家蠶人工飼料專用消毒劑消毒效果研究

劉文光等

摘 要：

體外培養(yǎng)基抑菌試驗(yàn)表明：人工飼料專用消毒劑對(duì)靈菌、白僵菌、綠僵菌和曲霉菌的最低殺滅質(zhì)量濃度為0.5%；生物試驗(yàn)表明：含量為1.0%的消毒劑對(duì)家蠶的生長發(fā)育無不良影響。

關(guān)鍵詞：家蠶；人工飼料；消毒劑；消毒效果

中圖分類號(hào)：S884.1+1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)號(hào)：A 文章編號(hào)：1001-4942（2014）04-0097-03

人工飼料養(yǎng)蠶是適應(yīng)專業(yè)化、規(guī)模化蠶繭生產(chǎn)技術(shù)，提高養(yǎng)蠶工效、節(jié)省飼育設(shè)施的一條重要途徑[1，2]。家蠶人工飼料的主要組成成分是桑葉粉和大豆粉，其含水率高，營養(yǎng)豐富，又需在高溫多濕的環(huán)境條件下用于養(yǎng)蠶，因此極易腐敗變質(zhì)，滋生細(xì)菌和真菌，誘發(fā)家蠶的細(xì)菌性敗血病和僵病，嚴(yán)重影響?zhàn)B蠶效果[3，4]。為防止人工飼料變質(zhì)并保持其品質(zhì)穩(wěn)定性，國內(nèi)外廣泛采用在人工飼料中添加防腐劑。防腐劑是一類能抑制微生物活動(dòng)、防止微生物造成飼料腐敗變質(zhì)，從而延長保質(zhì)期的食品添加劑[5]。在高溫高濕特別是農(nóng)村比較簡陋的養(yǎng)蠶條件下進(jìn)行人工飼料養(yǎng)蠶，僅靠添加防腐劑很難達(dá)到消毒及齡期末除濕干燥的要求，飼料極易霉變，誘發(fā)蠶病，影響家蠶就眠。因此，研制一種既能消毒殺菌又能在齡期末起到除濕止桑的多用途消毒劑，是人工飼育技術(shù)必須解決的問題。

氯溴異氰脲酸（C3HO3N3ClBr）是一種高效、廣譜的內(nèi)吸性殺菌劑，其水溶液呈酸性。將氯溴異氰脲酸藥液噴施在作物表面能緩慢地釋放次溴酸（HOBr）和次氯酸（HOCl），次溴酸的活性是次氯酸的4倍，對(duì)細(xì)菌和真菌有強(qiáng)烈的殺滅作用[6]。

膨潤土是一種無機(jī)高活性火山灰粘土材料，具有強(qiáng)吸水性及離子吸附能力，其主要成分為蒙脫石[7，8]。鑒于氯溴異氰脲酸的殺菌效果和膨潤土的強(qiáng)吸水性，本課題組以氯溴異氰脲酸和膨潤土為原料配制成人工飼料專用消毒劑，對(duì)家蠶病原體進(jìn)行了消毒試驗(yàn)。

1 材料與方法

1.1 材料與藥劑

供試家蠶品種：菁松×皓月，人工飼料飼育。

人工飼料：山東省蠶業(yè)研究所經(jīng)濟(jì)室配制。

供試病原：均由本所蠶病研究室保存。家蠶病原細(xì)菌為本所蠶病室保存的靈菌（Serratia marcescens Bizio），試驗(yàn)時(shí)取菌種一支，加水2～3 mL制成菌懸液，置冰箱中4℃保存?zhèn)溆?。家蠶病原真菌——白僵菌（Beauveria bassiana）、綠僵菌（Nomuraea rileyi Farlow）、黃曲霉（Aspergillus flavus）用蠶蛹培養(yǎng)基繁殖繼代獲取，取分生孢子加適量吐溫-80使其懸浮于滅菌蒸餾水中，經(jīng)2層紗布過濾，白僵菌稀釋至2.0×107 個(gè)/mL，綠僵菌和黃曲霉稀釋至5.0×107個(gè)/mL，置冰箱中4℃保存?zhèn)溆?，保存時(shí)間不超過30 d。

