活血通竅方提取液抗前列腺增生的實驗研究

胡 露，李 鵬，盧海波，沙 皖，郭特鎏，夏子昌，韓 麗

活血通竅方提取液抗前列腺增生的實驗研究

胡 露，李 鵬，盧海波，沙 皖，郭特鎏，夏子昌，韓 麗

目的 觀察活血通竅方提取液對前列腺增生動物模型的影響。方法 應(yīng)用丙酸睪丸酮復(fù)制小鼠前列腺增生模型，探討活血通竅方提取液抗前列腺增生的作用；應(yīng)用去氧腎上腺素注射液致大鼠膀胱內(nèi)壓升高動物模型，探討活血通竅方提取液對膀胱α腎上腺素能受體的作用。結(jié)果 活血通竅方提取液可顯著減輕鼠前列腺增生模型的前列腺濕重及其臟器指數(shù)，還可顯著降低靜脈注射去氧腎上腺素前大鼠基礎(chǔ)膀胱內(nèi)壓值，同時也可降低靜脈注射去氧腎上腺素所致的大鼠膀胱內(nèi)壓升高，減少其膀胱內(nèi)壓的變化值，活血通竅方療效明顯優(yōu)于復(fù)方天益膠囊。結(jié)論 活血通竅方提取液治療前列腺增生癥明顯優(yōu)于復(fù)方天益膠囊，具有更好的應(yīng)用前景，作用機理可能與該藥抑制前列腺體積增生和拮抗α腎上腺素能受體介導(dǎo)的平滑肌張力增加有關(guān)。

活血通竅方；前列腺；增生；動物實驗；膀胱內(nèi)壓

活血通竅方是對解放軍77156部隊醫(yī)院的院內(nèi)制劑復(fù)方天益膠囊進行劑量配比優(yōu)化而成的臨床協(xié)定處方，具有化瘀散結(jié)、通利水道之功效，能較快緩解良性前列腺增生癥(benign prostatic hyperplasia，BPH)患者的排尿困難癥狀，長期服用還能縮小前列腺體積，本實驗旨在通過動物實驗研究，來探討其治療前列腺增生的作用機制。

1 材料與方法

1.1 主要試劑與設(shè)備 活血通竅方提取液：為棕色浸膏，其中益母草、皂角刺采用水煎煮提取，蜣螂采用乙醇回流提取，合并提取液濃縮成浸膏，1 g浸膏相當(dāng)于7 g原生藥；批號：20121203，由解放軍452醫(yī)院制劑室提供，臨用前用蒸餾水稀釋成所需濃度的混懸液備用，本實驗劑量按原生藥g/kg計算；陽性藥：復(fù)方天益膠囊：0.4 g/粒，解放軍77156部隊醫(yī)院院內(nèi)制劑，批準(zhǔn)文號：成制字(2011)F17002，主要成分：益母草、皂角刺等，臨用前用蒸餾水稀釋成所需濃度的混懸液備用，本實驗劑量按原生藥g/kg計算；丙酸睪丸酮注射液(1 ml/支，批號為090702，上海通用藥業(yè)股份有限公司)，臨用前用食用油配成所需濃度的油溶液備用；鹽酸去氧腎上腺素注射液(1.0 ml/支，批號為100501，上海禾豐制藥有限公司)，臨用前用生理鹽水配成所需濃度的溶液備用。16道生理記錄儀(MP150，美國BIOPAC公司)。

1.2 動物 昆明種小鼠：雄性，8 w齡，27～33 g；SD大鼠：雄性，體重為280～350 g，均由成都中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心提供(合格證號：川實動管第7號)。

1.3 方法

1.3.1 對小鼠前列腺增生模型的影響[1]取小鼠72只，隨機分為活血通竅方高劑量組(5 g/kg)、中劑量組(2.5 g/kg)、低劑量組(1.25 g/kg)，復(fù)方天益膠囊組(8.6 g/kg)、空白組和模型組，每組12只，每天灌胃給藥1次，連續(xù)3 w，空白組和模型組則給以等體積的蒸餾水。同時，除空白組外，其余各組皮下注射丙酸睪丸酮5 mg/kg，1次/d，連續(xù)3 w。末次給藥后24 h，處死動物，取前列腺稱濕重，并計算其臟器指數(shù)。

1.3.2 對大鼠膀胱內(nèi)壓升高動物模型的影響[2]取大鼠50只，隨機分為活血通竅方高劑量組(3.5 g/kg)、中劑量組(1.75 g/kg)、低劑量組(0.875 g/kg)，復(fù)方天益膠囊組(6 g/kg)和模型組，每組10只，每天灌胃給藥2次，連續(xù)3次。末次給藥后30 min，腹腔注射水合氯醛麻醉，仰臥固定，在其恥骨弓上部縱向切開腹部皮膚，暴露膀胱，在膀胱頸上部插入一根細(xì)導(dǎo)管，荷包逢扎固定，用導(dǎo)管通過壓力換能器與16道生理記錄儀連接。測定前先排空膀胱，通過導(dǎo)管向膀胱注入生理鹽水0.3 ml/只，穩(wěn)定10 min后，測定其膀胱內(nèi)壓；然后靜脈注射鹽酸去氧腎上腺素注射液1.6 mg/kg，觀察并記錄靜脈注射藥物后膀胱內(nèi)壓的變化，并計算膀胱內(nèi)壓最大值與基礎(chǔ)值的差值。

