shù)，S為每個(gè)樣點(diǎn)的物種種數(shù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同產(chǎn)地單葉蔓荊內(nèi)生真菌分布

通過經(jīng)典組織分離法，從單葉蔓荊1500個(gè)組織中分離獲得內(nèi)生真菌257株，分別屬于4綱5目6科26屬。7個(gè)產(chǎn)地的單葉蔓荊植株中，以江西都昌多寶產(chǎn)單葉蔓荊內(nèi)生真菌的生物多樣性最為豐富，共67株，星子蓼花位居第二，共55株，撫州大港居第三，共47株，不同產(chǎn)地單葉蔓荊內(nèi)生真菌的種類與分布均存在差異，詳見表1。

表1 不同產(chǎn)地單葉蔓荊內(nèi)生真菌分布

由表1可知，7種不同產(chǎn)地共有屬青霉屬、葡萄孢屬、叢梗孢屬、鏈格孢屬、擬青霉屬，但分離菌株數(shù)不同，曲霉屬和球殼孢屬為江西星子蓼花、都昌多寶、吳城吉山、新建厚田、撫州大港和廣東汕頭等6種產(chǎn)地共有屬。擬青霉屬為江西星子蓼花、都昌多寶、吳城吉山、新建厚田、撫州大港和山東威海等產(chǎn)地共有屬。單端孢屬在江西都昌多寶、星子蓼花、撫州大港、新建厚田、廣東汕頭和山東威海產(chǎn)地分離獲得。盾殼霉屬和根霉屬在江西都昌多寶、星子蓼花、撫州大港、新建厚田、吳城吉山產(chǎn)地分得。毛霉屬、擬莖點(diǎn)霉屬和白絲菌絲無孢子在都昌多寶、星子蓼花、撫州大港、新建厚田產(chǎn)地分離獲得。頭孢屬、痂圓孢屬明枝霉屬和褐色菌絲無孢子類只在都昌多寶、星子蓼花兩產(chǎn)地分離獲得。黑團(tuán)孢屬在新建厚田、山東威海兩產(chǎn)地分離獲得。膠帚霉屬、盤二孢屬、色串孢屬和毛殼屬等分別只在都昌多寶、新建厚田、廣東汕頭，吳城吉山等產(chǎn)地分離獲得。說明某些菌株表現(xiàn)出一定的地域?qū)Ｒ恍浴?/p>

2.2 單葉蔓荊不同生境內(nèi)生真菌分布

筆者在采樣時(shí)發(fā)現(xiàn)單葉蔓荊的生長環(huán)境有4種類型，即湖濱沙灘荒洲、河岸沙灘荒洲，、湖中沙灘荒洲和海邊沙灘荒洲。江西星子蓼花和都昌多寶產(chǎn)單葉蔓荊屬第一種類型，江西新建厚田和撫州大港產(chǎn)單葉蔓荊屬第二種類型，江西吳城吉山產(chǎn)單葉蔓荊屬第三種類型，廣東汕頭和山東威海產(chǎn)單葉蔓荊屬第四種類型。從研究結(jié)果可知，不同地理?xiàng)l件和生長環(huán)境的單葉蔓荊內(nèi)生真菌種類和分布存在差異，從湖濱沙灘荒洲產(chǎn)單葉蔓荊分得內(nèi)生真菌菌株數(shù)最多，共計(jì)122株，占總株數(shù)的47.47%?？赡苁菃稳~蔓荊主要生長分布在沿鄱陽湖濱地區(qū)，尤以星子縣和都昌縣產(chǎn)量大、歷史久、質(zhì)量優(yōu)。故從兩地產(chǎn)的單葉蔓荊分得內(nèi)生真菌最多。其次為河岸沙灘荒洲產(chǎn)單葉蔓荊分得內(nèi)生真菌菌株數(shù)83株，占總數(shù)的32.30%。再次是海邊沙灘荒洲產(chǎn)單葉蔓荊分得內(nèi)生真菌27株，占總數(shù)的10.51%。從湖中沙灘荒洲產(chǎn)單葉蔓荊分得內(nèi)生真菌25株，菌株最少，占總數(shù)的9.73%?？梢妴稳~蔓荊內(nèi)生真菌與其地理?xiàng)l件和生長環(huán)境密切相關(guān)。