供試培養(yǎng)基：營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基：蛋白胨10 g，牛肉膏5 g，氯化鈉5 g，瓊脂15 g，蒸餾水1 000 mL。加熱溶解后調(diào)pH值至 7.2～7.4，分裝，于121℃ 壓力蒸汽滅菌 20 min備用。沙堡瓊脂培養(yǎng)基：葡萄糖40 g，蛋白胨10 g，瓊脂20 g，蒸餾水1 000 mL。將上述成分混合后，加熱至完全溶解，調(diào)pH值至5.6±0.2，于115℃壓力蒸汽滅菌 30 min備用。

供試藥劑：50%氯溴異氰脲酸，由魯西愛農(nóng)化工有限公司提供；膨潤土：由濰坊市坊子區(qū)興隆膨潤土廠提供。

1.2 對(duì)病原細(xì)菌的消毒試驗(yàn)

向直徑90 mm的無菌平皿中注入20 mL熔化的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，凝固，冷卻至室溫。將配制好的靈菌菌液在每皿培養(yǎng)基上均勻涂抹3個(gè)直徑為20 mm的菌圈，然后把質(zhì)量濃度為0.05%、0.1%、0.2%、0.5%、1.0%的消毒劑按60 g/m2均勻撒在培養(yǎng)基上，密封培養(yǎng)皿，37℃ 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72 h，觀察菌落生長情況。以涂抹菌不做處理為毒對(duì)照，并以在培養(yǎng)基上涂抹無菌水作為空白對(duì)照。每處理重復(fù)3皿。

1.3 對(duì)病原真菌的消毒試驗(yàn)

向直徑90 mm的無菌平皿中注入20 mL熔化的沙堡瓊脂培養(yǎng)基，凝固，冷卻至室溫。將配制好的菌液在每皿培養(yǎng)基上均勻涂抹3個(gè)直徑為20 mm的菌圈，然后把質(zhì)量濃度為0.2%、0.5%、1.0%、2.0%的消毒劑按60 g/m2均勻撒在培養(yǎng)基上，密封培養(yǎng)皿，白僵菌、綠僵菌在25℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72 h，黃曲霉在30℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72 h，觀察菌落生長情況。以涂抹菌不做處理為毒對(duì)照，并以在培養(yǎng)基上涂抹無菌水作為空白對(duì)照。每處理重復(fù)3皿。

1.4 對(duì)家蠶生理影響試驗(yàn)

二齡起蠶分區(qū)飼養(yǎng)2 d，剔除弱小蠶，定數(shù)，每區(qū)50頭，90%見眠后按60 g/m2撒含量為1.0%的人工飼料消毒劑，同時(shí)設(shè)不撒消毒劑為空白對(duì)照，調(diào)查起蠶率和起蠶體重。

1.5 藥物的穩(wěn)定性試驗(yàn)

配制質(zhì)量濃度為1.0%的消毒劑，置于密封的聚乙烯塑料袋內(nèi)，在溫度為40℃、濕度為80%的條件下保存，放置1、3、30 d后測(cè)其氯溴異氰脲酸的含量。

2 結(jié)果與分析

2.1 人工飼料消毒劑對(duì)病原細(xì)菌和真菌的殺滅效果

結(jié)果（表1、表2）可以看出，人工飼料消毒劑對(duì)靈菌、白僵菌、綠僵菌和曲霉菌殺滅的臨界濃度均為0.5%。

2.2 人工飼料消毒劑對(duì)家蠶起蠶率和體重的影響

2.3 人工飼料消毒劑穩(wěn)定性

配制質(zhì)量濃度為1.0%的人工飼料消毒劑，置于密封的聚乙烯塑料袋內(nèi)，在溫度為40℃、濕度為80%的條件下保存，放置1、3、30 d后，有效氯分別下降了4.6%、13.0%、26.7%，表明氯溴異氰脲酸和膨潤土混合在一起不太穩(wěn)定，應(yīng)當(dāng)分別包裝。

