黃芩水、醇提液急性毒性實(shí)驗(yàn)研究※

劉 芳 李蘭芳 劉廣杰 姜 紅 張勤增

(河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院胸二科，河北 石家莊 050011)

實(shí)驗(yàn)研究

黃芩水、醇提液急性毒性實(shí)驗(yàn)研究※

劉 芳 李蘭芳1劉廣杰 姜 紅1張勤增1

(河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院胸二科，河北 石家莊 050011)

目的觀察黃芩水、醇提液的急性毒性反應(yīng)。方法取健康小鼠40只，雌雄各半，隨機(jī)分為2組，每組各20只，禁食不禁水12 h后，黃芩水提液組經(jīng)口予黃芩水提液，給藥容積為60 mL/kg體質(zhì)量，生藥含量為36.0 g/kg體質(zhì)量，分2次給藥，空白對(duì)照組予等容積蒸餾水，進(jìn)行黃芩水提液的毒性實(shí)驗(yàn)。另取健康小鼠40只，雌雄各半，隨機(jī)分為4組，即50、42、35、29 g/kg組，每組各10只，禁食不禁水12 h后，分別按0.4 mL/10 g體質(zhì)量黃芩醇提液灌胃給藥，分別含生藥50、42、35、29 g/kg體質(zhì)量，進(jìn)行黃芩醇提液毒性實(shí)驗(yàn)。結(jié)果黃芩水提液的小鼠經(jīng)口最大耐受量為72.0 g生藥/kg；黃芩80%乙醇提液的半數(shù)致死量(LD50)為39.60 g生藥/kg，95%可信限為36.75～42.68 g生藥/kg。結(jié)論黃芩水、醇提液的毒性較低，臨床給藥安全可靠。

黃芩；毒性試驗(yàn)；小鼠；動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

黃芩為唇形科多年生植物黃芩(scutellaria baicalensis georgi)的干燥根[1]。主產(chǎn)于河北、山西、河南、內(nèi)蒙古、遼寧等地區(qū)，現(xiàn)以山西產(chǎn)量最大，河北承德質(zhì)量最好。黃芩性寒，味苦，歸肺、脾、膽、大腸、小腸經(jīng)，具有清熱燥濕、瀉火解毒、止血、安胎等功效。黃芩是我國(guó)常用藥材，其具有廣泛的藥理作用：具有抗氧化、清除自由基、抗病毒、抗菌、抗炎、抗變態(tài)反應(yīng)、抗腫瘤、解熱等作用，并對(duì)免疫、心腦血管、消化、神經(jīng)等系統(tǒng)均有保護(hù)作用[2-5]，在臨床具有很好的應(yīng)用前景。但文獻(xiàn)中對(duì)黃芩毒性方面的研究較少，本實(shí)驗(yàn)采用黃芩水提液和醇提液經(jīng)灌胃給藥方式觀察并比較黃芩水提液和醇提取液對(duì)小鼠的急性毒性，結(jié)果如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 藥材 黃芩，購(gòu)自中國(guó)藥材集團(tuán)承德藥材有限責(zé)任公司生產(chǎn)。

1.1.2 動(dòng)物 昆明健康小鼠80只，體質(zhì)量(20±2)g，雌雄各半。購(gòu)自河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，動(dòng)物合格證號(hào)1203058。

1.1.3 儀器 DT2000型電子天平，由江蘇省常熟市雙杰測(cè)試儀器廠生產(chǎn)。PL203型電子天平，由梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 黃芩水提液制備 黃芩藥材120 g加水提取3次，每次加水量1 000 mL，每次煎煮1 h，合并3次水提液，水浴加熱濃縮至100 mL，即水提液濃度為1.2 g/mL。給藥時(shí)調(diào)節(jié)成適宜的濃度。

1.2.2 黃芩醇提液制備 黃芩藥材150 g加80%乙醇回流提取3次，加乙醇量分別為1 500、1 000、800 mL，每次1 h，合并3次乙醇提取液，回收乙醇并水浴加濃縮至150 mL，即80%乙醇提取液濃度為1.0 g/mL。

