鄒原東+范繼紅+韓振芹
摘要:以空間搭載的芹菜(Apium graveolens L. var. dulce DC.)種子為試驗(yàn)材料,研究了芹菜幼苗期丙二醛(MDA)、葉綠素、可溶性糖、可溶性蛋白質(zhì)、脯氨酸(Pro)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、過(guò)氧化物酶(POD)和過(guò)氧化氫酶(CAT)活性等生理指標(biāo)的變化。結(jié)果表明,空間搭載的處理1、2、4葉片MDA含量有所增加,處理2、4與對(duì)照相比差異極顯著(P<0.01);葉綠素a、葉綠素b和葉綠素(a+b)含量都高于對(duì)照,葉綠素a含量受空間射線影響較為明顯;可溶性糖、脯氨酸含量均與對(duì)照差異不顯著(P>0.05);處理1、2、4葉片的可溶性蛋白質(zhì)含量低于對(duì)照;處理2、3、4葉片的SOD、POD、CAT活性較對(duì)照均有所增加。
關(guān)鍵詞:芹菜(Apium graveolens L var. dulce DC);空間搭載;生理特性
中圖分類號(hào):S636.3;S603.6;S601 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):0439-8114(2014)03-0601-03
中國(guó)是世界上少數(shù)幾個(gè)利用航天技術(shù)進(jìn)行誘變育種的國(guó)家之一。航天育種又叫太空育種,是利用衛(wèi)星、飛船等返回式航天器將作物的種子、組織、器官或生命個(gè)體搭載到宇宙空間,在強(qiáng)輻射、微重力、高真空等太空誘變因子的作用下使其發(fā)生遺傳性狀變異,利用有益變異選育出農(nóng)作物新品種的育種新技術(shù)[1]。航天育種為培育抗病、增產(chǎn)新品種,選育優(yōu)良后代開辟了新途徑。劉玲雪等[2]的研究表明,經(jīng)過(guò)空間搭載的大豆株高、主莖節(jié)數(shù)、單株結(jié)莢、單株粒數(shù)高于地面對(duì)照。薛淮等[3]的研究表明,空間搭載后的蜀葵幼苗體內(nèi)丙二醛含量升高, SOD、POD、CAT活性均低于地面對(duì)照??臻g環(huán)境引起植物體內(nèi)代謝異常、抗氧化酶活性受到損傷以至加速衰老。試驗(yàn)探討了空間搭載對(duì)芹菜幼苗生理特性的影響,以期為芹菜航天育種提供理論依據(jù)。
1 材料與方法
1.1 材料
供試材料芹菜(Apium graveolens L. var. dulce DC.)由中國(guó)航天育種中心提供,種子分為5份,一份用作地面對(duì)照,另4份通過(guò)神舟七號(hào)飛行器搭載進(jìn)入太空,返回地面后同期播種。試驗(yàn)采用5×5拉丁方設(shè)計(jì),于2013年3~5月在北京農(nóng)業(yè)職業(yè)學(xué)院科技示范園溫室進(jìn)行。從3~4片葉的幼苗開始,每周取一次葉片進(jìn)行各項(xiàng)生理指標(biāo)的測(cè)定,處理和對(duì)照各5次重復(fù),取樣時(shí)間為上午8:00~9:00。
1.2 方法
1.2.1 葉綠素的提取及測(cè)定 葉綠素采用80%丙酮浸提法[4]提取。丙二醛(MDA)含量的測(cè)定采用TBA比色法[4]??扇苄蕴呛繙y(cè)定采用硫酸-蒽酮比色法[4];可溶性蛋白質(zhì)含量測(cè)定采用考馬斯亮藍(lán)G-250法[4];脯氨酸(Pro)含量測(cè)定采用酸性茚三酮顯色法[5];超氧化物歧化酶(SOD)活性測(cè)定采用NBT光還原法[4];過(guò)氧化物酶(POD)活性測(cè)定采用愈創(chuàng)木酚法[4];過(guò)氧化氫酶(CAT)活性測(cè)定采用高錳酸鉀滴定法[4]。各指標(biāo)含量均以鮮重計(jì)。