3 討論

本試驗(yàn)研究了以氯溴異氰脲酸和膨潤土為原料的人工飼料專用消毒劑對(duì)家蠶病原的消毒效果。體外培養(yǎng)基抑菌試驗(yàn)表明，該消毒劑對(duì)靈菌、白僵菌、綠僵菌和曲霉菌的最低殺滅質(zhì)量濃度為0.5%，而且含量為1.0%的消毒劑對(duì)家蠶的起蠶率和體重?zé)o不良影響。穩(wěn)定性研究表明，氯溴異氰脲酸和膨潤土混合在一起不太穩(wěn)定，應(yīng)當(dāng)分別包裝，配制后應(yīng)保存在密閉容器內(nèi)，并在24 h內(nèi)用完。綜上所述，人工飼料消毒劑對(duì)家蠶病原細(xì)菌和真菌有較好的殺滅效果，可以在人工飼料養(yǎng)蠶中推廣應(yīng)用。

參 考 文 獻(xiàn)：

[1]

張?jiān)氯A，徐安英.家蠶人工飼料研究進(jìn)展[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2006，34（17）：4326-4327.

[2] 李化秀，張亞平，婁齊年.家蠶原蠶稚蠶人工飼料育研究初報(bào)[J].山東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2005（3）：64-66.

[3] 顧寅鈺，李化秀，施新琴，等.家蠶人工飼料中桑葉粉及大豆粉含量與質(zhì)量對(duì)稚蠶、壯蠶及繭質(zhì)的影響[J].山東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，45（5）：105-107.

[4] 崔為正，王彥文，張國基，等.家蠶人工飼料防腐劑和抗菌素的篩選研究[J].山東農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，1999，30（3）：219-225.

[5] 凌關(guān)庭.食品添加劑手冊(cè)[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，1997.

[6] 師紅梅，毛紅彥，劉雅，等.氯溴異氰脲酸防治幾類主要病害藥效研究[J].河南科技學(xué)院學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2005，33（1）：63-65.

[7] 朱偉，林城，李磊，等.以膨潤土為輔助添加劑固化/穩(wěn)定化污泥的試驗(yàn)研究[J].環(huán)境科學(xué)，2007，28（5）：1020-1024.

[8] 宋吉英.化學(xué)添加劑對(duì)玉米吸收汞的抑制作用研究[J].山東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009（8）：63-65.endprint

摘 要：

體外培養(yǎng)基抑菌試驗(yàn)表明：人工飼料專用消毒劑對(duì)靈菌、白僵菌、綠僵菌和曲霉菌的最低殺滅質(zhì)量濃度為0.5%；生物試驗(yàn)表明：含量為1.0%的消毒劑對(duì)家蠶的生長發(fā)育無不良影響。

關(guān)鍵詞：家蠶；人工飼料；消毒劑；消毒效果

中圖分類號(hào)：S884.1+1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)號(hào)：A 文章編號(hào)：1001-4942（2014）04-0097-03

人工飼料養(yǎng)蠶是適應(yīng)專業(yè)化、規(guī)?；Q繭生產(chǎn)技術(shù)，提高養(yǎng)蠶工效、節(jié)省飼育設(shè)施的一條重要途徑[1，2]。家蠶人工飼料的主要組成成分是桑葉粉和大豆粉，其含水率高，營養(yǎng)豐富，又需在高溫多濕的環(huán)境條件下用于養(yǎng)蠶，因此極易腐敗變質(zhì)，滋生細(xì)菌和真菌，誘發(fā)家蠶的細(xì)菌性敗血病和僵病，嚴(yán)重影響?zhàn)B蠶效果[3，4]。為防止人工飼料變質(zhì)并保持其品質(zhì)穩(wěn)定性，國內(nèi)外廣泛采用在人工飼料中添加防腐劑。防腐劑是一類能抑制微生物活動(dòng)、防止微生物造成飼料腐敗變質(zhì)，從而延長保質(zhì)期的食品添加劑[5]。在高溫高濕特別是農(nóng)村比較簡陋的養(yǎng)蠶條件下進(jìn)行人工飼料養(yǎng)蠶，僅靠添加防腐劑很難達(dá)到消毒及齡期末除濕干燥的要求，飼料極易霉變，誘發(fā)蠶病，影響家蠶就眠。因此，研制一種既能消毒殺菌又能在齡期末起到除濕止桑的多用途消毒劑，是人工飼育技術(shù)必須解決的問題。

氯溴異氰脲酸（C3HO3N3ClBr）是一種高效、廣譜的內(nèi)吸性殺菌劑，其水溶液呈酸性。將氯溴異氰脲酸藥液噴施在作物表面能緩慢地釋放次溴酸（HOBr）和次氯酸（HOCl），次溴酸的活性是次氯酸的4倍，對(duì)細(xì)菌和真菌有強(qiáng)烈的殺滅作用[6]。

