微小RNAs與αβT細(xì)胞發(fā)育和功能的研究進(jìn)展

熊思東,胡 燕

(1.蘇州大學(xué) IBMS研究院，江蘇 蘇州 215006；2.復(fù)旦大學(xué) 免疫生物學(xué)研究所，上海 200032)

微小RNA(MicroRNAs，miRNAs)是近年來發(fā)現(xiàn)的一類由內(nèi)源基因編碼的參與基因轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控的長(zhǎng)19～22個(gè)核苷酸的非編碼蛋白質(zhì)的單鏈RNA，其在胚胎發(fā)育、細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞死亡和糖脂代謝等一系列生物學(xué)過程中發(fā)揮了重要的調(diào)控作用。新近的研究顯示，miRNAs通過對(duì)其靶分子表達(dá)的調(diào)節(jié)不僅與造血過程密切相關(guān)，且在機(jī)體免疫細(xì)胞發(fā)育和免疫應(yīng)答過程中發(fā)揮了關(guān)鍵調(diào)控作用，如，新近Agudo等[1]報(bào)道m(xù)iR-126可通過血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體2(Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 2，VEGFR2)軸調(diào)控漿細(xì)胞樣樹突狀細(xì)胞(plasmacytoid dendritic cells，pDCs)的功能，參與病毒等微生物引發(fā)的固有免疫應(yīng)答。由于αβT淋巴細(xì)胞發(fā)育的特殊性和功能亞群的高度復(fù)雜性，以及其在相關(guān)臨床疾病發(fā)生中的重要作用，miRNAs分子在其發(fā)育、活化、分化以及衰老等生物學(xué)過程中的作用得到了極大關(guān)注。這些研究進(jìn)展不僅對(duì)于人們深入認(rèn)識(shí)機(jī)體免疫系統(tǒng)的發(fā)育過程，而且對(duì)于免疫應(yīng)答的精細(xì)調(diào)控機(jī)制和后續(xù)臨床相關(guān)疾病的治療均具有重要意義。本文旨就miRNAs與αβT細(xì)胞的相關(guān)研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1 miRNAs與αβT細(xì)胞胸腺發(fā)育

成熟T細(xì)胞由其前體細(xì)胞從骨髓遷移至胸腺中經(jīng)歷增殖、TCR重排，最后分化成熟。在胸腺中，前體T細(xì)胞經(jīng)歷陰性選擇，陽性選擇，最終分化成 CD4或CD8單陽性T細(xì)胞，該發(fā)育過程受到復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)精細(xì)調(diào)控。miRNAs動(dòng)態(tài)調(diào)節(jié)T細(xì)胞發(fā)育的過程早在2005年就有研究報(bào)道。Cobb等[2]在Dicer酶基因敲除小鼠中發(fā)現(xiàn)，敲除Dicer酶后胸腺中T細(xì)胞陽性選擇的比例降低，原因是Dicer酶缺失后，αβT細(xì)胞中miRNAs表達(dá)明顯減少，導(dǎo)致其存活率和數(shù)量的減少，而γδT細(xì)胞不受影響；對(duì)應(yīng)的是在脾臟等外周免疫器官中總CD3+T細(xì)胞也減少，且CD8 和 CD4 單陽性T細(xì)胞數(shù)量均顯著減少，亞群間無明顯差異。這些研究結(jié)果表明，miRNAs的表達(dá)對(duì)于胸腺T細(xì)胞的發(fā)育至關(guān)重要。