1.2.2 數(shù)據(jù)分析 數(shù)據(jù)采用Excel 2003和SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
2 結(jié)果與分析
2.1 空間搭載對(duì)芹菜丙二醛、可溶性糖、可溶性蛋白質(zhì)和游離脯氨酸含量的影響
從表1可以看出,與對(duì)照相比,處理1、2、4芹菜葉片的丙二醛含量有所增加,最大增加幅度和最小增加幅度分別為25.6%和2.6%;處理3丙二醛含量比對(duì)照低。與對(duì)照相比,處理2、4在經(jīng)過(guò)空間照射后葉片丙二醛濃度極顯著增加(P<0.01),說(shuō)明空間環(huán)境會(huì)對(duì)植株細(xì)胞膜產(chǎn)生一定影響。
與對(duì)照相比,芹菜幼苗葉片的可溶性糖含量明顯增加,最大增幅為0.13個(gè)百分點(diǎn),空間搭載下芹菜幼苗葉片的可溶性糖含量與對(duì)照差異不顯著。
空間照射后芹菜植株葉片的可溶性蛋白質(zhì)含量與對(duì)照相比總體呈下降趨勢(shì),只有處理3的含量比對(duì)照略高。方差分析及多重比較結(jié)果表明,空間環(huán)境對(duì)芹菜幼苗葉片的可溶性蛋白質(zhì)含量沒(méi)有顯著影響。
脯氨酸含量的高低決定植株滲透脅迫的壓力大小??臻g照射后,處理2、3、4植株葉片中游離脯氨酸含量與對(duì)照相比有所增加;處理4的含量最高,為0.0148%。通過(guò)方差分析可知F檢驗(yàn)不顯著(P=0.066>0.05)。表明空間搭載后芹菜幼苗植株脯氨酸含量與對(duì)照差異不顯著。
2.2 空間搭載對(duì)芹菜幼苗葉片葉綠素含量的影響
從表2可以看出,空間搭載4個(gè)處理的葉綠素含量(葉綠素a、葉綠素b和葉綠素(a+b)均高于對(duì)照;而且包括對(duì)照在內(nèi)所有處理的葉綠素a含量要高于葉綠素b含量。處理3葉片的葉綠素a含量和對(duì)照相比差異顯著(P<0.05);處理1和對(duì)照相比差異極顯著(P<0.01);處理1、3、4葉片葉綠素b含量與對(duì)照相比差異顯著(P<0.05);而處理1葉片的葉綠素(a+b)含量與對(duì)照相比差異極顯著(P<0.01)。
2.3 空間搭載對(duì)芹菜幼苗葉片抗氧化酶活性的影響
由表3可知,與對(duì)照相比,空間搭載的芹菜幼苗葉片中SOD活性明顯升高,增幅達(dá)7.1%~16.8%。只有處理2與對(duì)照SOD活性差異極顯著(P<0.01)。表明空間搭載條件下的芹菜較能抵御外界傷害,增強(qiáng)自身清除氧自由基的能力較強(qiáng)。
空間環(huán)境下處理2、3、4芹菜植株葉片的POD活性和對(duì)照相比顯著增加,最高增幅達(dá)38.8%。處理2、3在空間照射的環(huán)境下葉片的POD活性和對(duì)照相比差異達(dá)顯著水平(P<0.05);處理4和對(duì)照間差異達(dá)極顯著水平(P<0.01)。
與對(duì)照相比,空間搭載后芹菜幼苗葉片CAT活性有所增加,最小增幅為10.3%;處理4 CAT活性最高,是對(duì)照的1.34倍??臻g搭載的4個(gè)處理葉片中CAT活性和對(duì)照相比差異都達(dá)顯著水平(P<0.05);處理2、3、4和對(duì)照相比差異極顯著(P<0.01)。