麩煨肉豆蔻不同提取物對大鼠離體腸平滑肌的影響

袁子民，劉 歡，胡 娜，王 靜

(遼寧中醫(yī)藥大學，遼寧 大連 116600)

麩煨肉豆蔻收載于《中國藥典》2010年版，為肉豆蔻科植物肉豆蔻Myristica fragrans Houtt.的炮制品，具有溫中行氣，澀腸止瀉功效。其炮制麩煨后具有減毒增效作用[1]。主要含有揮發(fā)油、脂肪油、木脂素和苯丙素等化學成分。以往對肉豆蔻止瀉作用的物質(zhì)基礎(chǔ)研究，主要以揮發(fā)油、水溶性成分、脂肪油研究為主，認為揮發(fā)油為肉豆蔻止瀉作用的物質(zhì)基礎(chǔ)[2]，但對提油后藥渣中的非揮發(fā)性、非水溶性成分還缺乏相關(guān)的藥理作用研究；另外肉豆蔻炮制后揮發(fā)油含量降低，但止瀉作用卻增強，這與以往研究認為揮發(fā)油是主藥止瀉成分相矛盾，預示肉豆蔻中除揮發(fā)油以外，其他化學成分還有可能具有止瀉作用。因此本文擬通過研究麩煨肉豆蔻的不同提取物對大鼠離體平滑肌自發(fā)活動的影響，為研究肉豆蔻、麩煨肉豆蔻止瀉作用的物質(zhì)基礎(chǔ)及炮制機理提供科學依據(jù)。

1 材料

SPF級SD雄性大鼠，體質(zhì)量(200±20) g，由遼寧長生生物技術(shù)有限公司提供。RM6240B多道生理信號采集處理系統(tǒng)(四川成都儀器廠)，HSS-1(B)恒溫浴槽(四川成都儀器廠)；SG3300H超聲波清洗器(上海冠特超聲儀器有限公司)；JY92-2D超聲波細胞破碎機(寧波新芝生物科技有限公司)；AR2140型電子分析天平(上海奧豪斯公司)；麩煨肉豆蔻(浙江中醫(yī)藥大學飲片廠提供，產(chǎn)地：印度尼西亞，批號：090414)；聚山梨酯-80等為分析純，臺式液自制。

2 方法

2.1 提取物的制備 取麩煨肉豆蔻粗粉200 g提取揮發(fā)油(A)，備用；蒸餾后的水煎液另器收集，藥渣再加水煎煮1次，濾過，合并水煎液，濃縮至稠膏減壓干燥至恒重(B)，備用；剩余的藥渣干燥至恒重，加90%乙醇提取2次，濾過，合并醇提液，靜置24 h，濾過，濾液真空濃縮回收乙醇至無醇味，濃縮成稠膏,減壓干燥至恒重，得醇提物(C)。取醇提物適量加適量水超聲分散，得混懸液；將混懸液依次用石油醚(D)、乙酸乙酯(E)、正丁醇(F)提取,各提取液及提取后的水層(G)分別減壓回收溶劑，濃縮成稠膏，減壓干燥至恒重,得麩煨肉豆蔻不同部位提取物。實驗前取各提取物適量，加2.0%聚山梨酯-80,用超聲波細胞破碎機超聲溶解或混懸，配制一定濃度。

2.2 麩煨肉豆蔻不同提取物對大鼠離體十二指腸平滑肌自發(fā)活動的影響 取禁食不禁水24 h大鼠，脫頸處死，迅速剖腹取近幽門端十二指腸約10 cm，置冷臺氏液中，剪去腸系膜及脂肪組織，將腸內(nèi)容物沖洗干凈,將腸管剪成約1.5 cm小段備用。調(diào)節(jié)恒溫浴槽，控制水溫在(37±0.5) ℃。將RM6240B微機生物信號采集處理系統(tǒng)與張力換能器相連。將腸管兩端對角穿線結(jié)扎，一端固定于L型通氣管上，將腸管完全浸入到30 mL臺氏液的浴漕內(nèi)固定，緩慢通入95% O2和5% CO2的混合氣體。另一端與張力換能器相連，加3 g負荷，打開RM6240B生物信號采集處理系統(tǒng)，待腸管收縮穩(wěn)定后，記錄給藥前3 min收縮曲線，采用累積給藥的方式滴加藥液，先加0.1 mL 2%吐溫-80觀察對正常離體腸收縮無影響后，依次加入一定濃度的麩煨肉豆蔻不同提取物。每次記錄后用臺氏液沖洗3次，給藥間隔時間為30 min，記錄各給藥量下腸管3 min的收縮曲線。據(jù)生物信號處理系統(tǒng)，采集各組給藥前后離體腸肌的收縮頻率與振幅，用軟件提供的相對移動測量計算給藥前3 min和給藥第6 min內(nèi)的平均張力，并根據(jù)平均張力值計算出抑制率。抑制率=(加藥前3 min平均張力-加藥后3 min平均張力)÷加藥前3 min平均張力[3-5]。

3 結(jié)果

與給藥前相比，麩煨肉豆蔻揮發(fā)油、醇提物、醇提物的石油醚及乙酸乙酯提取物對離體大鼠十二指腸自主運動有抑制作用(P<0.01),其中揮發(fā)油、醇提物的石油醚、乙酸乙酯提取物抑制率較大。見表1。

表1 麩煨肉豆蔻不同提取物對大鼠離體腸平滑肌自發(fā)活動的影響

注：終質(zhì)量濃度為加藥后每1L臺式液中相當于生藥材的量; “-”無抑制作用；與加藥前平均張力比較，#P<0.01。

4 討論

本實驗通過對麩煨肉豆蔻不同提取物對大鼠離體腸平滑肌自發(fā)活動的影響的研究，發(fā)現(xiàn)揮發(fā)油及醇提物抑制腸管平滑肌作用較強，主要是脂溶性成分，其中醇提物中主要含有脂肪油及木脂素類成分，而水溶性成分無作用，這與以往研究認為揮發(fā)油為主要有效成分不同[2]，另有研究報道表明，肉豆蔻的水煎液抗蓖麻油所致的大鼠腹瀉及抗炎作用很弱，而石油醚提物作用較強[6]，石油醚提取物中主要含有揮發(fā)油、脂肪油、木脂素等脂溶性成分。因此，除揮發(fā)油外，木脂素類成分及脂肪油是否也是麩煨肉豆蔻止瀉的有效成分，還需通過體內(nèi)止瀉實驗進一步深入研究確定。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[S].北京:化學工業(yè)出版社,2010:126.

[2]賈天柱,李潔,周糧,等.肉豆蔻不同炮制品止瀉作用及急性毒性比較[J].中國中藥雜志,1997,22(4):216-218.

[3]馬瑜,周名璐,陳芝喜.胃腸寧的藥效學研究[J].長春中醫(yī)藥大學學報,2006,22(2):56-57.

[4]李慶耀,梁生林,褚洪標,等.陳皮促胃腸動力有效部位的篩選研究[J].中成藥,2012,34(5):941-943.

[5]章津銘,傅超美,許麗佳,等.煨制川木香的止瀉作用及其物質(zhì)基礎(chǔ)研究[J].時珍國醫(yī)國藥,2010,21(12):3161-3163.

[6]Shidore,P.P.,S.M.Majumdar,D.S.Shrotri and A.M.Majumdar.Antidiarrhoeal and antiinflammatory activity of nutmeg extracts[J].Indian Journal of Pharmaceutical Sciences,1985,47(5):188-190.