膨潤土是一種無機(jī)高活性火山灰粘土材料，具有強(qiáng)吸水性及離子吸附能力，其主要成分為蒙脫石[7，8]。鑒于氯溴異氰脲酸的殺菌效果和膨潤土的強(qiáng)吸水性，本課題組以氯溴異氰脲酸和膨潤土為原料配制成人工飼料專用消毒劑，對(duì)家蠶病原體進(jìn)行了消毒試驗(yàn)。

1 材料與方法

1.1 材料與藥劑

供試家蠶品種：菁松×皓月，人工飼料飼育。

人工飼料：山東省蠶業(yè)研究所經(jīng)濟(jì)室配制。

供試病原：均由本所蠶病研究室保存。家蠶病原細(xì)菌為本所蠶病室保存的靈菌（Serratia marcescens Bizio），試驗(yàn)時(shí)取菌種一支，加水2～3 mL制成菌懸液，置冰箱中4℃保存?zhèn)溆?。家蠶病原真菌——白僵菌（Beauveria bassiana）、綠僵菌（Nomuraea rileyi Farlow）、黃曲霉（Aspergillus flavus）用蠶蛹培養(yǎng)基繁殖繼代獲取，取分生孢子加適量吐溫-80使其懸浮于滅菌蒸餾水中，經(jīng)2層紗布過濾，白僵菌稀釋至2.0×107 個(gè)/mL，綠僵菌和黃曲霉稀釋至5.0×107個(gè)/mL，置冰箱中4℃保存?zhèn)溆?，保存時(shí)間不超過30 d。

供試培養(yǎng)基：營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基：蛋白胨10 g，牛肉膏5 g，氯化鈉5 g，瓊脂15 g，蒸餾水1 000 mL。加熱溶解后調(diào)pH值至 7.2～7.4，分裝，于121℃ 壓力蒸汽滅菌 20 min備用。沙堡瓊脂培養(yǎng)基：葡萄糖40 g，蛋白胨10 g，瓊脂20 g，蒸餾水1 000 mL。將上述成分混合后，加熱至完全溶解，調(diào)pH值至5.6±0.2，于115℃壓力蒸汽滅菌 30 min備用。

供試藥劑：50%氯溴異氰脲酸，由魯西愛農(nóng)化工有限公司提供；膨潤土：由濰坊市坊子區(qū)興隆膨潤土廠提供。

1.2 對(duì)病原細(xì)菌的消毒試驗(yàn)

向直徑90 mm的無菌平皿中注入20 mL熔化的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，凝固，冷卻至室溫。將配制好的靈菌菌液在每皿培養(yǎng)基上均勻涂抹3個(gè)直徑為20 mm的菌圈，然后把質(zhì)量濃度為0.05%、0.1%、0.2%、0.5%、1.0%的消毒劑按60 g/m2均勻撒在培養(yǎng)基上，密封培養(yǎng)皿，37℃ 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72 h，觀察菌落生長情況。以涂抹菌不做處理為毒對(duì)照，并以在培養(yǎng)基上涂抹無菌水作為空白對(duì)照。每處理重復(fù)3皿。

1.3 對(duì)病原真菌的消毒試驗(yàn)

向直徑90 mm的無菌平皿中注入20 mL熔化的沙堡瓊脂培養(yǎng)基，凝固，冷卻至室溫。將配制好的菌液在每皿培養(yǎng)基上均勻涂抹3個(gè)直徑為20 mm的菌圈，然后把質(zhì)量濃度為0.2%、0.5%、1.0%、2.0%的消毒劑按60 g/m2均勻撒在培養(yǎng)基上，密封培養(yǎng)皿，白僵菌、綠僵菌在25℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72 h，黃曲霉在30℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72 h，觀察菌落生長情況。以涂抹菌不做處理為毒對(duì)照，并以在培養(yǎng)基上涂抹無菌水作為空白對(duì)照。每處理重復(fù)3皿。

1.4 對(duì)家蠶生理影響試驗(yàn)

