聯苯肼酯對柑橘全爪螨的毒力測定及田間防效

徐 淑, 陳凱歌, 余 瑤, 陳耿民, 陳炳旭

(廣東省農業(yè)科學院植物保護研究所，廣東省植物保護新技術重點實驗室,廣州 510640)

聯苯肼酯對柑橘全爪螨的毒力測定及田間防效

徐 淑, 陳凱歌, 余 瑤, 陳耿民, 陳炳旭*

(廣東省農業(yè)科學院植物保護研究所，廣東省植物保護新技術重點實驗室,廣州 510640)

用Potter噴霧法測定了聯苯肼酯對柑橘全爪螨的室內毒力,并通過田間藥效試驗評價了聯苯肼酯對柑橘全爪螨的防治效果。結果表明,聯苯肼酯對柑橘全爪螨的LC50為95.37 mg/L、對照藥劑噠螨靈的LC50為228.09 mg/L,聯苯肼酯的毒力為噠螨靈的2.39倍。2011-2012年田間藥效試驗表明,藥后1 d,43%聯苯肼酯懸浮劑165、195、239 mg/kg處理的防效為50%～60%,明顯低于15%噠螨靈乳油75 mg/kg處理的防效；藥后3 d,43%聯苯肼酯懸浮劑239 mg/kg處理的防效達到75%以上,與15%噠螨靈乳油的防效相當；藥后15 d,195、239 mg/kg處理的防效為88.63%～91.23%,顯著高于15%噠螨靈乳油的防效。本試驗表明,43%聯苯肼酯懸浮劑對柑橘全爪螨的速效性較差,但持效期長,藥效可持續(xù)15 d,是防治柑橘全爪螨的較好藥劑之一。

聯苯肼酯； 柑橘紅蜘蛛； 毒力； 田間防效

柑橘是世界上較大宗的水果作物之一,同時也是世界第五大國際貿易農產品[1],至2007年中國柑橘的種植面積已達191萬hm2,產量為2 059萬t,均居世界第一。柑橘全爪螨 (PanonychuscitriMc Gregor) 舊稱柑橘紅蜘蛛,屬蛛形綱蜱螨目葉螨科,是柑橘生產中最主要的害蟲之一,其發(fā)生代數多,具有明顯的趨嫩性,可吸食柑橘葉片、嫩梢、花蕾和果實汁液等[2],其中以嫩葉受害最嚴重。柑橘全爪螨主要集中在葉背刺吸汁液,造成葉片失綠,嚴重時可導致整株葉片發(fā)白,影響光合作用,甚至脫落,造成嚴重的減產[1, 3-4]。

目前對柑橘全爪螨的防治仍然主要依靠化學防治,由于化學農藥的長期使用導致柑橘全爪螨的抗藥性日益加劇,因此需要不斷地尋求新的藥劑來防治柑橘全爪螨。聯苯肼酯(bifenazate)是美國科聚亞公司2009年在我國正式獲得登記的殺螨劑,浙江省上虞市銀邦化工有限公司在2011年獲得其原藥產品的登記。聯苯肼酯是一種新型的選擇性葉面噴霧用殺螨劑,非內吸性,對螨類的各個生活階段均有效,具有殺卵活性和對成螨的迅速擊倒活性[5]。其作用機理尚不明確,最初被認為是一類神經毒劑,作用于突觸后GABA受體[6],后有研究表明聯苯肼酯作用于螨類線粒體,抑制細胞色素bQo位點復合物Ⅲ的合成[7-8],還有學者認為聯苯肼酯對GABA門控的氯離子通道具有增效作用[9]。聯苯肼酯毒性低,持效期長,對環(huán)境友好,與現有商業(yè)化的殺螨劑無交互抗性,對植食性螨均有效,而對寄生蜂、捕食螨、草蛉等風險低,非常適合于害蟲的綜合治理。目前,聯苯肼酯在國內登記作物和防治對象為蘋果樹葉螨,在其他作物上還沒有登記過。有關聯苯肼酯對葉螨作用的研究,國外主要報道了對二斑葉螨(TetranychusurticaeKoch)作用機理及遺傳抗性方面的相關研究[7,9-10],國內僅報道了其對草莓葉螨、蔬菜葉螨的防治效果[11-14],而對柑橘全爪螨的毒力及殺蟲效果目前國內外都未見相關報道,本文通過室內毒力測定,明確了聯苯肼酯對柑橘全爪螨的LC50,然后進一步開展田間試驗,評價該藥劑對柑橘全爪螨的田間應用效果,為其進一步推廣使用提供依據。