1.2.3 黃芩水提液急性毒性實(shí)驗(yàn) 根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，采用最大耐受量法[6]檢驗(yàn)受試物毒性。取健康小鼠40只，雌雄各半，隨機(jī)分為2組，每組各20只，禁食不禁水12 h后，水提液組經(jīng)口予黃芩水提液，給藥容積為60 mL/kg體質(zhì)量，生藥含量為36.0 g/kg體質(zhì)量，分2次給藥?？瞻讓?duì)照組予等容積蒸餾水。給藥后，觀察2組小鼠14 d內(nèi)糞便、皮膚、黏膜、呼吸、心跳及活動(dòng)情況，若有異常及時(shí)記錄，若有死亡動(dòng)物進(jìn)行尸檢。每日稱量攝食量和動(dòng)物體質(zhì)量，觀察期結(jié)束后，處死存活動(dòng)物并進(jìn)行大體解剖，如有必要，進(jìn)行病理組織學(xué)檢查。

1.2.4 黃芩醇提液急性毒性實(shí)驗(yàn) 根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，取健康小鼠40只，雌雄各半，隨機(jī)分為4組，即50、42、35、29 g/kg組，每組各10只，禁食不禁水12 h后，分別按0.4 mL/10 g體質(zhì)量黃芩醇提液灌胃給藥，分別含生藥50、42、35、29 g/kg體質(zhì)量。給藥后，即刻觀察動(dòng)物中毒表現(xiàn)及死亡情況；并觀察存活小鼠14 d內(nèi)體質(zhì)量、飲食、外觀、行為、分泌物等情況。記錄所有小鼠的死亡情況、中毒癥狀及中毒反應(yīng)的起始時(shí)間、嚴(yán)重程度、持續(xù)時(shí)間、是否可逆等。對(duì)死亡小鼠及時(shí)進(jìn)行大體解剖，當(dāng)發(fā)現(xiàn)器官出現(xiàn)體積、顏色、質(zhì)地等改變時(shí)，則對(duì)改變的器官進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。

2 結(jié) 果

2.1 黃芩醇提取液急性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1.1 一般情況 50 g/kg組小鼠在給藥后，全部動(dòng)物3 min內(nèi)入睡，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)動(dòng)物呼吸變淺變?nèi)酰? h內(nèi)全部死亡，死亡時(shí)間在2～5 h之間，死亡原因可能是中樞抑制。42 g/kg組3只小鼠、35 g/kg組2只小鼠給藥5 min內(nèi)入睡，40 min后陸續(xù)蘇醒，29 g/kg組小鼠給藥后安靜少動(dòng)，1 h后活動(dòng)恢復(fù)正常，無(wú)小鼠死亡。各組存活小鼠體質(zhì)量和攝食量均在給藥后1～2 d降低，48 h后恢復(fù)正常。觀察期結(jié)束處死所有小鼠進(jìn)行剖檢，主要臟器未發(fā)現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的異常情況。黃芩醇提取液不同劑量小鼠死亡情況見(jiàn)表1。

表1 黃芩醇提取液不同劑量組死亡小鼠情況

由表1可見(jiàn)，經(jīng)統(tǒng)計(jì)黃芩80%乙醇提取物的LD50為39.60 g/kg，95%可信限為36.75～42.68 g/kg。

2.2 黃芩水提液急性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.2.1 一般情況 黃芩水提液組給藥后，小鼠在10 min內(nèi)安靜入睡，2 h后蘇醒，活動(dòng)、呼吸、皮膚、黏膜、心跳、毛色等正常，呼吸、心跳及活動(dòng)情況無(wú)異常，無(wú)小鼠死亡。觀察期結(jié)束處死小鼠進(jìn)行剖檢，各主要臟器未見(jiàn)明顯異常。