進(jìn)一步的研究顯示，多個(gè)miRNAs分子在胸腺T細(xì)胞發(fā)育過程中起了關(guān)鍵作用。如：Li等[3]發(fā)現(xiàn)miR-181a敲除后可顯著損害T細(xì)胞的陰性和陽性選擇。miR-181a在未成熟T細(xì)胞尤其是陽性選擇階段中高表達(dá)，而在已分化的Th1和Th2細(xì)胞中低表達(dá)。機(jī)制上的研究顯示，miR-181a可抑制一系列與T細(xì)胞發(fā)育相關(guān)的基因如TCRα，CD69和BCL-2的表達(dá)來調(diào)控T細(xì)胞信號(hào)和后續(xù)的細(xì)胞增殖與凋亡。如陽性選擇過程中，miR-181a高表達(dá)有利于通過降低TCR信號(hào)傳遞，使得胸腺T細(xì)胞的TCR對(duì)自身MHC分子保持適度親和力，避免過強(qiáng)的TCR-MHC-抗原信號(hào)導(dǎo)致未成熟T細(xì)胞凋亡。此外，Xiao等[4]還報(bào)道m(xù)iR-150也在胸腺T細(xì)胞發(fā)育中發(fā)揮重要作用。在miR-150轉(zhuǎn)基因小鼠中，miR-150過表達(dá)可導(dǎo)致胸腺T細(xì)胞發(fā)育障礙。機(jī)制上的研究顯示，miR-150過表達(dá)后可導(dǎo)致未成熟T細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄因子C-Myb的下調(diào)。除C-Myb外，miR-150還可靶向調(diào)控T細(xì)胞分化的重要因子Notch3[5]，導(dǎo)致T細(xì)胞增殖和存活率減少?？傊?，這些研究提示，以miR-181a和miR-150為代表的miRNAs家族分子在T細(xì)胞的發(fā)育過程中發(fā)揮了重要的調(diào)控作用。

2 miRNAs與αβT細(xì)胞活化

T細(xì)胞活化過程中TCR信號(hào)可以誘導(dǎo)特定miRNAs表達(dá)的改變(上調(diào)/下調(diào))，而表達(dá)水平改變的miRNAs可通過反饋?zhàn)饔脕碚{(diào)節(jié)T細(xì)胞的活化過程。如，Dudda[6]等發(fā)現(xiàn)，在T細(xì)胞活化過程中TCR信號(hào)可誘導(dǎo)miR-155和miR-31等分子的表達(dá)顯著增加。高水平的miR-155通過直接靶向調(diào)控細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制蛋白1(Suppressor of cytokine signaling1，SOCS1)來進(jìn)一步促進(jìn)T細(xì)胞的增殖；而miR-31則通過抑制Ras-2激酶抑制物(Kinase suppressor of ras2，KSR2)的表達(dá)，促進(jìn)活化T細(xì)胞IL-2的表達(dá)，從而調(diào)控T細(xì)胞活化和增殖過程[7]。在負(fù)性調(diào)控方面，Xue[8]等發(fā)現(xiàn)未活化的成熟T細(xì)胞高表達(dá)miR-181c，其在TCR信號(hào)作用下表達(dá)水平明顯降低。然而，過表達(dá)miR-181c則導(dǎo)致T細(xì)胞的活化和增殖明顯減弱。機(jī)制方面的研究顯示，miR-181c可作用于IL-2 mRNA的3’-UTR區(qū)，調(diào)節(jié)IL-2的表達(dá)，提示miR-181c是T細(xì)胞活化的重要負(fù)反饋調(diào)控分子[8]。

此外，有些miRNAs分子在T細(xì)胞活化過程中還扮演了多重作用的角色，如miR-146a和miR-17～92基因簇。Curtale等[9]報(bào)道m(xù)iR-146a分子一方面通過調(diào)控NF-kB信號(hào)換能器TRAF6和IRAK1，形成負(fù)性反饋通路，調(diào)控TCR誘導(dǎo)的NF-kB信號(hào)通路，避免T細(xì)胞過度活化；另一方面，miR-146a還可靶向調(diào)控FADD，抑制T細(xì)胞活化過程中導(dǎo)致的凋亡。類似地，Wu等[10]發(fā)現(xiàn)在T細(xì)胞活化過程中，miR-17～92基因簇也受到TCR信號(hào)誘導(dǎo)高表達(dá)，其不僅可通過靶向第10號(hào)染色體缺失的磷酸酶及張力蛋白同源的基因(Phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten，PTEN)促進(jìn)活化T細(xì)胞的細(xì)胞周期進(jìn)程，同時(shí)還可以導(dǎo)致mTOR信號(hào)增強(qiáng)，介導(dǎo)活化T細(xì)胞的終末分化偏移。總之，這些研究提示了miRNAs分子在αβT細(xì)胞活化中的重要調(diào)控作用及機(jī)制的復(fù)雜性。