1 材料與方法

1.1 供試蟲源

柑橘全爪螨采集于廣東省農業(yè)科學院鐘落潭白云基地的柑橘園。選擇個體大小一致、健康活潑、體色鮮紅的雌成螨個體供試。

1.2 供試藥劑

室內毒力測定：97%聯苯肼酯(bifenazate)原藥(美國科聚亞公司)；對照藥劑95%噠螨靈(pyridaben)原藥(江蘇揚農化工集團有限公司)。

田間藥效試驗：43%聯苯肼酯懸浮劑(陜西韋爾奇作物保護有限公司)；對照藥劑15%噠螨靈乳油(山東省聯合農藥工業(yè)有限公司)。

1.3 試驗方法

1.3.1 室內毒力測定

采用Potter噴霧法[15-16]進行毒力測定。根據預試結果,將聯苯肼酯和噠螨靈分別用乙酸乙酯和丙酮配制成5個質量濃度梯度備用。將濕海綿放入直徑9 cm的培養(yǎng)皿中,在培養(yǎng)皿中加入自來水,液面略低于海綿高度。將大小一致的平整柑橘葉片洗凈擦干,用濕潤的小棉條圍在葉片周圍以防成螨逃走,然后葉正面朝下貼放在海綿上,每張葉片接個體大小一致的柑橘全爪螨雌成螨30頭,放置4 h后在雙目鏡下剔除死亡或不活潑個體,保留20頭健康、活潑的雌成螨。將各處理培養(yǎng)皿放在Potter噴霧塔受藥平臺中心進行噴霧,用藥量1 mL,沉降1 min,然后置溫度(25±1) ℃,相對濕度75%,光照為16 h的保溫室中飼養(yǎng)。每處理3次重復,以清水處理為空白對照。處理48 h后,在雙目解剖鏡下檢查雌成螨的死亡情況,計算各處理死亡率(用0號毛筆尖輕輕觸動螨體,螨足不動者視為死亡)。利用DPS數據處理軟件求毒力回歸方程(y=a+bx)、LC50、LC95及其95%置信區(qū)間。

1.3.2 田間藥效試驗

1.3.2.1試驗田概況

2011年田間試驗在廣東省農業(yè)科學院鐘落潭白云基地的柑橘園進行。果園地勢較平坦,柑橘品種為‘砂糖橘’,樹齡2年,行距4 m,株距2 m,株高約1.2 m,肥水管理良好,樹勢生長旺盛。施藥時間為2011年11月29日,噴藥當天天氣晴,微風,氣溫16～27 ℃,相對濕度46%～97%。

2012年田間試驗在廣東從化江浦街菠蘿山柑橘園進行。果園為丘陵地,柑橘品種為‘砂糖橘’,樹齡2年,行距2.5 m,株距2 m,株高約1.2 m,肥水管理良好,樹勢生長旺盛。施藥時間為2012年8月20日,噴藥當天天氣多云,微風,氣溫25～34 ℃,相對濕度55%～97%。

1.3.2.2試驗設計

田間藥效試驗設計參照《農藥田間藥效試驗準則》進行[17]。具體如下：試驗藥劑43%聯苯肼酯懸浮劑165、195、239 mg/kg,對照藥劑15%噠螨靈乳油75 mg/kg,以清水為空白對照,每處理4次重復,隨機排列,每小區(qū)2株柑橘樹,并設保護行。

試驗選用江南3WBD-18E背負式電動噴霧器對‘砂糖橘’進行全株噴藥,將藥液均勻噴于葉片正反兩面,以噴濕葉片至藥液不滴落為宜?？瞻讓φ諈^(qū)噴等量清水。

防效調查及計算方法：采用定點調查方法,各小區(qū)調查2株柑橘樹,每株按東、西、南、北、中5個方位標記嫩梢,掛牌標記,共調查25片葉片上的活動螨數量。施藥前調查螨口基數,施藥后分別于1、3、10、15 d調查殘存活螨數量。每次調查蟲害時觀察施用聯苯肼酯對柑橘葉片、花和果等的影響,評價其對柑橘的安全性；同時觀察試驗區(qū)內蜜蜂等生物對該藥劑的反應,記錄反應狀態(tài)和程度。