二齡起蠶分區(qū)飼養(yǎng)2 d，剔除弱小蠶，定數(shù)，每區(qū)50頭，90%見眠后按60 g/m2撒含量為1.0%的人工飼料消毒劑，同時(shí)設(shè)不撒消毒劑為空白對(duì)照，調(diào)查起蠶率和起蠶體重。

1.5 藥物的穩(wěn)定性試驗(yàn)

配制質(zhì)量濃度為1.0%的消毒劑，置于密封的聚乙烯塑料袋內(nèi)，在溫度為40℃、濕度為80%的條件下保存，放置1、3、30 d后測(cè)其氯溴異氰脲酸的含量。

2 結(jié)果與分析

2.1 人工飼料消毒劑對(duì)病原細(xì)菌和真菌的殺滅效果

結(jié)果（表1、表2）可以看出，人工飼料消毒劑對(duì)靈菌、白僵菌、綠僵菌和曲霉菌殺滅的臨界濃度均為0.5%。

2.2 人工飼料消毒劑對(duì)家蠶起蠶率和體重的影響

2.3 人工飼料消毒劑穩(wěn)定性

配制質(zhì)量濃度為1.0%的人工飼料消毒劑，置于密封的聚乙烯塑料袋內(nèi)，在溫度為40℃、濕度為80%的條件下保存，放置1、3、30 d后，有效氯分別下降了4.6%、13.0%、26.7%，表明氯溴異氰脲酸和膨潤土混合在一起不太穩(wěn)定，應(yīng)當(dāng)分別包裝。

3 討論

本試驗(yàn)研究了以氯溴異氰脲酸和膨潤土為原料的人工飼料專用消毒劑對(duì)家蠶病原的消毒效果。體外培養(yǎng)基抑菌試驗(yàn)表明，該消毒劑對(duì)靈菌、白僵菌、綠僵菌和曲霉菌的最低殺滅質(zhì)量濃度為0.5%，而且含量為1.0%的消毒劑對(duì)家蠶的起蠶率和體重?zé)o不良影響。穩(wěn)定性研究表明，氯溴異氰脲酸和膨潤土混合在一起不太穩(wěn)定，應(yīng)當(dāng)分別包裝，配制后應(yīng)保存在密閉容器內(nèi)，并在24 h內(nèi)用完。綜上所述，人工飼料消毒劑對(duì)家蠶病原細(xì)菌和真菌有較好的殺滅效果，可以在人工飼料養(yǎng)蠶中推廣應(yīng)用。

參 考 文 獻(xiàn)：

[1]

張?jiān)氯A，徐安英.家蠶人工飼料研究進(jìn)展[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2006，34（17）：4326-4327.

[2] 李化秀，張亞平，婁齊年.家蠶原蠶稚蠶人工飼料育研究初報(bào)[J].山東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2005（3）：64-66.

[3] 顧寅鈺，李化秀，施新琴，等.家蠶人工飼料中桑葉粉及大豆粉含量與質(zhì)量對(duì)稚蠶、壯蠶及繭質(zhì)的影響[J].山東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，45（5）：105-107.

[4] 崔為正，王彥文，張國基，等.家蠶人工飼料防腐劑和抗菌素的篩選研究[J].山東農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，1999，30（3）：219-225.

[5] 凌關(guān)庭.食品添加劑手冊(cè)[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，1997.

[6] 師紅梅，毛紅彥，劉雅，等.氯溴異氰脲酸防治幾類主要病害藥效研究[J].河南科技學(xué)院學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2005，33（1）：63-65.

[7] 朱偉，林城，李磊，等.以膨潤土為輔助添加劑固化/穩(wěn)定化污泥的試驗(yàn)研究[J].環(huán)境科學(xué)，2007，28（5）：1020-1024.