3 miRNAs 與αβT細(xì)胞功能亞群

初始CD4+T 細(xì)胞發(fā)育成熟和活化后，依賴于細(xì)胞微環(huán)境的變化，最終分化為不同的T細(xì)胞亞群，執(zhí)行其相應(yīng)的效應(yīng)功能。新近大量研究顯示，miRNAs可動(dòng)態(tài)調(diào)節(jié)T細(xì)胞亞群的分化過程(見圖1)，這顯示了機(jī)體免疫應(yīng)答過程調(diào)控機(jī)制的精細(xì)性，對(duì)于人們深入認(rèn)識(shí)免疫應(yīng)答機(jī)制具有重要意義。

3.1 CD4+T細(xì)胞

3.1.1 Th1和Th2細(xì)胞 在相應(yīng)抗原和細(xì)胞因子的共同刺激下，初始CD4+T細(xì)胞在免疫應(yīng)答的初始相可分化成Th1細(xì)胞和Th2細(xì)胞。Th1細(xì)胞分泌IFN-γ而Th2細(xì)胞分泌IL-4。早在2005年，Muljo等[11]就發(fā)現(xiàn)，敲除Dicer 酶后，外周CD4+T細(xì)胞數(shù)量急劇減少，表現(xiàn)出Th1細(xì)胞和Th2細(xì)胞分化障礙，尤其抑制IFN-γ的表達(dá)后，Th1型免疫應(yīng)答能力顯著受損。

后續(xù)大量研究顯示，眾多miRNAs 分子參與了Th1和Th2細(xì)胞的分化過程。例如，Rossi 等[12]報(bào)道，miR-125b在初始CD4+T細(xì)胞活化后上調(diào)表達(dá)，其通過調(diào)節(jié)IFN-γ，IL10RA，IL2RB 和Blimp1的表達(dá)來調(diào)控CD4+T細(xì)胞的分化；Jiang等[13]則報(bào)道m(xù)iR-17-92基因簇可促進(jìn)Th1細(xì)胞的分化，如，miR-17和miR-19b可分別通過調(diào)控靶分子PTEN、TGFβRII和環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白(cAMP responsive element binding protein-1, CREB1)的表達(dá)，促進(jìn)Th1細(xì)胞分化，并抑制初始CD4+T細(xì)胞分化成Tregs。此外，活化的CD4+T細(xì)胞中miR-155過表達(dá)可通過調(diào)控干擾素-γ受體1(Interferon receptor I，IFNGR1)表達(dá)來促進(jìn)Th1細(xì)胞的分化；相反，miR-155缺陷的CD4+T細(xì)胞則傾向于分化成Th2細(xì)胞[13]。另外，miR-155還可調(diào)控Th2型細(xì)胞因子IL-4的反式作用因子c-Maf的表達(dá)來抑制Th2細(xì)胞分化[14]。相反的，有些miRNAs分子則可抑制Th1細(xì)胞的分化。Steiner等[15]發(fā)現(xiàn)，給miRNAs缺陷的CD4+T細(xì)胞(異常高表達(dá)IFN-γ)導(dǎo)入高水平的miR-29模擬物后，其可調(diào)控轉(zhuǎn)錄因子T-bet 和Eomes的表達(dá)，導(dǎo)致缺陷的CD4+T細(xì)胞中異常表達(dá)的IFN-γ水平降低，抑制了Th1細(xì)胞的分化。更重要的是，miR-29還可直接調(diào)控IFN-γ表達(dá)，且IFN-γ也可反過來影響miR-29b的表達(dá)，從而形成負(fù)性反饋通路。

