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    臨床生化檢驗(yàn)中改良終點(diǎn)法和原終點(diǎn)法的應(yīng)用比較

    2014-07-18 12:06:54張士君
    關(guān)鍵詞:法測(cè)定精密度試劑

    張士君

    臨床生化檢驗(yàn)中改良終點(diǎn)法和原終點(diǎn)法的應(yīng)用比較

    張士君

    目的比較改良終點(diǎn)法和原終點(diǎn)法在臨床生化檢驗(yàn)中的應(yīng)用。方法以氧化酶法對(duì)血清葡萄糖進(jìn)行測(cè)定為例, 依據(jù)美國(guó)國(guó)家臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(NCCLS)制定的評(píng)價(jià)方案, 比較分析改良終點(diǎn)法和原終點(diǎn)法的相關(guān)性, 并評(píng)價(jià)二者的精密度。結(jié)果改良終點(diǎn)法和原終點(diǎn)法的檢測(cè)結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);與終點(diǎn)法比較, 正常濃度下改良終點(diǎn)法測(cè)定的批內(nèi)CV和總CV明顯更高, 異常濃度下明顯更低, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論臨床生化檢驗(yàn)中改良終點(diǎn)法的精密度明顯高于原終點(diǎn)法, 臨床推廣應(yīng)用價(jià)值顯著。

    生化檢驗(yàn);改良終點(diǎn)法;原終點(diǎn)法

    終點(diǎn)法是臨床生化檢驗(yàn)中最常用的一種檢測(cè)方法, 它計(jì)算待測(cè)物濃度的方法為混合樣品和試劑, 反應(yīng)一定時(shí)間后達(dá)到平衡點(diǎn)(終點(diǎn))。一點(diǎn)終點(diǎn)法和兩點(diǎn)終點(diǎn)法是終點(diǎn)法的兩個(gè)主要類型[1], 依據(jù)方法學(xué)理論, 作者在對(duì)程序進(jìn)行測(cè)定的過程中將改良一點(diǎn)終點(diǎn)法設(shè)計(jì)了出來, 同時(shí)以氧化酶法對(duì)血清葡萄糖進(jìn)行測(cè)定為例, 依據(jù)NCCLS制定的評(píng)價(jià)方案, 比較分析了改良終點(diǎn)法和原終點(diǎn)法的相關(guān)性, 并評(píng)價(jià)了二者的精密度, 現(xiàn)報(bào)告如下。

    1 材料與方法

    1.1檢驗(yàn)材料 所用儀器為MODULAR DPP 全自動(dòng)生化分析儀, 在測(cè)定時(shí)保證儀器的工作狀態(tài)良好;所用試劑為L(zhǎng)ot No.522 UN/2標(biāo)準(zhǔn)血清和Level2-780UN、Level 3-597UE質(zhì)控血清, 所用試劑盒為液體單試劑型(氧化酶法)葡萄糖測(cè)定試劑盒;所用標(biāo)本為血清標(biāo)本, 這些標(biāo)本均沒有溶血、脂濁等, 1 h內(nèi)完成所有檢測(cè);葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液的精確規(guī)格[2.00 g/dl (111.00 mmol/L)]。

    1.2檢驗(yàn)方法

    1.2.1相關(guān)性比較 定標(biāo)時(shí)運(yùn)用RANDOX標(biāo)準(zhǔn)血清, 室內(nèi)質(zhì)控在每次測(cè)定中必不可少。依據(jù)NCCLS 制定的評(píng)價(jià)方案,每天將10份臨床標(biāo)本收集起來, 這些標(biāo)本的葡萄糖濃度有高、中、低三個(gè)類型, 按1-10號(hào)順序分別運(yùn)用改良終點(diǎn)法與原終點(diǎn)法測(cè)定, 然后按10-1的順序分別運(yùn)用改良終點(diǎn)法與原終點(diǎn)法測(cè)定, 取兩次測(cè)量結(jié)果的均值。進(jìn)行10 d的連續(xù)測(cè)量, 標(biāo)本數(shù)為200份, 運(yùn)用配對(duì)t檢驗(yàn)及直線回歸分析兩種方法所得結(jié)果。改良終點(diǎn)法和原終點(diǎn)法的測(cè)光點(diǎn)、波長(zhǎng)、樣品量、試劑量R1、反應(yīng)方向、單點(diǎn)定標(biāo)參數(shù)具體見表1。

    表1 改良終點(diǎn)法與原終點(diǎn)法的程序參數(shù)設(shè)置(葡萄糖測(cè)定)

