甘草酸二銨與三種含果糖輸液配伍的穩(wěn)定性研究

夏迎春吳明釵林 潔陳 潔

1浙江省溫州市中醫(yī)院藥劑科 溫州 325000 2溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第三醫(yī)院藥劑科

3溫州醫(yī)科大學(xué)附屬仁濟(jì)學(xué)院

·藥學(xué)園地·

甘草酸二銨與三種含果糖輸液配伍的穩(wěn)定性研究

夏迎春1吳明釵2林 潔2陳 潔3

1浙江省溫州市中醫(yī)院藥劑科 溫州 325000 2溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第三醫(yī)院藥劑科

3溫州醫(yī)科大學(xué)附屬仁濟(jì)學(xué)院

甘草酸二銨；果糖；轉(zhuǎn)化糖；配伍；穩(wěn)定性

甘草酸二銨（diammonium glycyrrhizinate）具有較強(qiáng)的抗炎、保護(hù)肝細(xì)胞及改善肝功能的作用[1]，臨床可見甘草酸二銨注射液與含果糖輸液聯(lián)合用于同時患有肝病的糖尿病患者。本文模擬臨床常用濃度，考察甘草酸二銨注射液與果糖注射液、轉(zhuǎn)化糖注射液（含5%果糖和5%葡萄糖）、果糖氯化鈉注射液配伍的穩(wěn)定性，為臨床配伍用藥提供參考。

1 儀器和試藥

1.1儀 器 BECKMAN-126型高效液相色譜儀（125泵，166檢測器，美國貝克曼庫爾特）、電熱恒溫水溫箱（上海醫(yī)用恒溫設(shè)備廠）、電子分析天平（梅特勒-托利多儀器有限公司）、PHSJ-4型pH計(jì)（上海雷磁儀器廠）。

1.2試 藥 注射用甘草酸二銨（山東羅欣藥業(yè)股份有限公司，150mg，批號513062242）、甘草酸二銨注射液（江蘇正大天晴藥業(yè)股份有限公司，10mL：50mg，批號130904204）、果糖注射液（安徽豐原藥業(yè)股份有限公司，250mL：25g，批號13081292）、轉(zhuǎn)化糖注射液（四川美大康佳樂藥業(yè)有限公司，250mL：12.5g12.5g，批號13071164）、果糖氯化鈉注射液（南京小營藥業(yè)集團(tuán)有限公司，規(guī)格：500mL：25g，批號：12013010406）；乙腈、甲醇為色譜純；磷酸、磷酸二氫鉀等為分析純。

2 方法

2.1外觀及pH測定 取甘草酸二銨注射液30mL分別與果糖注射液、轉(zhuǎn)化糖注射液、果糖氯化鈉注射液250mL配伍，置25℃水浴箱中，于0、1、2、4、6h取樣，以白紙為背景觀察溶液外觀變化，并測定pH值。

2.2含量測定[2]

2.2.1色譜條件 色譜柱：依利特Hypersil ODS（φ4.6mm×250mm，5μm）；流動相：乙腈：磷酸鹽緩沖液（pH=7.0，磷酸二氫鉀6.8g，0.1mol/L 291mL，加水稀釋至1000mL）=26.5：73.5，檢測波長：253nm；流速：1.0mL/min；柱溫：常溫；進(jìn)樣量：20μL。

2.2.2色譜行為 以2.2.1項(xiàng)條件，分別測定注射用甘草酸二銨、果糖注射液、果糖氯化鈉注射液、轉(zhuǎn)化糖注射液，以及甘草酸二銨分別加上述三種含果糖輸液的色譜圖，結(jié)果見圖1。

2.2.3標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 精密稱取甘草酸二銨50.0mg置50mL量瓶中，加純化水稀釋至刻度，搖勻，依次精密量取1、2、4、6、8、10mL分別置于10mL量瓶中，用純化水稀釋至刻度，制得100、200、400、600、800、1000mg/L溶液，按上述色譜條件分別進(jìn)樣，記錄色譜峰面積，以標(biāo)準(zhǔn)液濃度C為橫坐標(biāo)，峰面積A進(jìn)行回歸計(jì)算，得出回歸方程：A=12491.82*C+24768.28；相關(guān)系數(shù)r=0.9999（n=3），樣品濃度在100～1000mg/L的范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系。

2.2.4準(zhǔn)確度試驗(yàn) 取甘草酸二銨加純化水制成濃度為500、600、700mg/L的3種濃度的溶液各3份，按上述測定條件測定其含量，將實(shí)測值與理論值比較計(jì)算回收率，其結(jié)果分別為104.1%、103.2%、104.5%（n=9）。

2.2.5精密度試驗(yàn) 取甘草酸二銨加純化水制成濃度為500、600、700mg/L的3種濃度的溶液各5份，按上述測定條件測定其含量，計(jì)算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD%，其結(jié)果分別為1.01%、0.98%、0.94%（n=5），表明精密度良好。

