FISH檢測(cè)糾正核型分析18—三體誤報(bào)1例

李會(huì)平

(邢臺(tái)市人民醫(yī)院 檢驗(yàn)二科，河北 邢臺(tái)054001)

1 臨床資料

患兒男，因出生后呼吸稍促2.5 h入院?；純合档诙サ谝划a(chǎn)，足月兒，無(wú)誘因自然分娩，出生體重2 350 g。入院時(shí)查體：頭頂部突出，前囟平坦，張力不高，口周無(wú)發(fā)青，口唇無(wú)發(fā)紺，高顎弓，無(wú)鼻翼，耳位低，頸部粗短，吸氣性三凹征弱陽(yáng)性，雙手通貫掌，雙手緊握，拇指內(nèi)收，中指壓在食指上，足趾背曲，四肢肌張力低，原始反應(yīng)弱。

2 外周血染色體分析

無(wú)菌抽取患兒外周血常規(guī)進(jìn)行G顯帶染色體核型分析，發(fā)現(xiàn)一衍生染色體，疑似18號(hào)衍生染色體der(18)(Y；18)(q11；q23)，核型暫定為46，X，+18，der(18)(Y；18)(q11；q23)。具體核型如圖1。為查找該衍生染色體來(lái)源，建議患兒父母做染色體核型分析，父母雙方均拒絕檢測(cè)。為此對(duì)在染色體核型分析中留取的細(xì)胞懸液進(jìn)行分子學(xué)水平18、X、Y染色體熒光原位雜交(FISH)檢測(cè)。檢測(cè)試劑采用北京金菩嘉醫(yī)療科技有限公司試劑盒，18號(hào)、X、Y染色體相應(yīng)標(biāo)記顏色為藍(lán)色、綠色、紅色，具體探針標(biāo)記位置為：18號(hào)染色體(18p11.1-q11.1),X染色體(Xp11.1-q11.1),Y染色體(Yp11.1-q11.1)。FISH檢測(cè)結(jié)果如圖2。FISH結(jié)果顯示一個(gè)紅信號(hào)和一個(gè)綠色信號(hào)及兩個(gè)藍(lán)色信號(hào)，這三個(gè)不同顏色的信號(hào)分別是一個(gè)帶有著絲粒的Y染色體和X染色體及兩個(gè)均帶有著絲粒的18號(hào)染色體，說(shuō)明該患兒染色體核型分析圖中的衍生染色體是Y染色體而不是18號(hào)染色體。按照原暫定核型46，X，+18，der(18)(Y；18)(q11；q23)，F(xiàn)ISH結(jié)果應(yīng)顯示三個(gè)藍(lán)色信號(hào)(即三個(gè)均含有著絲粒的18號(hào)染色體)和一個(gè)藍(lán)色信號(hào)，說(shuō)明我們所暫定的染色體核型分析是錯(cuò)誤的，具體核型應(yīng)該是46，XY，add(Y)(q12)，即兩條正常的18號(hào)染色體、一條正常X染色體和一條未知來(lái)源附加物的Y染色體。

圖1(a) 圖1(b)

3 討論

18—三體綜合征是僅次于先天愚型的一種常見染色體三體綜合征，主要臨床表現(xiàn)為多發(fā)畸形，如早產(chǎn)，過(guò)期產(chǎn)，出生體重低，小于胎齡兒，頭顱小，眼裂小，耳位低，小下頜，顎弓高，胸廓畸形，先天性心臟病以及手足異常等，通常表現(xiàn)為手指緊握，拇指壓于食指，無(wú)名指和小指壓于中指，或者食指疊壓于中指上，小指壓于無(wú)名指上，患兒大多于生后數(shù)周死亡[1]。該患兒具有典型的18—三體臨床特征，并且其染色體核型中未知來(lái)源附加物的Y染色體酷似18號(hào)染色體q23位置附加外來(lái)物質(zhì)，造成核型暫定為18三體的錯(cuò)誤核型。后經(jīng)分子學(xué)水平FISH檢測(cè)后證實(shí)原暫定核型錯(cuò)誤，說(shuō)明傳統(tǒng)的細(xì)胞遺傳學(xué)水平核型分析技術(shù)也有一定的瑕疵，并不能百分之百確認(rèn)，對(duì)于復(fù)雜的、難于確認(rèn)的染色體需和分子學(xué)水平的FISH檢測(cè)技術(shù)相互結(jié)合才能互補(bǔ)優(yōu)缺、完成對(duì)染色體核型的準(zhǔn)確分析。

染色體核型分析是傳統(tǒng)的染色體疾病診斷技術(shù)，既可檢測(cè)染色體數(shù)目異常，也可檢測(cè)染色體結(jié)構(gòu)異常，是臨床篩查染色體疾病的傳統(tǒng)有效方法。然而因其受到細(xì)胞培養(yǎng)周期的限制，不利于快速診斷，且操作技術(shù)要求高，影響試驗(yàn)因素多，有些染色體重排由于涉及的片斷太小或具有相似的帶型，一些微畸變、微缺失往往在常規(guī)染色體核型分析技術(shù)中不能夠檢出，造成診斷上的誤差。染色體熒光原位雜交(FISH)技術(shù)是近年發(fā)展的針對(duì)特定染色體進(jìn)行數(shù)目結(jié)構(gòu)異常診斷的一種新方法，用于染色體疾病診斷具有快速，特異，定位準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)，該技術(shù)能識(shí)別微小染色體易位、缺失，確定附加染色體、標(biāo)記染色體、衍生染色體的組成和來(lái)源[2-3]，是常規(guī)染色體核型分析的有利補(bǔ)充。FISH技術(shù)用于染色體疾病診斷也有一定的局限性，因?yàn)樗鼘?duì)診斷染色體疾病的可靠性在很大程度上依賴于探針的特異性，受特異性探針的制約僅能提供有限的染色體信息，即用一種探針只能檢測(cè)一種異常，不利于常規(guī)檢測(cè)。對(duì)懷疑存在多種異常染色體需采用多個(gè)探針進(jìn)行檢測(cè)，造成成本增加，另外，F(xiàn)ISH對(duì)相互易位等染色體結(jié)構(gòu)異常檢出有一定困難，這是由于斷裂點(diǎn)的不可預(yù)見性很難制備適宜的探針，再次，目前用于染色體異常檢測(cè)的商品化FISH探針多數(shù)屬于著絲粒探針，該類探針不能對(duì)染色體結(jié)構(gòu)進(jìn)行檢測(cè)[4]，易造成染色體結(jié)構(gòu)異常漏診。

該患者染色體核型分析暫定核型屬于誤報(bào)，經(jīng)FISH糾正仍不能確定附加物質(zhì)來(lái)源，是由于我實(shí)驗(yàn)室FISH探針針對(duì)點(diǎn)位的局限性，僅憑一兩組探針無(wú)法完成對(duì)該Y染色體附加物的確認(rèn)，該患者Y染色體上的附加物質(zhì)來(lái)源進(jìn)一步確認(rèn)需對(duì)該患兒父母進(jìn)行染色體核型分析。

總之，對(duì)于染色體核型分析復(fù)雜的，難于確定的染色體，應(yīng)選擇FISH進(jìn)一步檢測(cè)，可以防止錯(cuò)報(bào)、漏報(bào)。二者有機(jī)結(jié)合將大大提高染色體疾病診斷的準(zhǔn)確性及誤診率，為臨床提供更加準(zhǔn)確可靠的診斷依據(jù)。

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