2.2.2 2組小鼠體質(zhì)量比較 見(jiàn)表2。

表2 2組小鼠體質(zhì)量比較 ±s

與空白對(duì)照組比較，*P<0.05，**P<0.01

由表2可見(jiàn)，與空白對(duì)照組比較，黃芩水提液組雄性小鼠體質(zhì)量在給藥后第1、3、4 d下降(P<0.05，P<0.01)。

2.2.3 2組小鼠攝食量比較 見(jiàn)表3。

表3 2組小鼠攝食量比較 g/只，±s

由表3可見(jiàn)，與空白對(duì)照組比較，黃芩水提液組小鼠在給藥后第1 d起攝食量開(kāi)始減少。

3 討 論

黃芩在我國(guó)現(xiàn)存最早的本草專(zhuān)著《神農(nóng)本草經(jīng)》中歸類(lèi)于中卷草部中品，其主要功用為清熱燥濕，瀉火解毒，安胎。而關(guān)于黃芩毒性的研究較少，有研究表明小鼠口服黃芩素后產(chǎn)生的毒性很小，其最大給藥量為15 g/kg，具有較好的安全性[7]。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，黃芩水提液的小鼠經(jīng)口最大耐受量為72.0 g生藥/kg，相當(dāng)于《中華人民共和國(guó)藥典》[1]規(guī)定用量的7.2～24.0倍；黃芩80%乙醇提取液的LD50為39.60 g生藥/kg，95%可信限為36.75～42.68 g生藥/kg，給藥組小鼠未見(jiàn)其他異常反應(yīng)。由此可見(jiàn)，黃芩水煎液、醇提液的毒性較低，臨床應(yīng)用安全可靠。

[1] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典：一部[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：211.

[2] 宋琳莉，孟慶剛.黃芩的藥理作用研究進(jìn)展[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2008，26(8)：1676-1678.

[3] 戰(zhàn)渤玉，高明，李東霞，等.中藥材黃芩的研究進(jìn)展[J].中醫(yī)藥信息，2008，25(6)：16-20.

[4] 張喜平，程琪輝，陳君峰，等.黃芩素膠囊的小鼠急性毒性實(shí)驗(yàn)[J].醫(yī)學(xué)研究雜志，2007，36(4)：52-55.

[5] 杜亞偉.黃芩苷對(duì)發(fā)熱大鼠體溫及血清白細(xì)胞介素-1β水平的影響[J].河北中醫(yī)，2010，32(6)：914-915.

[6] 丁虹.實(shí)驗(yàn)藥理學(xué)[M].北京：科學(xué)出版社，2008：66-67，50.

[7] 張喜平，程琪輝，陳君峰，等.黃芩素膠囊的小鼠急性毒性實(shí)驗(yàn)[J].醫(yī)學(xué)研究雜志，2007，36(4)：52-55.

(本文編輯：曹志娟)

Studyontheacutetoxicityofwaterandalcoholextractofradixseutellariae

LIUFang，LILanfang，LIUGuangjie，etal.

ThoracicSurgeryDepartmentTwo，F(xiàn)orthHospitalofHebeiMedicalUniversity，Hebei，Shijiazhuang050011

ObjectiveTo observe the acute toxicity of water and alcohol extract of radix seutellariae.MethodsKunming mice were used to test the maximum tolerated dose or LD50 of water and alcohol extract of radix seutellariae.ResultsThe maximum tolerated dose of water extract of radix seutellariae was 72.0 g/kg.The LD50 of alcohol extract of radix seutellariae was 39.60 g/kg， 95% confidence interval was 36.75～42.68 g/kg.ConclusionThe water and alcohol extract of radix seutellariae is safe for clinical administration.

Radix seutellariae; Toxity test; Mouse

※ 項(xiàng)目來(lái)源：河北省中醫(yī)藥管理局2012年度中醫(yī)藥類(lèi)科研計(jì)劃課題(編號(hào)：2012015)

1 河北省疾病預(yù)防控制中心藥物研究所，河北 石家莊 050021

劉芳(1980—)，女，主治醫(yī)師，博士。研究方向：心腦血管藥理學(xué)。

R994.13

A

1002-2619(2014)03-0425-03

2013-04-27)