藥用硫化汞納米粉主要藥效學研究

高麗娜 陳朝軍 陸景坤 武世奎 王一博 趙立元 郭曉波

藥用硫化汞納米粉主要藥效學研究

高麗娜 陳朝軍 陸景坤 武世奎 王一博 趙立元 郭曉波

目的通過抗驚厥、鎮(zhèn)靜與燙傷治療實驗，研究合成的藥用硫化汞納米粉的主要藥效，旨在探討藥用硫化汞納米化對其藥效學的影響。方法(1)燙傷作用：取小鼠30只，隨機數字表法分成3組，90℃水造成淺二度燙傷模型，模型組僅涂抹麻油，陽性對照組涂抹京萬紅，實驗組涂抹硫化汞納米粉膏劑，觀察各組小鼠燙傷部位的結痂情況。(2)鎮(zhèn)靜作用：取小鼠50只，隨機數字表法分為5組，模型對照組灌胃給予蒸餾水，陽性對照組腹腔注射地西泮片，實驗組給予藥用硫化汞納米粉，連續(xù)給藥7天，并于末次給藥后，依次給各組小鼠腹腔注射戊巴比妥鈉，記錄睡眠潛伏期、睡眠發(fā)生率及睡眠時間。(3)抗驚厥作用：取小鼠50只，隨機數字表法分為5組，模型對照組灌胃給予蒸餾水，陽性對照組腹腔注射給予地西泮片，實驗組為藥用硫化汞納米粉。連續(xù)給藥七天，并于末次給藥后，依次給各組小鼠注射戊四唑，制造驚厥模型。觀察小鼠驚厥發(fā)生率。結果(1)燙傷作用：藥用硫化汞納米粉對傷口具有顯著收斂作用(P≤0.01)(2)鎮(zhèn)靜作用：藥用硫化汞納米粉高、中、低劑量組均能顯著減低睡眠潛伏期(P≤0.01)(3)抗驚厥作用：藥用硫化汞納米粉高、中、低劑量組驚厥率和死亡率明顯較低(P≤0.01)。結論合成的藥用硫化汞納米粉具有治療燙傷、鎮(zhèn)靜與抗驚厥的藥理作用。

藥用硫化汞納米粉； 藥效學； 治療燙傷； 鎮(zhèn)靜； 抗驚厥

硫化汞為礦物藥朱砂和蒙藥銀朱的主要成分，在中藥、蒙藥、藏藥中均廣泛應用[1]，安宮牛黃丸、孟根烏蘇18味丸以及七十味珍珠丸等著名方劑中均配伍藥用硫化汞。但傳統(tǒng)工藝炮制的藥用硫化汞生物利用度極低，在成藥方劑中添加量較大，致使其在安全性方面飽受質疑[2]，大劑量使用硫化汞依然是民族醫(yī)藥發(fā)展的瓶頸。因此如何減毒增效成為該領域研究的熱點。

納米醫(yī)藥是近年醫(yī)藥領域研究的熱點，并且在難溶藥物如雄黃，三氧化二砷、牛黃的生物利用度和藥效研究中取得了重大進展[3]。由于納米顆粒具有較大的比表面積，其有效成分溶出量較常規(guī)尺寸顆粒有明顯提高[4]。在藏藥和印度醫(yī)藥中均報道人工炮制的藥用硫化汞制品如佐太和ras-sindoor等傳統(tǒng)藥物中含有大量硫化汞納米顆粒[5-6]。這表明在傳統(tǒng)工藝中已融入了現代科技的因素。本課題組以硫代乙酰胺與硝酸汞作為前體一步濕法合成了硫化汞納米粉[7]，硫化汞的納米化有望提高其藥效，減少在方劑中的使用量。本文主要研究合成納米硫化汞的藥理作用，此合成工藝為中藥、蒙藥中含硫化汞藥材的炮制工藝提供新的途徑，加快其現代化進程。

1 材料

1.1 試劑

藥用硫化汞納米粉(由本實驗室合成并經電鏡鑒定為納米顆粒，純度為100%)，冰片(購自呼和浩特市惠豐堂大藥房)，京萬紅(天津達仁堂京萬紅藥業(yè)有限公司，批號：211786)，地西泮片片(上海信誼藥廠有限公司，批號：110901)，戊四唑(Sigma 公司，批號：1001189895)。

