乙肝患者血清TNF-α、IL-6、IL-10的水平及臨床意義

肖時(shí)湘，韓 濤，李 巖，闞志超

(天津市第三中心醫(yī)院 消化科，天津300170)

乙型肝炎(hepatitis B)是最常見的傳染性肝臟疾病，據(jù)報(bào)道世界上有3億多人患有乙型肝炎,每年約有60多萬(wàn)人死于肝硬化、肝癌等與乙型肝炎相關(guān)性的肝臟疾病，乙型肝炎已經(jīng)成為嚴(yán)重危害人群健康疾病。關(guān)于疾病進(jìn)展的原因一直是研究的重點(diǎn)，近年研究發(fā)現(xiàn)[1]，乙型肝炎在疾病進(jìn)展的過(guò)程中，與炎癥的反復(fù)發(fā)作和肝細(xì)胞損傷等因素密切相關(guān)，很多學(xué)者對(duì)乙型肝炎患者的免疫應(yīng)答及免疫調(diào)節(jié)功能開展了大量的相關(guān)研究,發(fā)現(xiàn)細(xì)胞因子在疾病的發(fā)展過(guò)程中起著非常重要的作用。本研究通過(guò)分析乙肝患者血清中血清腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素-6(Interleukin-6，IL-6)、白細(xì)胞介素-10(Interleukin-10，IL-10)的水平，以探討其在乙型肝炎發(fā)病機(jī)制中的作用和意義。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象

選取2009年1月-2012年12月在天津市第三中心醫(yī)院進(jìn)行治療的128例乙型肝炎患者和同期進(jìn)行體檢的40名健康人作為研究對(duì)象。病例組患者的納入標(biāo)準(zhǔn)為：按照《2010年版的慢性乙型肝炎防治指南》診斷為乙型肝炎或乙型肝炎肝硬化者；還未接受抗病毒治療者。排除標(biāo)準(zhǔn)為：患有酒精性肝病、藥物性肝損、自身免疫性肝炎等其他肝病者；合并HIV、HAV、HCV、HDV、HEV、EBV、CMV等其他病毒感染者；重疊感染者；患病期間曾服用過(guò)激素類藥物。所有調(diào)查對(duì)象均對(duì)本研究?jī)?nèi)容知情同意并簽署同意書。

1.2 檢測(cè)方法

所有患者于清晨空腹使用帶有抗凝劑的一次性真空采血管抽取肘靜脈血4 ml，靜置后3 000 rpm離心15 min，取血清，置于-30℃冰箱保存。測(cè)定血清TNF-α、IL-6、及IL-10前將血清標(biāo)本置于室溫進(jìn)行復(fù)融。TNF-α、IL-6、及IL-10試劑盒均購(gòu)自上海森雄公司，操作時(shí)嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書要求進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所以資料采用excel軟件建立數(shù)據(jù)庫(kù)，使用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。數(shù)值變量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，兩組間的比較使用t檢驗(yàn)，多組之間均數(shù)的比較使用方差分析，組間兩兩比較使用q檢驗(yàn)，分類變量資料使用相對(duì)數(shù)表示，組間比較使用χ2檢驗(yàn)，以P≤0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 乙型肝炎患者和健康者的一般情況比較

本次研究共選擇乙型肝炎患者128例，男性90例，女性38例，年齡范圍28-68歲，平均年齡45.68±9.56歲。健康者40例，男性28例，女性12例，年齡范圍30-65歲，平均年齡45.84±8.92歲。兩組患者年齡、性別分布均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差別(P>0.05)。本次研究中急性乙型肝炎患者14例，輕度慢性乙性肝炎患者29例，中度慢性乙性肝炎患者34例，重度慢性乙性肝炎患者24例，乙肝肝硬化患者27例，各組年齡及性別分布均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。

2.2 乙型肝炎患者和健康者血清TNF-α、IL-6和IL-10含量比較

由表1可知，乙型肝炎患者發(fā)病時(shí)的血清TNF-α、IL-6和IL-10的含量與健康人相比均有差別，乙型肝炎患者的TNF-α和IL-6的含量都明顯高于健康者(P<0.01)，乙型肝炎患者的IL-10的含量低于健康者，差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。

表1 兩組研究對(duì)象血清TNF-α、IL-6和IL-10含量比較(pg/ml)

2.3 不同類型乙型肝炎患者血清TNF-α、IL-6和IL-10含量比較

由表2所示結(jié)果可知，不同類型乙型肝炎患者發(fā)病時(shí)的血清TNF-α、IL-6和IL-10的含量有差別(P<0.05)，在不同組別之間TNF-α、IL-6的含量進(jìn)行5組患者之間兩兩比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，在不同組別之間IL-10的含量在重度慢性乙性肝炎和乙肝肝硬化患者與其他3組的含量有差別(P<0.05)。由結(jié)果可知，隨著病情的進(jìn)展，TNF-α、IL-6的含量逐漸升高，肝損傷程度越重，TNF-α、IL-6的含量越高。隨著病情的進(jìn)展和肝損傷程度加重，IL-10的含量逐漸降低。

表2 不同類型乙型肝炎患者血清中TNF-α、IL-6、IL-10的含量比較(pg/ml)