3.1.2 Th17細(xì)胞 近年來有研究報(bào)道m(xù)iRNAs分子也與Th17細(xì)胞的分化密切相關(guān)，然而相關(guān)研究有待深入。如，miR-155缺陷小鼠Th17細(xì)胞的數(shù)量顯著下降[16]，提示miR-155參與了Th17細(xì)胞的分化。此外，還有研究報(bào)道m(xù)iR-301高表達(dá)可促進(jìn)Th17細(xì)胞的分化，相反地，抑制miR-301后，IL-6/23誘導(dǎo)的STAT3信號(hào)通路下調(diào)，Th17細(xì)胞的分化受損。機(jī)制上的研究顯示，miR-301可作用于STAT3蛋白抑制分子(Protein inhibitor of activated STAT3,PIAS3)來調(diào)控Th17細(xì)胞的分化[17]。

另外，Nakahama 等[18]報(bào)道，miR-132/212可通過對(duì)芳香烴受體(Aryl hydrocarbon，ARH)的作用促進(jìn)Th17細(xì)胞的分化，而抑制miR-132/212后，Th17細(xì)胞分化的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子Bcl-6水平顯著降低，導(dǎo)致其分化削弱。此外，miR-17-92基因簇的2個(gè)重要成員，miR-19b和miR-17也與Th17細(xì)胞的分化密切相關(guān)[19]。miR-19可調(diào)控PTEN導(dǎo)致PI3K信號(hào)增強(qiáng)，而miR-17則抑制鋅指轉(zhuǎn)錄因子IKZF4的表達(dá)共同促進(jìn)Th17細(xì)胞的分化。

3.1.3 Tregs 有研究報(bào)道Dicer酶敲除小鼠可自發(fā)系統(tǒng)性免疫性疾病，與Foxp3敲除小鼠類似，提示了miRNAs分子在Tregs發(fā)育和功能維持中具有重要調(diào)控作用[20]。此外，利用Dicer酶敲除小鼠的CD4+T細(xì)胞誘導(dǎo)Foxp3表達(dá)過程中，研究者發(fā)現(xiàn)miRNAs的表達(dá)對(duì)于Tregs的誘導(dǎo)也至關(guān)重要[21]?，F(xiàn)已知Tregs表達(dá)與普通T細(xì)胞不同的miRNAs譜，尤其miR-146a和miR-21等miRNAs分子在Tregs中始終如一的高表達(dá)[20]。

后續(xù)研究顯示，眾多miRNAs分子如miR-155和miR-17～92基因簇等均參與了Foxp3誘導(dǎo)表達(dá)，調(diào)控了Tregs的發(fā)育和誘導(dǎo)。如，miR-155敲除小鼠Tregs數(shù)量顯著減少，而抑制功能并無減弱。機(jī)制上的研究顯示，Tregs數(shù)量的減少與miR-155靶基因SOCS1的缺乏導(dǎo)致IL-2信號(hào)通道敏感性降低有關(guān)[21]。miR-17～92基因簇表達(dá)水平在Tregs的Foxp3誘導(dǎo)表達(dá)過程中明顯增加，原因是miR-17～92缺失可導(dǎo)致Tregs的增殖削弱，且Tregs的凋亡明顯增加，最終使得Tregs數(shù)量減少，而高水平的miR-17～92則有利于Tregs的誘導(dǎo)[21]。與miR-155和miR-17～92相反，miR-146a缺陷卻促進(jìn)Tregs的數(shù)量增加[20]。然而miR-146a缺陷體內(nèi)試驗(yàn)顯示，在miR-146a充足環(huán)境中，Tregs的抑制能力明顯降低，導(dǎo)致嚴(yán)重的免疫病理損傷。該現(xiàn)象與miR-146a調(diào)節(jié)STAT1表達(dá)有關(guān)，提示miR-146a對(duì)Tregs的發(fā)育和功能存在不同調(diào)節(jié)作用。此外，我們課題組新近也發(fā)現(xiàn)，miR-126可通過對(duì)PIK3R2表達(dá)的調(diào)控，影響Akt/mTOR信號(hào)傳遞，參與了Tregs的外周誘導(dǎo)過程，且高水平的miR-126對(duì)于Tregs的抑制功能維持具有重要作用[26]。