[8] 宋吉英.化學(xué)添加劑對(duì)玉米吸收汞的抑制作用研究[J].山東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009（8）：63-65.endprint

摘 要：

體外培養(yǎng)基抑菌試驗(yàn)表明：人工飼料專用消毒劑對(duì)靈菌、白僵菌、綠僵菌和曲霉菌的最低殺滅質(zhì)量濃度為0.5%；生物試驗(yàn)表明：含量為1.0%的消毒劑對(duì)家蠶的生長發(fā)育無不良影響。

關(guān)鍵詞：家蠶；人工飼料；消毒劑；消毒效果

中圖分類號(hào)：S884.1+1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)號(hào)：A 文章編號(hào)：1001-4942（2014）04-0097-03

人工飼料養(yǎng)蠶是適應(yīng)專業(yè)化、規(guī)模化蠶繭生產(chǎn)技術(shù)，提高養(yǎng)蠶工效、節(jié)省飼育設(shè)施的一條重要途徑[1，2]。家蠶人工飼料的主要組成成分是桑葉粉和大豆粉，其含水率高，營養(yǎng)豐富，又需在高溫多濕的環(huán)境條件下用于養(yǎng)蠶，因此極易腐敗變質(zhì)，滋生細(xì)菌和真菌，誘發(fā)家蠶的細(xì)菌性敗血病和僵病，嚴(yán)重影響?zhàn)B蠶效果[3，4]。為防止人工飼料變質(zhì)并保持其品質(zhì)穩(wěn)定性，國內(nèi)外廣泛采用在人工飼料中添加防腐劑。防腐劑是一類能抑制微生物活動(dòng)、防止微生物造成飼料腐敗變質(zhì)，從而延長保質(zhì)期的食品添加劑[5]。在高溫高濕特別是農(nóng)村比較簡陋的養(yǎng)蠶條件下進(jìn)行人工飼料養(yǎng)蠶，僅靠添加防腐劑很難達(dá)到消毒及齡期末除濕干燥的要求，飼料極易霉變，誘發(fā)蠶病，影響家蠶就眠。因此，研制一種既能消毒殺菌又能在齡期末起到除濕止桑的多用途消毒劑，是人工飼育技術(shù)必須解決的問題。

氯溴異氰脲酸（C3HO3N3ClBr）是一種高效、廣譜的內(nèi)吸性殺菌劑，其水溶液呈酸性。將氯溴異氰脲酸藥液噴施在作物表面能緩慢地釋放次溴酸（HOBr）和次氯酸（HOCl），次溴酸的活性是次氯酸的4倍，對(duì)細(xì)菌和真菌有強(qiáng)烈的殺滅作用[6]。

膨潤土是一種無機(jī)高活性火山灰粘土材料，具有強(qiáng)吸水性及離子吸附能力，其主要成分為蒙脫石[7，8]。鑒于氯溴異氰脲酸的殺菌效果和膨潤土的強(qiáng)吸水性，本課題組以氯溴異氰脲酸和膨潤土為原料配制成人工飼料專用消毒劑，對(duì)家蠶病原體進(jìn)行了消毒試驗(yàn)。

1 材料與方法

1.1 材料與藥劑

供試家蠶品種：菁松×皓月，人工飼料飼育。

人工飼料：山東省蠶業(yè)研究所經(jīng)濟(jì)室配制。

供試病原：均由本所蠶病研究室保存。家蠶病原細(xì)菌為本所蠶病室保存的靈菌（Serratia marcescens Bizio），試驗(yàn)時(shí)取菌種一支，加水2～3 mL制成菌懸液，置冰箱中4℃保存?zhèn)溆?。家蠶病原真菌——白僵菌（Beauveria bassiana）、綠僵菌（Nomuraea rileyi Farlow）、黃曲霉（Aspergillus flavus）用蠶蛹培養(yǎng)基繁殖繼代獲取，取分生孢子加適量吐溫-80使其懸浮于滅菌蒸餾水中，經(jīng)2層紗布過濾，白僵菌稀釋至2.0×107 個(gè)/mL，綠僵菌和黃曲霉稀釋至5.0×107個(gè)/mL，置冰箱中4℃保存?zhèn)溆茫４鏁r(shí)間不超過30 d。

供試培養(yǎng)基：營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基：蛋白胨10 g，牛肉膏5 g，氯化鈉5 g，瓊脂15 g，蒸餾水1 000 mL。加熱溶解后調(diào)pH值至 7.2～7.4，分裝，于121℃ 壓力蒸汽滅菌 20 min備用。沙堡瓊脂培養(yǎng)基：葡萄糖40 g，蛋白胨10 g，瓊脂20 g，蒸餾水1 000 mL。將上述成分混合后，加熱至完全溶解，調(diào)pH值至5.6±0.2，于115℃壓力蒸汽滅菌 30 min備用。