按下列公式計算各處理區(qū)螨口減退率及防治效果,并對試驗結果用DMRT法進行統(tǒng)計分析。

螨口減退率(%)=

防治效果(%)=

2 結果與分析

2.1 室內毒力測定結果

聯苯肼酯對柑橘全爪螨的毒力測定結果見表1。處理48 h后,聯苯肼酯和噠螨靈的毒力回歸方程分別為y=0.533 2+2.256 6x和y=0.968 1+1.709 8x(x為濃度對數,y為校正死亡率幾率值),聯苯肼酯和噠螨靈對柑橘全爪螨的LC50分別為95.37、228.09 mg/L,聯苯肼酯的毒力指數為2.39,毒力為噠螨靈的2.39倍。

表1聯苯肼酯對柑橘全爪螨的室內毒力測定結果1)

Table1ToxicityofbifenazateagainstPanonychuscitri

藥劑Insecticide毒力回歸方程(y=)Regressionequation相關系數(r)CorrelationcoefficientLC50(95%置信區(qū)間)/mg·L-1LC50(95%confidencelimit)LC95(95%置信區(qū)間)/mg·L-1LC95(95%confidencelimit)毒力指數Toxicityratio97%聯苯肼酯TC97%BifenazateTC0．5332+2．2566x0．969095．37(74．27～122．47)510．92(397．88～656．07)2．3997%噠螨靈TC97%PyridabenTC0．9681+1．7098x0．8983228．09(76．41～680．84)2089．95(700．17～6238．40)1．00

1) 毒力指數=供試藥劑的LC50值/噠螨靈的LC50值。
Toxicity ratio means LC50of tested insecticide / LC50of pyridaben.

2.2 田間藥效試驗結果

2011年聯苯肼酯防治柑橘全爪螨試驗結果(表2)表明,藥后1 d,43%聯苯肼酯懸浮劑165、195、239 mg/kg濃度處理的防效分別為53.34%、53.21%、59.31%,均顯著低于對照藥劑15%噠螨靈乳油75 mg/kg濃度處理(防效為72.03%),43%聯苯肼酯懸浮劑的速效性相對較差。藥后3 d,43%聯苯肼酯懸浮劑的防效上升,且隨著濃度的增加防效逐漸升高,分別為69.56%、72.50%、78.79%；其中239 mg/kg濃度處理的防效與對照藥劑15%噠螨靈乳油(防效為79.71%)相當,而165、195 mg/kg濃度處理的防效則顯著低于對照藥劑處理。藥后10 d,43%聯苯肼酯懸浮劑各處理的防效達到83.23%～89.30%,其中195、239 mg/kg濃度處理的防效與對照藥劑15%噠螨靈乳油(防效為88.20%)相當。藥后15 d,43%聯苯肼酯懸浮劑各濃度處理的防效持續(xù)上升,達到87.59%～91.23%,而對照藥劑15%噠螨靈乳油的防效稍有下降；其中165 mg/kg濃度處理的防效與對照藥劑處理相當,而195、239 mg/kg濃度處理的防效則顯著高于對照藥劑處理。

2012年聯苯肼酯防治柑橘全爪螨試驗結果(表2)表明,藥后1 d,43%聯苯肼酯懸浮劑165、195、239 mg/kg濃度處理的防效分別為52.76%、55.71%、60.08%,均顯著低于對照藥劑15%噠螨靈乳油75 mg/kg濃度處理(防效為68.49%)。藥后3 d,43%聯苯肼酯懸浮劑3個濃度處理的防效為67.12%～76.69%,165、195 mg/kg濃度處理的防效顯著低于對照藥劑處理(防效為76.66%),239 mg/kg濃度處理的防效與對照藥劑處理相當。藥后10 d,43%聯苯肼酯懸浮劑3個濃度處理的防效為80.19%～88.48%；165 mg/kg濃度處理的防效顯著低于對照藥劑處理,195 mg/kg濃度處理的防效與對照藥劑處理相當,而239 mg/kg濃度處理的防效則顯著高于對照藥劑處理。藥后15 d,43%聯苯肼酯懸浮劑的防效持續(xù)上升,達到84.17%～90.08%,165mg/kg濃度處理的防效與對照藥劑處理相當,195、239 mg/kg濃度處理的防效顯著高于對照藥劑處理。

兩年的試驗結果表明,43%聯苯肼酯懸浮劑對柑橘全爪螨具有較好的防治效果,速效性相對較差,但持效性較好。其在不同年份、不同地點對柑橘全爪螨的防效基本一致,說明該藥劑的防效穩(wěn)定。

表243%聯苯肼酯懸浮劑對柑橘全爪螨的田間防治效果1)