最后，Tregs功能維持中，其Foxp3的穩(wěn)定表達(dá)與miRNAs之間存在復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)調(diào)控機(jī)制。一方面Tregs中Foxp3分子可通過調(diào)節(jié)特定miRNAs分子的表達(dá)，維持其抑制功能。如，F(xiàn)oxp3分子可負(fù)性調(diào)節(jié)Tregs中miR-142-3p的表達(dá)，機(jī)制是Tregs中miR-142-3p的低表達(dá)可保障其靶分子腺苷酸環(huán)化酶9(Adenylyl Cyclase-9，AC-9)的高水平，進(jìn)而維持cAMP的細(xì)胞內(nèi)高水平，維持Tregs的抑制功能[23]。另一方面，一些miRNAs可直接調(diào)控Foxp3的表達(dá)，例如，miR-24, miR-210和miR-31可直接與Foxp3 mRNA的3端非翻譯區(qū)結(jié)合，進(jìn)而調(diào)控Foxp3的表達(dá)，影響Tregs的功能[24]。這些研究顯示了Tregs功能維持與miRNAs的復(fù)雜調(diào)控相關(guān)。

3.1.4 Tfh 細(xì)胞 Tfh細(xì)胞由Th細(xì)胞遷移至淋巴濾泡分化而成，表型為CD4+CXCR5+BCL6+PD1+，與生發(fā)中心形成和B細(xì)胞成熟密切相關(guān)[25]。迄今為止，關(guān)于miRNAs與Tfh細(xì)胞的發(fā)育和功能的研究仍待深入。新近，Baumjohann等[25]報(bào)道，miR-17～92基因簇是Tfh細(xì)胞分化的重要調(diào)節(jié)器。敲除miR-17～92基因簇后，當(dāng)抗原免疫或病毒感染時(shí)，Tfh細(xì)胞和生發(fā)中心B細(xì)胞數(shù)量明顯減少；相反地，miR-17～92基因簇表達(dá)增加后，Tfh細(xì)胞和生發(fā)中心B細(xì)胞數(shù)量也相應(yīng)增加。機(jī)制上的研究顯示，miR-17～92基因簇可通過對(duì)Pten、核受體 RORα 和磷酸酶 PHLPP2的作用來調(diào)控Tfh細(xì)胞的分化。此外，Takahashi等[26]報(bào)道抑制miR-10a表達(dá)可增強(qiáng)iTregs分化成Tfh細(xì)胞；而miR-10a過表達(dá)則該過程受到顯著抑制，提示miR-10a也參與了Tfh細(xì)胞分化過程。最后，也有個(gè)別研究者報(bào)道有些miRNAs可調(diào)控Tfh細(xì)胞分化和功能維持的關(guān)鍵因子的表達(dá)，如PD-1和CXCR5，然而其具體機(jī)制和作用仍待闡明。

miR-17～92 cluster and miR-155 could promote Th1 cells differentiation. Conversely, miR-29 could promote the Th2 development and restrain the differentiation of Th1 cells; Relative high miR-132/212, miR-301 and miR-155 expression levels have been shown to promote Th17 cells differentiation; miR-155, miR-17～92 cluster and miR-146a expression were involved in Tregs development; Deletion of miR-17～92 cluster in CD4+ T cells resulted in decreased numbers of Tfh cells, but miR-10a could negatively regulate Tfh cells differentiation.圖1 微小PNA調(diào)控了CD4+T細(xì)胞的發(fā)育分化

3.2 CD8+T細(xì)胞 最近的研究顯示miRNAs分子與CD8+T細(xì)胞的發(fā)育和功能密切相關(guān)[27]。Zhang等[28]報(bào)道，在CD8+T細(xì)胞陽性選擇階段敲除Dicer酶會(huì)導(dǎo)致CD8+T細(xì)胞的大量缺乏，且CD69表達(dá)增加，淋巴結(jié)T細(xì)胞記憶延長(zhǎng)。他們進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)，在CD8+T細(xì)胞活化過程中，CD69表達(dá)增加與miR-130/301的表達(dá)顯著上調(diào)有關(guān)，提示了miRNAs在CD8+T細(xì)胞發(fā)育中的重要作用。