供試藥劑：50%氯溴異氰脲酸，由魯西愛農(nóng)化工有限公司提供；膨潤土：由濰坊市坊子區(qū)興隆膨潤土廠提供。

1.2 對(duì)病原細(xì)菌的消毒試驗(yàn)

向直徑90 mm的無菌平皿中注入20 mL熔化的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，凝固，冷卻至室溫。將配制好的靈菌菌液在每皿培養(yǎng)基上均勻涂抹3個(gè)直徑為20 mm的菌圈，然后把質(zhì)量濃度為0.05%、0.1%、0.2%、0.5%、1.0%的消毒劑按60 g/m2均勻撒在培養(yǎng)基上，密封培養(yǎng)皿，37℃ 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72 h，觀察菌落生長情況。以涂抹菌不做處理為毒對(duì)照，并以在培養(yǎng)基上涂抹無菌水作為空白對(duì)照。每處理重復(fù)3皿。

1.3 對(duì)病原真菌的消毒試驗(yàn)

向直徑90 mm的無菌平皿中注入20 mL熔化的沙堡瓊脂培養(yǎng)基，凝固，冷卻至室溫。將配制好的菌液在每皿培養(yǎng)基上均勻涂抹3個(gè)直徑為20 mm的菌圈，然后把質(zhì)量濃度為0.2%、0.5%、1.0%、2.0%的消毒劑按60 g/m2均勻撒在培養(yǎng)基上，密封培養(yǎng)皿，白僵菌、綠僵菌在25℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72 h，黃曲霉在30℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72 h，觀察菌落生長情況。以涂抹菌不做處理為毒對(duì)照，并以在培養(yǎng)基上涂抹無菌水作為空白對(duì)照。每處理重復(fù)3皿。

1.4 對(duì)家蠶生理影響試驗(yàn)

二齡起蠶分區(qū)飼養(yǎng)2 d，剔除弱小蠶，定數(shù)，每區(qū)50頭，90%見眠后按60 g/m2撒含量為1.0%的人工飼料消毒劑，同時(shí)設(shè)不撒消毒劑為空白對(duì)照，調(diào)查起蠶率和起蠶體重。

1.5 藥物的穩(wěn)定性試驗(yàn)

配制質(zhì)量濃度為1.0%的消毒劑，置于密封的聚乙烯塑料袋內(nèi)，在溫度為40℃、濕度為80%的條件下保存，放置1、3、30 d后測(cè)其氯溴異氰脲酸的含量。

2 結(jié)果與分析

2.1 人工飼料消毒劑對(duì)病原細(xì)菌和真菌的殺滅效果

結(jié)果（表1、表2）可以看出，人工飼料消毒劑對(duì)靈菌、白僵菌、綠僵菌和曲霉菌殺滅的臨界濃度均為0.5%。

2.2 人工飼料消毒劑對(duì)家蠶起蠶率和體重的影響

2.3 人工飼料消毒劑穩(wěn)定性

配制質(zhì)量濃度為1.0%的人工飼料消毒劑，置于密封的聚乙烯塑料袋內(nèi)，在溫度為40℃、濕度為80%的條件下保存，放置1、3、30 d后，有效氯分別下降了4.6%、13.0%、26.7%，表明氯溴異氰脲酸和膨潤土混合在一起不太穩(wěn)定，應(yīng)當(dāng)分別包裝。

3 討論

本試驗(yàn)研究了以氯溴異氰脲酸和膨潤土為原料的人工飼料專用消毒劑對(duì)家蠶病原的消毒效果。體外培養(yǎng)基抑菌試驗(yàn)表明，該消毒劑對(duì)靈菌、白僵菌、綠僵菌和曲霉菌的最低殺滅質(zhì)量濃度為0.5%，而且含量為1.0%的消毒劑對(duì)家蠶的起蠶率和體重?zé)o不良影響。穩(wěn)定性研究表明，氯溴異氰脲酸和膨潤土混合在一起不太穩(wěn)定，應(yīng)當(dāng)分別包裝，配制后應(yīng)保存在密閉容器內(nèi)，并在24 h內(nèi)用完。綜上所述，人工飼料消毒劑對(duì)家蠶病原細(xì)菌和真菌有較好的殺滅效果，可以在人工飼料養(yǎng)蠶中推廣應(yīng)用。

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