Table2Controlefficacyof43%bifenazateSCagainstP.citriinfieldtrails

年份Year處理Treatment濃度/mg·kg-1Concentration蟲口基數/頭Numberofspidermitebeforetreatment防效/% Controlefficacy藥后1d1dafterapplication藥后3d3dafterapplication藥后10d10dafterapplication藥后15d15dafterapplication43%聯苯肼酯SC43%BifenazateSC16572753．34c69．56b83．23b87．59b19555053．21c72．50b87．18a90．84a201123965559．31b78．79a89．30a91．23a15%噠螨靈EC15%PyridabenEC7570572．03a79．71a88．20a85．87bCK-508521(殘蟲數)348(殘蟲數)465(殘蟲數)625(殘蟲數)43%聯苯肼酯SC43%BifenazateSC16551252．76d67．12c80．19c84．17b19549455．71c71．39b85．60b88．63a201223948160．08b76．69a88．48a90．08a15%噠螨靈EC15%PyridabenEC7552568．49a76．66a84．62b82．90bCK-576574(殘蟲數)610(殘蟲數)602(殘蟲數)621(殘蟲數)

1) 表中數據均為4次重復的平均值;同列數據后不同字母表示數據經鄧肯氏多重分析比較(DMRT)在0.05水平差異顯著。
Data in the table were the average of four replicates, and data with different letter(s) in the same column were significantly different atP<0.05 by Duncan’s test.

2.3 對柑橘的安全性

藥后1、3、10、15 d目測觀察聯苯肼酯懸浮劑對柑橘葉片和幼果等的影響。各處理區(qū)供試柑橘植株、葉片、果實和花生長正常,均無藥害癥狀產生。可見在本試驗處理濃度范圍內,聯苯肼酯對柑橘較安全,對其生長發(fā)育無不良影響。

2.4 對非靶標生物的影響

藥后1～15 d觀察,43%聯苯肼酯對柑橘園中的蜜蜂、捕食螨等其他動物活動無明顯影響,該藥對非靶標生物表現為安全。

3 結論與討論

室內毒力測定研究表明,聯苯肼酯對柑橘全爪螨具有較好的毒殺活性,其LC50為95.37 mg/L,毒力為對照藥劑噠螨靈的2.39倍。

2011-2012年的田間藥效試驗結果表明,43%聯苯肼酯懸浮劑對柑橘全爪螨藥后1 d的防效為50%～60%,藥后15 d對柑橘全爪螨的防效仍可達到80%以上,能有效控制柑橘全爪螨對柑橘的危害。

在田間試驗過程中,柑橘樹生長正常,葉色濃綠,未觀察到聯苯肼酯對柑橘樹造成藥害癥狀,且聯苯肼酯毒性低、對柑橘園有益生物安全。由此可見,43%聯苯肼酯懸浮劑可推廣應用于防治柑橘全爪螨,建議在柑橘全爪螨發(fā)生早期或種群密度較低時開始施藥防治,用藥濃度為165～239 mg/kg為宜,施藥間隔時間約15 d。

柑橘全爪螨螨體較小、繁殖速度快、發(fā)育歷期短、世代多,極易對藥劑產生抗性,而聯苯肼酯作為新型聯苯肼酯類殺螨劑,對螨類的各個生活階段均有效,與現有的殺螨劑無交互抗性,因此,與現有殺螨劑交替使用,能更經濟有效地防治柑橘全爪螨,延緩柑橘全爪螨抗藥性的產生。在對柑橘全爪螨進行化學防治為主的同時,還要注意加強與其他防治方式相結合,如生物防治、農業(yè)防治等。在田間要加強栽培管理,適度修剪,適時排灌；增強樹勢,提高植株的抗蟲能力；適時適量施肥,減氮增磷鉀；保護和利用天敵,如釋放鈍綏螨、塔六點薊馬等。

[1]鄧崇嶺, 唐艷, 蔣運寧. 殺螨劑的種類及在柑桔上的應用現狀[J]. 廣西園藝, 2006, 17(6):60-62.

[2]呂佩珂, 蘇慧蘭. 中國果樹病蟲原色圖譜, 常綠果樹害蟲[M].第2版. 北京：華夏出版社, 2002:530-531.

[3]陸恒, 陳炳旭, 董易之, 等. 13種殺螨劑對柑桔紅蜘蛛田間防效評價[J]. 廣東農業(yè)科學,2009(9):96-98,107.

[4]林黨恩, 廖世純, 韋橋現. 17種阿維菌素混劑對柑桔紅蜘蛛的田間防治效果[J]. 中國農學通報,2010,26(23):295-298.