1.2 動物

選用體重為18～22 g的昆明種小鼠共130只，雌雄各半，購自內蒙古大學動物中心,動物許可證號SCXK(蒙)2002-0001。

2 實驗方法

2.1 對小鼠實驗性燙傷的影響

2.1.1 膏劑的配制 藥用硫化汞納米粉30 g，冰片5 g，用麻油20 ml和成膏，2～8℃保存，用時直接抹于患處。

2.1.2 動物分組及給藥 取小鼠30只，隨機數字表法分成3組，每組10只。用8%硫化鈉背部脫毛，生理鹽水洗凈待干，用一口徑為1.5 cm的無底有機玻璃圓筒置于脫毛處，向其內倒入90℃水，保留30秒，造成淺二度燙傷(水泡性，患處產生水泡)[8]，在燙傷30分鐘后，每只小鼠均用醫(yī)用棉簽涂抹0.1 g藥物。模型組在小鼠燙傷部位僅涂抹麻油，實驗組涂抹藥用硫化汞納米粉膏劑，陽性對照組涂抹京萬紅。觀察各組小鼠燙傷部位的結痂情況并記錄結痂面積和脫痂時間(結痂面積=左右徑×前后徑)。

2.2 對戊巴比妥鈉鎮(zhèn)靜的協同作用

取小鼠50只，體重18～22 g，雌雄各半，按體重隨機數字表法分為5組，分別灌胃給予15×103mg/kg、10×103mg/kg、6.7×103mg/kg藥用硫化汞納米粉，陽性對照組腹腔注射0.2 mg/kg地西泮片，模型對照組灌胃給予蒸餾水，連續(xù)給藥7天，并于末次給藥30分鐘后，依次給各組小鼠腹腔注射戊巴比妥鈉75 mg/kg。觀察小鼠翻正反射(消失1分鐘以上記為發(fā)生睡眠)，記錄睡眠潛伏期、睡眠發(fā)生率及睡眠時間。

2.3 對戊四唑致小鼠驚厥作用的影響

取小鼠50只，體重18～22克，雌雄各半，按體重隨機數字表法分為5組，灌胃給予15×103mg/kg、10×103mg/kg、6.7×103mg/kg藥用硫化汞納米粉，模型對照組灌胃給予蒸餾水，陽性對照組腹腔注射給予4.5 mg/kg地西泮片。連續(xù)給藥七天，并于末次給藥60分鐘后，依次給各組小鼠背部皮下注射戊四唑90 mg/kg，制造驚厥模型[9]。觀察小鼠15分鐘內驚厥發(fā)生率，驚厥潛伏期及死亡率，15分鐘后的驚厥潛伏期記作900秒。

3 統(tǒng)計學方法

4 實驗結果

4.1 對小鼠實驗性燙傷的影響

燙傷實驗結果如表1所示。經t檢驗統(tǒng)計分析，發(fā)現給藥1天后，與模型組相比，藥用硫化汞納米粉組燙傷的結痂面積顯著低于模型組(P≤0.01)；與京萬紅組(陽性對照)相比，硫化汞納米粉組1天后的結痂面積顯著低于京萬紅組，脫痂時間顯著高于京萬紅組。給藥15天后，與模型組相比，京萬紅組(陽性對照)、藥用硫化汞納米粉組的創(chuàng)面結痂面積和脫痂時間顯著低于模型組(P≤0.01)；與京萬紅組相比，藥用硫化汞納米粉組結痂面積顯著低于京萬紅組，脫痂時間顯著高于京萬紅組，創(chuàng)面結痂面積沒有顯著性差異。實驗結果表明藥用硫化汞納米粉對燙傷1天后的傷口收斂效果優(yōu)于京萬紅，脫痂時間稍長于京萬紅。

表1 配制軟膏對小鼠實驗性燙傷的影響

注：與模型組相比aP<0.01；與陽性組相比bP<0.01。

4.2 對戊巴比妥鈉鎮(zhèn)靜的協同作用

如表2所示，經t檢驗統(tǒng)計分析：地西泮片組睡眠潛伏期較模型組顯著降低，睡眠率顯著增加(P≤0.01)；藥用硫化汞納米粉高、中、低劑量組睡眠潛伏期均顯著降低(P≤0.01)，睡眠率顯著增加，且睡眠潛伏期存在劑量依賴關系，即隨給藥劑量增加，睡眠潛伏期依次降低。結果表明藥用硫化汞納米粉具有一定的協同鎮(zhèn)靜作用，但其作用弱于地西泮片組。