為了研究miRNAs在CD8+T細(xì)胞功能中的作用，Wu等[29]檢測(cè)了抗原刺激后CD8+T細(xì)胞亞群快速活化增殖過程中miRNAs的表達(dá)譜型，結(jié)果發(fā)現(xiàn)miR-17～92基因簇顯著上調(diào)，而在CD8+T細(xì)胞分化成效應(yīng)T細(xì)胞過程中，miR-17～92家族分子則顯著下調(diào)。深入研究顯示，miR-17～92基因簇分子在CD8+T細(xì)胞的增殖和分化過程中發(fā)揮了不同的作用。在抗病毒感染過程中，敲除miR-17～92基因簇可導(dǎo)致CD8+T細(xì)胞活化和增殖功能明顯受損；而miR-17～92的過表達(dá)則明顯抑制記憶性CD8+T細(xì)胞的分化。機(jī)制上的研究顯示，miR-17～92可通過對(duì)PTEN表達(dá)的調(diào)控來影響PI3K-Akt-mTOR信號(hào)的傳遞[30]。現(xiàn)已知mTOR信號(hào)有助于記憶性細(xì)胞的產(chǎn)生，而miR-17～92過表達(dá)可下調(diào)mTOR 信號(hào)，從而抑制了記憶性CD8+T細(xì)胞的產(chǎn)生[31]。而對(duì)于CD8+T細(xì)胞活化過程中miR-17～92的高表達(dá)，推測(cè)可能與負(fù)反饋調(diào)控PI3K-Akt-mTOR信號(hào)，避免其過度活化有關(guān)。

與miR-17～92相似，miR-155在初始CD8+T細(xì)胞的活化過程中也表達(dá)上調(diào)[32]。與初始CD8+T 細(xì)胞和中樞記憶性CD8+T細(xì)胞相比，miR-155在效應(yīng)性記憶性CD8+T 細(xì)胞的表達(dá)更高。miR-155缺陷可導(dǎo)致CD8+T細(xì)胞抗病毒能力受損，而miR-155過表達(dá)則增強(qiáng)抗病毒應(yīng)答。深入研究顯示，抑制STAT1、IRF7和Ⅰ型干擾素信號(hào)相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)可部分代償因miR-155缺陷引發(fā)的CD8+T細(xì)胞抗病毒能力受損狀況。有意義的是，過表達(dá)miR-155的靶基因SOCS1可導(dǎo)致CD8+T細(xì)胞抗病毒能力削弱，這與miR-155缺陷時(shí)的狀況一致。然而，在miR-155缺陷的CD8+T細(xì)胞中抑制SOCS1的表達(dá)，受損的CD8+T細(xì)胞抗病毒能力并不能有效恢復(fù)，提示miR-155調(diào)控CD8+T細(xì)胞功能的效應(yīng)可能是通過前述的SOCS1下游靶分子來實(shí)現(xiàn)的。

4 miRNAs與αβT細(xì)胞衰老

目前，關(guān)于免疫衰老和αβT細(xì)胞老化的概念還只處在起步階段，特別是T細(xì)胞衰老和相關(guān)功能改變的機(jī)制還不明確。新近有一些研究提示miRNAs可能參與其中，如miR-17～92基因簇分子可調(diào)控細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡。與年輕的CD8+CD28+T細(xì)胞相比，miR-17～92基因簇在衰老的CD8+CD28+T細(xì)胞中明顯下調(diào)，且miR-17～92基因簇的表達(dá)量與p21蛋白的水平成負(fù)相關(guān)[33]。另外，miR-181a的下調(diào)表達(dá)也與CD4+T細(xì)胞的衰老相關(guān)，該過程涉及到TCR信號(hào)的閾值。機(jī)制上，衰老的CD4+T細(xì)胞中，miR-181a下調(diào)后，其靶分子雙特異性蛋白磷酸酶6(Dual specificity phosphatase 6，DUSP6)表達(dá)增加，進(jìn)而削弱了CD4+T細(xì)胞對(duì)TCR信號(hào)的敏感性。因此，DUSP6被認(rèn)為是早期修復(fù)T細(xì)胞應(yīng)答和優(yōu)化疫苗效果的潛在靶標(biāo)。