[5]王元元, 高寧, 李輝輝, 等. 殺螨劑聯苯肼酯的合成研究[J]. 精細化工中間體, 2011,41(6):8-10.

[6]van Leeuwen T, Vontas J, Tsagkarakou A, et al. Acaricide resistance mechanisms in the two-spotted spider miteTetranychusurticaeand other important Acari:A review[J]. Insect Biochemistry and Molecular Biology, 2010,40(8):563-572.

[7]van Leeuwen T, Tirry L, Nauen R. Complete maternal inheritance of bifenazate resistance inTetranychusurticaeKoch (Acari:Tetranychidae) and its implications in mode of action considerations[J]. Insect Biochemistry and Molecular Biology, 2006,36(11):869-877.

[8]van Nieuwenhuyse P, Demaeght P, Dermauw W, et al. On the mode of action of bifenazate:New evidence for a mitochondrial target site[J]. Pesticide Biochemistry and Physiology, 2012,104(2):88-95.

[9]Hiragaki S, Kobayashi T, Ochiai N, et al. A novel action of highly specific acaricide; bifenazate as a synergist for a GABA-gated chloride channel ofTetranychusurticae(Acari:Tetranychidae)[J]. Neuro Toxicology, 2012, 33(3):307-313.

[10]Dekeyser M A. Acaricide mode of action[J]. Pest Management Science, 2005,61(2):103-110.

[11]何建紅,柯漢云,洪文英,等. 聯苯肼酯等新型殺螨劑對草莓紅蜘蛛的控制作用[J]. 浙江農業(yè)科學,2012(11):1546-1548.

[12]趙帥鋒,邵美紅,柯漢云,等. 幾種藥劑對草莓紅蜘蛛的防效及安全性分析[J]. 浙江農業(yè)科學,2013(1):70-72.

[13]宮亞軍,石寶才,王澤華,等. 新型殺螨劑—聯苯肼酯對二斑葉螨的毒力測定及田間防效[J]. 農藥,2013,52(3):225-227.

[14]張繼俊,赫云建,潘文遠. 聯苯肼酯43%懸浮劑防治溫室蔬菜葉螨田間藥效試驗示范[J]. 農藥科學與管理,2013,34(7)：60-63.

[15]張宗炳.殺蟲藥劑的毒力測定——原理方法應用[M]. 北京:科學出版社,1998:1-87.

[16]陳年春. 農藥生物測定技術[M]. 北京:北京農業(yè)大學出版社,1992:78-81.

[17]國家質量技術監(jiān)督局. 農藥田間藥效試驗準則(一)[S]. 北京:中國標準出版社, 2000:43-45.

ToxicitytestandfieldefficacyofbifenazateagainstPanonychuscitriMcGregor

Xu Shu, Chen Kaige, Yu Yao, Chen Gengmin, Chen Bingxu

(PlantProtectionResearchInstitute,GuangdongAcademyofAgriculturalSciences,GuangdongProvincialKeyLaboratoryofHighTechnologyforPlantProtection,Guangzhou510640,China)

Toxicity and field control effect of bifenazate againstPanonychuscitriMcGregor were evaluated by Potter-spraying method and field experiments. The results showed that the LC50values of bifenazate and pyridaben were 95.37 mg/L and 228.09 mg/L, respectively, and the toxicity index of bifenazate was 2.39. The field experiments conducted in 2011-2012 showed that the control effect of 43% bifenazate suspension was 50% to 60% at the concentration of 165, 195, 239 mg/kg one day after treatment, significantly lower than that of 15% pyridaben emulsifiable concentrate at the concentration of 75 mg/kg (about 70%). Three days after treatment, the control effect of 43% bifenazate at the concentration of 239 mg/kg was equivalent with that of 15% pyridaben, with control efficacy of over 75%. After fifteen days, the control effect of 43% bifenazate at the concentration of 195, 239 mg/kg were 88.63%-91.23%, significantly higher than that of 15% pyridaben emulsifiable concentrate. These results demonstrated that 43% bifenazate was one of the ideal acaricides againstP.citri, which took effect later than 15% pyridaben, but had more persistent control effect with persistence period of 15 days.

bifenazate;Panonychuscitri; toxicity; field effect

2013-11-11

：2014-03-31

公益性行業(yè)(農業(yè))科研專項(201103020)

S 436.661.23

：BDOI：10.3969/j.issn.0529-1542.2014.05.037

* 通信作者 E-mail:gzchenbx@163.com