*五組間兩兩比較P<0.05，△與急性乙型肝炎比較P<0.05，◇與輕度慢性乙性肝炎比較P<0.05,☆與中度慢性乙性肝炎比較P<0.05

3 討論

乙型肝炎的發(fā)生、發(fā)展和機(jī)體的免疫反應(yīng)關(guān)系密切,在機(jī)體的免疫應(yīng)答中,細(xì)胞因子起著重要的作用，其與乙型肝炎病毒相互影響。乙型肝炎病毒可以激活某些細(xì)胞因子，而有些細(xì)胞因子也具有幫助機(jī)體清除乙型肝炎病毒的作用。

TNF-α是細(xì)胞因子中一種重要的介質(zhì)，是一種由血管內(nèi)皮細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞等細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子，它不僅調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫應(yīng)答功能，同時(shí)還能介導(dǎo)IL-6等炎癥介質(zhì)產(chǎn)生，此外它在抗腫瘤、抗感染、凝血和內(nèi)皮損傷反應(yīng)中也發(fā)揮著重要作用。適量的TNF-α可調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫及代謝功能,增強(qiáng)對(duì)入侵的乙型肝炎病毒的抵抗力,能起到維持機(jī)體內(nèi)部狀態(tài)穩(wěn)定的作用，同時(shí)還可以抑制各種致病因子作用,但是過(guò)量的TNF-α則可導(dǎo)致機(jī)體出現(xiàn)肝臟炎癥的加重，使級(jí)別不斷進(jìn)展[2]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，乙型肝炎患者血清中TNF-α含量高于正常對(duì)照組,這與文獻(xiàn)的報(bào)道相一致。病毒性肝炎發(fā)生時(shí)TNF-α增高可能與肝炎病毒直接刺激有關(guān)[3]。TNF-α可以破壞肝細(xì)胞,同時(shí)引起肝臟炎癥、細(xì)胞壞死、及通過(guò)激活磷脂酶 A2產(chǎn)生脂類介質(zhì)等加重肝組織損傷的程度，本次研究結(jié)果顯示，乙型肝炎患者的TNF-α含量高于健康者，并隨著肝損傷程度的加重而升高，說(shuō)明該指標(biāo)可作為觀察肝損傷程度的一個(gè)參考指標(biāo)。

白細(xì)胞介素-6是也是體內(nèi)的一種具有多種生物學(xué)效應(yīng)的細(xì)胞因子，是重要的炎癥介質(zhì)，其主要介導(dǎo)和調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)及炎癥反應(yīng)，刺激造血功能并參與組織修復(fù)等。同時(shí)IL-6也是一種和乙型肝炎患者免疫調(diào)節(jié)相關(guān)的因子，其在肝損傷發(fā)生的早期即表現(xiàn)較高水平，當(dāng)乙型肝炎病毒感染發(fā)生后，血清TNF-α和IL-6的含量明顯升高，這是由于肝細(xì)胞受損，產(chǎn)生大量抗原免疫應(yīng)答反應(yīng)，使單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等被激活，這些細(xì)胞可以分泌大量的IL-6和TNF-α，同時(shí)，IL-6和TNF-α也可互相滲透、互相協(xié)調(diào)[4]，TNF-α也通過(guò)細(xì)胞因子間的相互作用進(jìn)一步誘導(dǎo)IL-6的產(chǎn)生[5]。從而使血清中IL-6、TNF-α的含量在發(fā)病后明顯升高。本研究結(jié)果顯示，血清IL-6、TNF-α在乙肝患者中的含量均高于正常對(duì)照的含量，且隨著病情的進(jìn)展，TNF-α、IL-6的含量逐漸升高，肝損傷程度越重，TNF-α、IL-6的含量越高。這說(shuō)明血清TNF-α、IL-6的表達(dá)水平和肝細(xì)胞的壞死程度及臨床轉(zhuǎn)歸密切相關(guān)。

IL-10 是一種主要由星狀細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和肝細(xì)胞產(chǎn)生的，具有抗炎、抗免疫和抗纖維化作用的細(xì)胞因子，IL-10通過(guò)抑制Th1 細(xì)胞的增殖而影響免疫應(yīng)答反應(yīng)，發(fā)揮抑制炎癥作用，同時(shí)有利于誘導(dǎo)機(jī)體對(duì)外來(lái)病原體產(chǎn)生耐受， 影響機(jī)體對(duì)乙肝病毒的清除，導(dǎo)致乙肝病毒持續(xù)存在[6]。另一方面，IL-10可減少炎癥反應(yīng)引起的損傷，起到保護(hù)機(jī)體的作用。本研究顯示，各組乙肝患者血清IL- 10的含量明顯低于對(duì)照組，且隨著疾病的進(jìn)展，IL-10的含量降低，這提示IL-10抑制細(xì)胞應(yīng)答的發(fā)生， 使機(jī)體不能有效清除受病毒感染的肝細(xì)胞，進(jìn)而造成乙肝病毒感染的得以持續(xù)，而隨著炎癥的加重，IL-10呈下降的趨勢(shì)，說(shuō)明在乙型肝炎病毒使得肝損傷加重時(shí)，IL-10對(duì)肝細(xì)胞具有保護(hù)作用。

對(duì)血清TNF-α、IL-6和IL-10的含量進(jìn)行檢測(cè),可了解乙型肝炎患者肝細(xì)胞的損害程度和機(jī)體的免疫情況,對(duì)臨床判斷病情進(jìn)展程度有一定的意義,同時(shí)也能為臨床治療乙型肝炎使用TNF-α和IL-6拮抗劑提供理論依據(jù)。

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