2.3配伍穩(wěn)定性試驗(yàn) 模擬臨床用藥濃度，取甘草酸二銨注射液各30mL，分別與果糖注射液、轉(zhuǎn)化糖注射液、果糖氯化鈉注射液各250mL混合，制得濃度約600mg/L的輸液，置25℃水浴箱中，分別于0、1、2、4、6h取樣，觀察外觀，測定pH值和含量。

圖1 高效液相色譜圖

3 結(jié)果

3.1外觀及pH 按照2.3項(xiàng)及2.1項(xiàng)的要求進(jìn)行觀察和測定，三種配伍溶液在6h內(nèi)均澄明，無渾濁和可見異物，其pH測定結(jié)果見表1。

表1 甘草酸二銨與3種輸液配伍后的pH值

3.2含量測定 按2.3項(xiàng)下要求進(jìn)行配伍穩(wěn)定性試驗(yàn)，以2.2.1項(xiàng)下的色譜條件進(jìn)樣，測定0、1、2、4、6h時甘草酸二銨的含量，并以0h的濃度為參照，計(jì)算相對百分含量。結(jié)果見表2。

表2 甘草酸二銨與3種輸液配伍后的含量變化

4 討 論

甘草酸二銨（diammonium glycyrrhizinate）是從甘草中分離、篩選出的α體甘草酸二銨鹽，具有較強(qiáng)的抗炎、保護(hù)肝細(xì)胞及改善肝功能的作用，另外本品還具有抗過敏，抑制鈣離子內(nèi)流，免疫調(diào)節(jié)及抗病毒作用，主要用于伴有丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶升高的慢性遷延性肝炎及慢性活動性肝炎[1]。甘草酸二銨藥理研究表明，小鼠口服能減輕因四氯化碳，硫代乙酰胺和D-氨基半乳酸引起的血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶及谷草轉(zhuǎn)氨酶升高。還能明顯減輕D-氨基半乳酸對肝臟的形態(tài)損傷和改善免疫因子對肝臟形態(tài)的慢性損傷[3-4]。

果糖與葡萄糖相比，其在體內(nèi)代謝方式及臨床應(yīng)用有更顯著優(yōu)勢。果糖代謝速度較快，易被機(jī)體吸收利用，果糖激酶的活性不依賴胰島素調(diào)控，可在無胰島素的情況下代謝為糖原，有效降低血糖的波動，適合糖尿病患者和肝病患者使用，并且能有效減少體內(nèi)游離脂肪酸氧化，減少酮癥酸中毒患者的癥狀[5]。

鑒于上述原因，將甘草酸二銨注射液配伍在含果糖輸液中用于治療同時患有肝病和糖尿病的患者,具有臨床意義。

甘草酸二銨注射液在25℃下，與果糖、轉(zhuǎn)化糖、果糖氯化鈉三種輸液分別配伍后，6h內(nèi)外觀無變化，pH值基本無變化，含量變化＜5%，符合配伍穩(wěn)定性的要求，可以配伍使用。

文獻(xiàn)報(bào)道[6-8]，經(jīng)反復(fù)試驗(yàn)，采用磷酸鹽緩沖液（pH7.0）—乙腈溶液為流動相，乙腈-磷酸鹽緩沖液（pH7.0）比例為26.5：73.5時，主成分分離好，峰型佳，符合本試驗(yàn)含量測定的要求。

果糖為葡萄糖的同分異構(gòu)體，兩者理化性質(zhì)有明顯區(qū)別，果糖注射液不宜直接替代葡萄糖注射液用于靜脈注射劑的溶解和稀釋。如果臨床需要果糖注射液替代葡萄糖注射液作為靜脈注射劑的溶媒，應(yīng)進(jìn)行配伍穩(wěn)定性試驗(yàn)。

［1］趙蓉，呂凌.甘草酸二銨藥理研究和臨床應(yīng)用進(jìn)展［J］.亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2008，04（03）：31-36.

［2］吳明釵，陳鎮(zhèn)國，林潔，等.氟康唑眼用即型凝膠的制備及質(zhì)量控制［J］.中國藥房，2012，23（17）：1602-1603.

［3］ Hui Guo，Ai long，et al.The effect of diammonium glycyrrhizinate to prevent liver cell apoptosis induced by endotoxins［J］.Chinese joural of hepatology，2004，12（03）：159-152.

［4］Zhao X，Deng B，Xu XY，et al.Glycyrrhizinate reduces portal hypertension in isolated perfused rat livers with chronic hepatitis［J］.Wprld journal of gastroenterology，2013，19（36）：69-76.

［5］李慧芳.果糖注射液對2型糖尿病患者血糖及胰島素的影響［J］.現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2008，17（1）：44-45.

［6］徐柏頤.HPLC法測定甘草酸二銨制劑的含量［J］.江蘇藥學(xué)與臨床研究，2005，13（04）：15-16.

［7］羅奕.HPLC法測定甘利欣注射液中有關(guān)物質(zhì)的含量［J］.中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2008，14（06）：105-107.

［8］張軼華，姜建國，黃靜.HPLC法測定甘草酸二銨原料的含量［J］.中國藥事，2011，25（10）：1031-1032.

2014-03-18

修回日期：2014-04-10

浙江省溫州市2014年科技計(jì)劃項(xiàng)目（No.21140010）