栗 珍
(河南省駐馬店高級技工學(xué)校,463000)
厚樸為木蘭科植物厚樸的干燥干皮、根皮和枝皮,是臨床常用的中藥, 多使用其炮制品具有行氣燥濕降逆平喘的功效。主治脘腹脹痛、嘔吐、瀉痢、氣逆喘咳宿食不消等,其主要藥用成分包括厚樸酚、異厚樸酚、和厚樸酚等。
中藥炮制亦稱炮炙,炮制后的藥材成品,稱為飲片。中藥在炮制過程中,受到炮制程度、炮制方法及炮制輔料等因素影響,會引起其有效成分含量的差異。據(jù)有關(guān)文獻記載,關(guān)于厚樸的炮制方法只有姜炙法,其它炮制方法并未提及。本實驗通過紫外分光光度法測得不同方法炮制后厚樸飲片中厚樸酚的含量,從而為厚樸的最佳炮制方法提供理論依據(jù)。
1.1.1 儀器 UV-2201 型紫外分光光度計;TDL-40B 型離心機;三用紫外線分析儀;硅膠GF254;電子天平;烘箱
1.1.2 試劑厚樸酚采購于蘇州同豐化工貿(mào)易有限公司(分析純)厚樸采購于河南輝縣大來藥店(分析純)
1.2.1 厚樸各處理樣品的制備
生厚樸:稱取厚樸100 g,粉碎, 于烘箱中55 ℃烘干4 h,取出,過60 目篩,備用。
炒厚樸:稱取厚樸100 g,切絲,加水拌勻,文火炒干,粉碎,烘干,過篩,備用。
姜炙厚樸:稱取500 g 生姜,洗凈,加水250 mL,壓榨取汁。所得的姜渣加水250 mL,即得姜汁。稱取厚樸100 g,,切絲,加姜汁10 g,拌勻,文火炒干,粉碎,烘干,過篩,備用。
酒炙厚樸:稱取厚樸100 g,切絲,加酒10 mL,拌勻,文火炒干,粉碎, 烘干,過篩,備用。
醋炙厚樸:稱取厚樸100 g,切絲,加醋10 mL,拌勻,文火炒干,粉碎,烘干,過篩,備用。
1.2.2 對照溶液的制備精密稱取厚樸酚1 g,加入乙醇25 mL,加熱回流1 h。放冷,濾過,收集濾液至25 mL 量瓶。
1.2.3 供試溶液的制備
精密稱取各處理樣品1 g→加入乙醇(25 mL)→加熱回流(1 h)→放冷→過濾→收集濾液到25 mL 量瓶中。
取活化的CMC-Na 硅膠GF254 薄層板→精密吸取各樣品溶液(20ul)→分別點于硅膠GF254 薄層板上,并在其測點處10 ul 的厚樸酚溶液做對照→苯-甲醇(9:1)展開→取出→晾干→在紫外燈下監(jiān)視(254 nm).→刮取與對應(yīng)位置上的炒厚樸樣品的條斑→放離心管(10 mL)中→各管均加入乙醇(10 mL)→震蕩(10 min)→靜置(10min)→取上清液備用。
1.2.4 空白溶液的制備
刮取同一板上與條斑等面積的硅膠作空白, 置另一個10 mL 離心管中,精密加入乙醇10 mL,振搖10 min,靜置10 min,離心,取上清液,備用。
1.2.5 測定波長選擇
以空白溶液為空白對照,分別取對照溶液、供試溶液,用紫外分光光度計在200~400 nm 范圍內(nèi)進行紫外吸收圖譜掃描,以確定最大吸收波長。
1.2.6 回收率試驗
取濃度為20ug/ mL、60ug/ mL、100ug/ mL 的對照溶液3份,并分別在最大吸收波長處測定吸光度,計算回收率、平均回收率和RSD。
1.2.7 穩(wěn)定性試驗
取10 mL 供試溶液,室溫下避光保存,分別放置1 h、2 h、4 h、8 h、9 h 時,在最大吸收波長處測定其吸光度值。
1.2.8 樣品含量測定取各供試溶液,照分光光度法在294 nm 波長測定其吸收度(A),每種重復(fù)測定3 次,代入回歸方程,計算厚樸酚的含量。
測得其最大吸收波長為294 nm。
表1 對照溶液回收率的結(jié)果
9 h 內(nèi)測定各供試溶液含量穩(wěn)定性良好。
表2 厚樸飲片中厚樸酚的含量測定結(jié)果(n=3)
由表1 可知,回收率較高,RSD 為1.37 %,說明本試驗結(jié)果精確。由表2 中可見,生品中厚樸酚含量最高,其它厚樸飲片中厚樸酚含量均有所下降,但是生品質(zhì)地堅硬,難以制劑和服用,在臨床上較少用。姜炙樣品對厚樸酚含量有一定影響,但并不明顯。與其它三組炮制方法相比較,該炮制方法在本次實驗研究中效果最佳,故在制作厚樸飲片時以姜炙法為最佳。
[1] 林世俊,鄭廣東.厚樸不同炮制品含量測定的比較[J].中國中藥雜志,1993,18(1):27-27.
[2] 龔千鋒,張的鳳,張細和等.厚樸炮制工藝改革探討[J].中藥材,1997,20(5):238-239.
[3] 曾 詮,宋學(xué)華,張 泉等.厚樸及其炮制品中厚樸酚與和厚樸酚含量測定[J].中草藥,1996,27(1):11-11.
[4] 祝啟飛. 厚樸炮制工藝及飲片質(zhì)量標準研究[J]. 貴陽中醫(yī)學(xué)院,2010,11(2):38-39
[5] 李燕.淺談中醫(yī)炮制的五大方法[J].基層醫(yī)學(xué)論壇,2009,23(2):38-39
[6] 曾詮, 周干南, 屠萬等. 氣質(zhì)聯(lián)用研究厚樸及其炮制品中揮發(fā)油[J].中草藥,1997,28(2):81-83.
[7] 賈天柱.中藥炮制學(xué)[M].上海:上??茖W(xué)技術(shù)出版社,2008.8.