2.3 不同產(chǎn)地單葉蔓荊內(nèi)生真菌多樣性分析

由表2可見，不同地區(qū)間的單葉蔓荊內(nèi)生真菌種群的多樣性水平存在差異，從7個(gè)采樣地點(diǎn)分離獲得內(nèi)生真菌的Shannon-wiene多樣性指數(shù)(H)、豐富度指數(shù)(R)和Pielou均勻度指數(shù)(J)來看，它們從高到低的順序均為，都昌多寶>星子蓼花>撫州大港>新建厚田>吳城吉山>山東威海>廣東汕頭，都昌多寶產(chǎn)的單葉蔓荊內(nèi)生真菌多樣性指數(shù)(H)、豐富度指數(shù)(R)和Pielou均勻度指數(shù)(J)均最高，分別為1.1397、11.894和0.2711，而廣東汕頭Shannon-wiene多樣性指數(shù)(H)、豐富度指數(shù)(R)和Pielou均勻度指數(shù)(J)最低，真菌種類最少。

表2 不同產(chǎn)地單葉蔓荊內(nèi)生真菌多樣性指數(shù)分析

3 討論

筆者對(duì)不同產(chǎn)地單葉蔓荊中內(nèi)生真菌的種類和分布進(jìn)行了比較，發(fā)現(xiàn)不同地區(qū)間的單葉蔓荊內(nèi)生真菌種群的多樣性水平存在差異，其中以江西都昌產(chǎn)單葉蔓荊內(nèi)生真菌的種類最豐富。不同地理?xiàng)l件和生長環(huán)境的單葉蔓荊內(nèi)生真菌種類和分布存在差異，從湖濱沙灘荒洲產(chǎn)單葉蔓荊分得內(nèi)生真菌菌株數(shù)最多，湖中沙灘荒洲產(chǎn)單葉蔓荊分得內(nèi)生真菌菌株最少。因?yàn)楹猩碁┗闹夼c外界形成自然地理隔離，物種遷入率較低，土壤貧瘠，光照時(shí)間較長等，導(dǎo)致根際真菌種類稀少主要因素。而湖濱沙灘荒洲土壤較肥沃、水分充足、林中其它生物物種豐富，為真菌生長提供有利環(huán)境，進(jìn)一步說明環(huán)境影響內(nèi)生真菌的種類和數(shù)量。

[1]梁芳，周國珍，曹嵐．我國單葉蔓荊藥用植物資源調(diào)查[J]．安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，39(35)：21638.

[2]田華，杜婷，黃開合，等．蔓荊子的藥理作用研究進(jìn)展[J]．中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2013，10(9)：29.

[3]何佳，劉笑潔，趙啟美，等．植物內(nèi)生真菌分離方法的研究[J].食品科學(xué)，2009，30(15)：108.

[4]Berg G，Smalla K．Plant species and soil type cooperatively shape the structure and function of microbial communities in the rhizospher[J]．FEMS Microbiology Ecology，2009，68 (1)：1.

[5]魏景超．真菌鑒定手冊(cè)[M]．上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社，1979.34.

[6]詹壽發(fā)，張紅芳，彭琴，等．單葉蔓荊內(nèi)生真菌多樣性研究[J]．廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2012，(20)：18.

(責(zé)任編輯胡安娜)

Ecological Distribution of Endophyty Fungi Isolated from Vitex trifolia

TAN Yuqin，ZHANG Hongfang，F(xiàn)AN Youfu，

PENG Qin，ZHAN Shoufa，CHEN Ye

(College of Pharmacewtical and Life Sciences， JiuJiang University， Jiujiang,Jiangxi 332000， China)

The study was about ecological distribution of endophyty fungi isolated from vitex trifolia.The results showed that 257 strains of endophytic fungi were isolated from vitex trifolia in different regions， belonging to 26 genera and 6 famihelies， 5 orders and 4 classes. The study found that the species and distribution of endophytic fungi of vitex trifolia in different regions are various. Jiangxi Duchang had the most abundant biodiversity of endophytic fungi of vitex trifolia where there was a total of 67 strains， while endophytic fungi of vitextrifolia in Guangdong Shantou were isolated by the least. The strains and distributions of endophytic fungi of vitex trifolia from different geographical conditions and the growth environment varied a lot. The maximum number of endophytic fungi strains was from a lakeside beach desert， and the least was from the beach in lake. The study was to reveal medicinal quality formation of the endophytic fungi of vitex trifolia and provided the basis of the correlation between endophytic fungi and genuine medicinal materials.

place of production, vitex trifolia, endophytic fungi, ecological distribution

江西省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(編號(hào)2010GZN0130)的成果之一。

譚玉琴(1965-)，女，學(xué)士，副教授，主要從事真菌資源研究。

Q 949.32

A

1674-9545(2014)04-0057-(00)