2 結(jié)果

2.1 對小鼠前列腺增生模型的影響 與空白組比較，模型組小鼠在注射丙酸睪丸酮3 w后，其前列腺濕重及其臟器指數(shù)均顯著增加(P<0.05)，提示模型成功；與模型組比較，活血通竅方高、中劑量組和復(fù)方天益膠囊組可顯著減輕前列腺濕重及其臟器指數(shù)(P<0.05)，提示活血通竅方和復(fù)方天益膠囊可對抗丙酸睪丸酮所致的前列腺增生作用，活血通竅方低劑量組療效不明顯；但活血通竅方高、中劑量組療效優(yōu)于復(fù)方天益膠囊(P<0.05)。見表1。

表1 對丙酸睪丸酮致小鼠前列腺增生模型的影響(n=12)

注：與空白組比較，①P<0.05；與模型組相比，②P<0.05；與復(fù)方天益膠囊相比，③P<0.05

2.2 對大鼠膀胱內(nèi)壓升高動物模型的影響 大鼠在靜脈注射去氧腎上腺素后，其膀胱內(nèi)壓顯著升高。與模型組比較，活血通竅方高、中劑量組可顯著降低靜脈注射去氧腎上腺素前大鼠的基礎(chǔ)膀胱內(nèi)壓值(P<0.05)，同時也可降低靜脈注射去氧腎上腺素所致的膀胱內(nèi)壓升高，減少其膀胱內(nèi)壓的變化值，且效果優(yōu)于復(fù)方天益膠囊(P<0.05)，而低劑量組療效不明顯(P>0.05)。提示活血通竅方可顯著降低大鼠膀胱內(nèi)壓，這種作用可能與阻斷α腎上腺素能受體有關(guān)。見表2。

表2 對大鼠膀胱內(nèi)壓升高動物模型的影響(n=10)

注：與模型組比較，①P<0.05；與復(fù)方天益膠囊比較，②P<0.05

3 討論

BPH常見于老年男性，其發(fā)病率隨年齡增大而增高，據(jù)報道，在50歲以上人群BPH患病率為40%～50%，在>80歲人群超過80%[3]。BPH屬于中醫(yī)“癃閉”、“癥積”范疇，發(fā)病機理與尿路瘀阻有關(guān)。尿路阻塞瘀血敗精，或腫塊結(jié)石，阻塞尿道，小便難以排出。實驗研究表明，BPH患者存在微循環(huán)障礙和血液流變學(xué)異常，其可作為血瘀的客觀辨證標(biāo)準(zhǔn)之一[4]。

活血通竅方是對解放軍77156部隊醫(yī)院治療前列腺增生癥的院內(nèi)制劑復(fù)方天益膠囊進行劑量配比優(yōu)化組方，由三味藥物(益母草、皂角刺、蜣螂)組成，作為醫(yī)院協(xié)定處方，具有化瘀散結(jié)、通利水道之功效。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究證明，益母草含益母草堿、水蘇堿、益母草定、益母草寧等多種生物堿及苯甲酸、氯化鉀等。益母草具有抗血小板聚集、降低血液黏滯度，利尿，增強膀胱逼尿肌功能作用[5-8]。藥理研究證明，蜣螂乙醇提取物有抗前列腺增生的作用[9]，皂角刺具有抗菌、抗炎、抗病毒、免疫調(diào)節(jié)、抗凝血和抗腫瘤等作用[10-14]。前列腺增生屬于良性腫瘤，現(xiàn)今中藥復(fù)方治療BPH的報道多有選用皂角刺，取其散結(jié)消腫功效。

引起B(yǎng)PH的病理生理變化主要有兩個因素：靜力性因素和動力性因素，前者主要是前列腺體積增大壓迫尿道，后者主要是前列腺平滑肌張力增高，而前列腺平滑肌的張力增加主要是由α腎上腺素能受體所介導(dǎo)的。本研究結(jié)果表明，活血通竅方和復(fù)方天益膠囊可顯著減輕丙酸睪丸酮小鼠的前列腺濕重及其臟器指數(shù)，說明其可對抗丙酸睪丸酮致前列腺增生的作用；活血通竅方可顯著降低靜脈注射去氧腎上腺素前基礎(chǔ)膀胱內(nèi)壓值，同時也可降低靜脈注射去氧腎上腺素所致的膀胱內(nèi)壓升高，減少其膀胱內(nèi)壓的變化值，其療效優(yōu)于復(fù)方天益膠囊，這種作用可能與阻斷α腎上腺素能受體的有關(guān)。

本實驗結(jié)果揭示，活血通竅方既可抑制BPH的靜力性因素，又可抑制BPH的動力性因素，從而達到治療BPH的目的，其療效明顯優(yōu)于復(fù)方天益膠囊，值得推廣使用。

[1] 陳奇.中藥藥效研究思路與方法[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2005:962.

