小鼠內(nèi)眥靜脈叢注射與尾靜脈注射比較

陳 霆，李楓棣，鄧 巍，秦 川

(中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所，衛(wèi)生部人類疾病比較醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，國(guó)家中醫(yī)藥管理局人類疾病動(dòng)物模型三級(jí)實(shí)驗(yàn)室，北京 100021)

由于小鼠體型小,生長(zhǎng)繁殖快,成本低,易于控制,因此常被用作醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。在各種基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究中，為了觀察藥物，新化合物等的藥效毒理；在疾病發(fā)生的病因，病機(jī)，病理研究中，為了觀察動(dòng)物的機(jī)體功能，代謝以及形態(tài)變化，都需要對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物采用一定的給藥方式。而小鼠尾靜脈注射就是其中最常用的方法之一，但小鼠尾靜脈較細(xì),造成穿刺難度較大,因此很大程度上制約了實(shí)驗(yàn)的成功與否。近年來(lái)出現(xiàn)了一種新型的小鼠靜脈注射方法卻可以解決這個(gè)問(wèn)題，即小鼠內(nèi)眥靜脈注射，其操作更簡(jiǎn)單，成功率更高，本文即通過(guò)分別對(duì)小鼠進(jìn)行尾靜脈注射操作和內(nèi)眥靜脈注射，對(duì)其操作難易程度以及成功率進(jìn)行對(duì)比。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：4～6周齡SPF級(jí)雌性BALB/C小鼠20只，體重14～16 g，來(lái)自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司(合格證號(hào)：SCXK(京)2012-0001)。實(shí)驗(yàn)場(chǎng)所：中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所ABSL-3實(shí)驗(yàn)室(注冊(cè)號(hào)：CNAS BL0010)。

1.1.2 0.9%氯化鈉注射液：石家莊四藥有限公司，批號(hào)130531407

1. 1. 3 1 mL注射器

1.2 方法

將動(dòng)物分成2組，每組10只，一組為尾靜脈注射組，一組為內(nèi)眥靜脈注射組，由同一實(shí)驗(yàn)人員對(duì)兩組分別進(jìn)行注射，每次每只小鼠注射100 μL0.9%氯化鈉注射液，并分別觀察每組注射的成功率以及所耗費(fèi)時(shí)間。內(nèi)眥靜脈叢操作方法見(jiàn)圖1：

圖1 小鼠內(nèi)眥靜脈叢注射實(shí)際操作圖

2 結(jié)果

該實(shí)驗(yàn)人員為首次進(jìn)行此兩種靜脈注射方法，實(shí)驗(yàn)前由其他精通此兩種方法的實(shí)驗(yàn)人員為其演示并講解操作要領(lǐng)后分別進(jìn)行操作。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1：

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，該實(shí)驗(yàn)人員對(duì)尾靜脈注射組的成功率僅為40%，而內(nèi)眥靜脈注射的成功率為100%；而在時(shí)間上，內(nèi)眥靜脈注叢射組所花費(fèi)的時(shí)間明顯要比尾靜脈注射組短很多。

3 討論

本次實(shí)驗(yàn)所用的內(nèi)眥靜脈叢注射方法與之前所報(bào)道過(guò)的方法不同，之前有報(bào)道過(guò)的內(nèi)眥靜脈叢注射法為使針頭與鼠面成約45°的夾角,然后刺入下眼瞼與眼球之間,刺入深度約2～3 mm,同時(shí)固定好小鼠，防止因小鼠掙扎而造成的跑針，但這種操作方法的缺點(diǎn)是，注射是容易將針刺入小鼠淚腺，而使所注入的液體從小鼠鼻腔或口腔流出[1]。本次實(shí)驗(yàn)實(shí)用的方法為將小鼠固定好，并使眼球突出于眼眶，使針頭與小鼠眼眶中心處成90°角刺入，刺入深度為2～3 mm，見(jiàn)注射器有回血即可進(jìn)行注射，這種方法的更易于操作，且成功率高。之前的報(bào)道中科研人員還進(jìn)行過(guò)利用這兩種方法對(duì)小鼠進(jìn)行碳廓清實(shí)驗(yàn)[2-3]，碳廓清實(shí)驗(yàn)是測(cè)定小鼠機(jī)體非特異性免疫功能的常用方法之一,其墨汁注入量的準(zhǔn)確性與否是該項(xiàng)實(shí)驗(yàn)?zāi)芊袢〉贸晒Φ年P(guān)鍵因素之一。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明用內(nèi)眥靜脈叢注入法注射墨汁測(cè)定碳廓清速率與尾靜脈注入法一樣,亦可敏感地反映小鼠的碳廓清能力[2]。通過(guò)本實(shí)驗(yàn)可以說(shuō)明小鼠內(nèi)眥靜脈叢注射是一種更簡(jiǎn)單,更易掌握,且成功率高的小鼠靜脈注射方法，值得推廣。

表1 小鼠內(nèi)眥靜脈叢注射組與尾靜脈注射組所用時(shí)間及成功率

參考文獻(xiàn)：

[1] 王紅梅,馬玲,吳少單,等.比較兩種墨汁注射途徑對(duì)免疫低下小鼠廓清實(shí)驗(yàn)的影響[J].中國(guó)食品衛(wèi)生雜志,2003,15:314-316.

[2] 秦光和,景簫,王偉,等. 墨汁的注入途徑不同對(duì)小鼠碳廓清實(shí)驗(yàn)的影響[J].毒理學(xué)雜志,2007(21)2: 77-78.

[3] 中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部.保健食品檢驗(yàn)和評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范,2003，2,28，29.