    1.2.2精密度 在對(duì)精密度進(jìn)行測(cè)算時(shí)嚴(yán)格依據(jù)NCCLS制定的評(píng)價(jià)方案, 將2份質(zhì)控血清選取出來, 其中一份具有正常的濃度, 另一份具有異常的濃度, 對(duì)其進(jìn)行復(fù)溶, 復(fù)溶時(shí)嚴(yán)格依據(jù)說明書, 然后將其在塑料管中分裝, 每管250 μl,在-20℃的溫度下將封閉管口的兩種液體冷凍保存, 每次使用前和使用后分別讓其融化到室溫和丟棄, 每次使用過程中雙份測(cè)定每份濃度的質(zhì)控血清, 試驗(yàn)做到定時(shí)定點(diǎn), 2批/d,上、下午各1次, 共進(jìn)行20 d的測(cè)定, 同時(shí)進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控,計(jì)算出批內(nèi)的不精密度, 然后計(jì)算出總不精密度。

    1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS17.0處理本次研究中各項(xiàng)臨床指標(biāo)。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,均采用配對(duì)t檢驗(yàn)。P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1相關(guān)性 回歸方程為Y=1.0112 X-0.0381, r=0.9992(n=100),改良終點(diǎn)法與原終點(diǎn)法測(cè)定結(jié)果之間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

    2.2精密度 正常濃度下改良終點(diǎn)法測(cè)定的批內(nèi)CV和總CV均明顯比原終點(diǎn)法高, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05), 異常濃度下改良終點(diǎn)法測(cè)定的批內(nèi)CV和總CV均明顯比原終點(diǎn)法低, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。具體見表2。

    表2 改良終點(diǎn)法與原終點(diǎn)法測(cè)定的精密度結(jié)果比較

    3 討論

    近年來, 在生化檢驗(yàn)中, 終點(diǎn)法得到了日益廣泛的應(yīng)用,總蛋白雙縮脲法、葡萄糖氧化酶法等是臨床生化檢驗(yàn)中的常用實(shí)驗(yàn), 極具代表性[2]。通常情況下, 臨床手工操作完成終點(diǎn)法。在對(duì)終點(diǎn)法進(jìn)行改良的過程中嚴(yán)格依據(jù)了其檢測(cè)原理,即減半混合樣品和試劑量, 前提是樣品和試劑的比例保持不變, 在終點(diǎn)前(儀器測(cè)光前)將等量的水加入其中均勻稀釋,然后對(duì)其吸光度進(jìn)行測(cè)定。在將水加入第二試劑的情況下,在全自動(dòng)生化分析儀上, 可以使單試劑終點(diǎn)法和雙試劑終點(diǎn)法相互轉(zhuǎn)換;在第三試劑中注水的情況下, 雙試劑終點(diǎn)法和三試劑終點(diǎn)法也可以相互轉(zhuǎn)換。

    隨著全自動(dòng)生化分析儀的日益廣泛的應(yīng)用, 生化分析的智能化、微量化日益突出, 目前廣大檢驗(yàn)工作者的一個(gè)工作和研究重點(diǎn)就是在對(duì)檢測(cè)方法進(jìn)行有效改良的過程中運(yùn)用先進(jìn)的檢測(cè)設(shè)備, 從而將試劑成本減少到最低限度[3]。作者在臨床生化檢驗(yàn)工作中對(duì)終點(diǎn)法進(jìn)行了改良, 經(jīng)室內(nèi)質(zhì)控及室間質(zhì)量評(píng)價(jià)所獲取的臨床效果是令人極為滿意的, 通常情況下不需要稀釋高濃度標(biāo)本, 這是因?yàn)闇y(cè)定線性范圍較寬, 同時(shí)可以將原終點(diǎn)法中所使用的試劑量減半, 從而達(dá)到了將實(shí)際成本減少到最低限度的目的。

    綜上所述, 在臨床生化檢驗(yàn)中高濃度時(shí)改良終點(diǎn)法的精密度比原終點(diǎn)法優(yōu), 極大節(jié)約了成本, 值得在臨床廣為推廣。

    [1] 高小文, 孔花娟, 李筱, 等.葡萄糖氧化酶雙試劑終點(diǎn)法測(cè)量模式的系統(tǒng)分析.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床 , 2014(1):49-51.

    [2] 魯鴻昊, 高靜, 董振南, 等.終點(diǎn)法測(cè)定缺血修飾白蛋白(IMA)的評(píng)價(jià)及其應(yīng)用研究.標(biāo)記免疫分析與臨床, 2012, 19(1):44-46.

    [3] 黃健, 張劉冬.改良終點(diǎn)法在臨床生化檢驗(yàn)中的應(yīng)用探討.海南醫(yī)學(xué), 2010, 21(22):46-47.

    2014-06-04]

    256410 山東省淄博市桓臺(tái)縣果里醫(yī)院檢驗(yàn)科

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