[2] Yatkin E,Streng T,Kauppila ML,et al.The soy effect in the disease models of nonbacterial prostatitis and obstructive voiding[J].Exp Biol Med,2007,232:674-681.

[3] Lepor H,Henry D,Laddu AR.The efficacy and safety of terazos in for the treatment of symptomatic BPH[J].Prostate,1991,18(4):345-355.

[4] 何清湖.前列腺增生癥腎虛血瘀病機探討[J].湖南中醫(yī)學(xué)院學(xué)報,1997,17(2):8.

[5] 阮金蘭,杜俊蓉,曾慶忠,等.益母草的化學(xué)、藥理和臨床研究進展[J].中草藥,2003,34(11):附15-18.

[6] 孟祥云,楊敬秋.益母草的研究進展[J].黑龍江醫(yī)藥,2007,20(5):467.

[7] 丁伯平.益母草堿對急性大鼠血液流變學(xué)的影響[J].中國中醫(yī)藥科技,2004(1):36-37.

[8] 晁志,馬麗玲,周秀佳.益母草中生物堿成分對大鼠的利尿作用研究[J].時珍國醫(yī)國藥,2005,16(1):11-12.

[9] 趙興梅,朱敏,楊明,等.蜣螂抗實驗性前列腺增生作用研究[J].中藥藥理與臨床,2006,22(5):73-74.

[10] 張?zhí)祈?郭衛(wèi).天丁顆粒治療急性闌尾炎83例臨床觀察[J].中藥材,2004,27(6):465.

[11] 陳玉英,郭衛(wèi),張?zhí)祈?等.天丁顆粒治療慢性結(jié)腸炎98例[J].現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生,2005,21(16):2190.

[12] 徐輝.中藥外敷內(nèi)服治療慢性盆腔炎35例療效觀察[J].河北中醫(yī),2006,28(6):432.

[13] 王明武.汪達成辨治胃癌的臨床經(jīng)驗[J].江蘇中醫(yī)藥,2006,27(9):18-19.

[14] 熊燕子.中西醫(yī)結(jié)合治療中晚期肺癌 32例療效觀察[J].湖南中醫(yī)雜志,2006,22(3):15-16.

Experimental research of anti-prostatic hyperplasia treatment by the extract of Huoxue Tongqiao formula

Hu Lu1,Li Peng1,Lu Haibo1,Sha Wan1,Guo Teliu1,Xia Zichang2,Han Li3

1.Hospital 452 of PLA,Chengdu,Sichuan,610021,China;2.Hospital of Unit 77156 of PLA,Leshan,Sichuan,614000,China;3.School of Pharmacy,Chengdu University of Traditional Chinese Medicine,Chengdu,Sichuan,610000,China

Objective To observe the effects of the Huoxue Tongqiao formula extract on the animal model of prostatic hyperplasia.Methods Testosterone propionate was used to replicate the mouse model of prostatic hyperplasia.The effects of the Huoxue Tongqiao formula extract on anti-prostatic hyperplasia were discussed.The injection with phenylephrine was carried out to make the rat model of high intravesical pressure.The effects of Huoxue Tongqiao formula extract on adrenoceptor in bladder were discussed.Results The extract of Huoxue Tongqiao formula could significantly decrease the humid weight of prostate,its viscera index,the rats' basic intra-bladder pressure before the intravenous injection with phenylephrine,and also the rising of the intravesical pressure caused by the injection.In the aspect of reducing the change values of the intravesical pressure,the Huoxue Tongqiao formula was superior to compound Tianyi capsule.Conclusion The extract of Huoxue Tongqiao formula has superior curative effect on prostate hyperplasia than compound Tianyi capsule and also a better application prospect.Its mechanism may be relevant to its inhibition of prostate volume hyperplasia and the increase of α-adrenoceptor antagonist mediated smooth muscular tension.

Huoxue Tongqiao formula;prostate;hyperplasia;animal experiment;intravesical pressure

610021 成都，解放軍452醫(yī)院(胡 露，李 鵬，盧海波，沙 皖，郭特鎏)；解放軍77156部隊醫(yī)院(夏子昌)； 成都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院(韓 麗)

郭特鎏，E-mail：kyguotl@126.com

R 697.32

A

1004-0188(2014)02-0146-04

10.3969/j.issn.1004-0188.2014.02.011

2013-11-08)