此外，miR-23～27 在CD8+CD28-T細(xì)胞中過表達(dá)，其可靶向DNA損傷修復(fù)信號(hào)通道(DNA damage repair，DDR) 的多重分子[34]。Scarpaci等[46]報(bào)道DDR信號(hào)通道的活性下調(diào)與細(xì)胞間的敏感性和T細(xì)胞分化密切相關(guān)。尤其是表達(dá)下調(diào)的組蛋白H2AX，已證實(shí)為miR-24調(diào)控CD8+CD28-T細(xì)胞老化的靶分子之一。與之對(duì)應(yīng)的是，實(shí)驗(yàn)性誘導(dǎo)的DNA損害也可導(dǎo)致CD8+CD28-T細(xì)胞中H2AX的下調(diào)表達(dá)和活化DDR應(yīng)答的減弱[35]。然而，miR-24調(diào)控DDR信號(hào)通道與CD8+CD28-T細(xì)胞凋亡的關(guān)系并不清楚，推測(cè)可能與CD28+和CD28-細(xì)胞中IL-15的差異表達(dá)相關(guān)。

5 miRNAs與αβT細(xì)胞相關(guān)臨床疾病

如上所述，miRNAs在αβT淋巴細(xì)胞的活化、分化和功能中發(fā)揮了重要的調(diào)控作用，從而參與了相關(guān)臨床疾病的發(fā)生發(fā)展過程?；诖?，特定的miRNAs也逐漸發(fā)展為包括炎癥、腫瘤和自身免疫病等臨床疾病治療的重要潛在靶標(biāo)。如，利用miR-222和 miR-339來下調(diào)腫瘤細(xì)胞黏附分子(Intercellular adhesion molecule，ICAM-1)的表達(dá)，從而提高腫瘤細(xì)胞對(duì)CTL介導(dǎo)的溶細(xì)胞效應(yīng)的敏感性[36]；利用miR-29調(diào)控與T細(xì)胞功能相關(guān)的免疫抑制分子B7-H3的表達(dá)，從而增強(qiáng)T細(xì)胞的功能，進(jìn)而抑制腫瘤的生長(zhǎng)[37]。此外，Zhao等[38]發(fā)現(xiàn)，miR-126在SLE患者CD4+T細(xì)胞中高表達(dá)，其可通過調(diào)控Dnmt1調(diào)節(jié)DNA的甲基化，與SLE的發(fā)病密切相關(guān)，可作為臨床SLE治療的重要潛在靶標(biāo)[38]；值得一提的是，新近我們課題組還發(fā)現(xiàn)，利用反義核酸技術(shù)(Antisense Oligonucleotides，ASO)下調(diào)miR-155的表達(dá)，可明顯促進(jìn)LPS誘導(dǎo)急性肺損傷的恢復(fù)，機(jī)制與M2型巨噬細(xì)胞促進(jìn)的Tregs增殖有關(guān)[39]?？傊?，這些研究顯示了基于miRNAs分子的臨床疾病治療應(yīng)用前景。因此，深入探討miRNAs分子與αβT淋巴細(xì)胞的關(guān)系及機(jī)制對(duì)于相關(guān)臨床疾病的診治新靶標(biāo)開發(fā)具有重要意義。

6 展望

大量研究表明，miRNAs與αβT細(xì)胞活化、分化、衰老和功能維持密切相關(guān)，參與了免疫應(yīng)答過程。雖然相關(guān)研究取得了重要進(jìn)展，但仍有許多重要的科學(xué)問題尚需解答：如，miRNAs如何影響T細(xì)胞的衰老過程；不同表達(dá)量的miRNAs對(duì)T細(xì)胞不同階段的影響；miRNAs家族龐大，它們是如何形成復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)調(diào)控，且有序、精準(zhǔn)地調(diào)控T細(xì)胞的功能。因此，后續(xù)深入探討miRNAs分子在αβT細(xì)胞發(fā)育和功能中的作用和機(jī)制，不僅有助于拓展我們對(duì)免疫應(yīng)答和T細(xì)胞亞群分化的認(rèn)識(shí)，而且對(duì)于深入探討相關(guān)臨床疾病的發(fā)生機(jī)制和靶向治療新策略開發(fā)具有重要科學(xué)價(jià)值和潛在應(yīng)用意義。

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