表2 對戊巴比妥鈉鎮(zhèn)靜的協同作用的結果

注：與模型組相比aP<0.01；與陽性組相比bP<0.01。

4.3 對戊四唑致小鼠驚厥作用的影響

實驗結果見表3，經t檢驗統(tǒng)計分析：地西泮片組驚厥潛伏期顯著高于模型組，驚厥率和死亡率遠低于模型組(P≤0.01)；藥用硫化汞納米粉高、中、低劑量組驚厥潛伏期均顯著高于模型組(P≤0.01)，其中中劑量組驚厥潛伏期最長，硫化汞高、中、低劑量組死亡率均低于模型組，且存在劑量依賴關系，即隨給藥劑量增加，死亡率依序降低；藥用硫化汞納米粉高、中、低劑量組驚厥潛伏期均顯著低于于地西泮片組(P≤0.01)。上述結果表明合成的藥用硫化汞納米粉具有抗驚厥作用，且存在劑量依存關系，但其作用弱于地西泮片。

表3 對戊四唑致驚厥作用的影響

注：與模型組相比aP<0.01；與陽性組相比bP<0.01。

5 結語

藥用硫化汞納米粉的合成工藝能夠降低傳統(tǒng)炮制工藝硫化汞藥物中對工作人員的損害及環(huán)境污染，本課題組首次研究了通過簡單的化學方法合成的藥用硫化汞納米粉的藥效作用，發(fā)現此工藝合成的藥用硫化汞納米粉在治療燙傷、抗驚厥、鎮(zhèn)靜方面均具有一定的作用。為蒙藥的合成工藝提供了新的可選擇的方法。但是因納米特性的存在，能否通過減少給藥劑量來降低汞的毒性、提高生物利用度，還需進一步藥代動力學與毒理學研究探討。

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(本文編輯： 董歷華)

Primarypharmacodynamicsresearchofmedicinalmercurysulfidenanopowder

GAOLi-na，CHENChao-jun，LUJing-kun，etal.

Collegeofpharmacy，InnerMongoliaMedicalUniversity，Huhhot010110，China

CHENChao-jun，E-mail：chenchaojun18@163.com

ObjectiveIn order to explore medicinal mercury sulfide nanopowderm by synthesis on its pharmacodynamics, we researched on the main efficacy of the medicinal mercuric sulfide nanopowder through anticonvulsants, sedation and burn treatment experiment.Methods(1)Healing burns effect：30 mice were randomly divided into 3 groups, and second-degree (superficial) burns model were established by 90 ℃ water. The mice from model group were only treated with sesame oil, the positive group with Jingwanhong and the experimental group with mercuric sulfide nano powder paste, Then observing burns scabby situation. (2) Sedation effect ：50 mice were randomly divided into 5 groups, the model group were given distilled water, the positive group in the abdominal cavity injection of diazepam, experimental group given medicinal mercuric sulfide nanopowder, for seven days continuously. Finally giving each group mice injection of sodium pentobarbital in turn and recording the incidence of sleep latency and sleeping time. (3) Anticonvulsive effect：Identical to the method of (2),except the pentobarbital sodium was replaced by pentylenetetrazo, After that observing the mice convulsion rates.Results(1) Medicinal mercuric sulfide nanopowder had a significant effect on the burning.(2) Medicinal mercuric sulfide nanopowder of high, middle, low dose group could significantly reduce the sleep latency. (3) Eclampsia rate and mortality of medicinal mercuric sulfide nanopowder group were significantly lower than model group.ConclusionIn this experiment condition, Medicinal mercuric sulfide nanopowder by synthesis has healing burns, sedation and anticonvulsant pharmacological effects.

Medicinal mercury sulfide nanopowde； Pharmacodynamics； Healing burns； Sedation； Anticonvulsant

010110 呼和浩特，內蒙古醫(yī)科大學藥學院[高麗娜(碩士研究生)、陳朝軍、武世奎、王一博(碩士研究生)、趙立元(碩士研究生)、郭曉波(本科生)]，蒙醫(yī)藥研究院(陸景坤)

高麗娜(1988- )，女，2012級在讀碩士研究生。研究方向：中蒙藥學研究。E-mail:243792936@qq.com

陳朝軍(1957- )，女，本科，教授。研究方向：中蒙藥中重金屬存在形態(tài)分析及毒代動力學研究。E-mail: chenchaojun18@163.com

R285.5

A

10.3969/j.issn,1674-1749.2014.02.005

2013-11-27)

基金支持：內蒙古自然科學基金(2012MS1209)