高效液相色譜法對小柴胡顆粒劑黃芩苷含量的測定

羅曉霞

高效液相色譜法對小柴胡顆粒劑黃芩苷含量的測定

羅曉霞

目的分析高效液相色譜法（HPLC）對小柴胡顆粒劑中黃芩苷含量的測定。方法采用HPLC法對小柴胡顆粒劑中的黃芩苷含量進(jìn)行測定。結(jié)果經(jīng)過測定，小柴胡顆粒劑中黃芩苷的回收率為100%，RSD為0.96%。結(jié)論采用HPLC法可對小柴胡顆粒劑中黃芩苷含量進(jìn)行準(zhǔn)確測定。

高效液相色譜法；小柴胡顆粒劑；黃芩苷含量

黃芩是小柴胡顆粒劑的主要成分，其中黃芩的主要有效成分為黃芩苷，其主要功效為清熱解毒、抗菌消炎以及降低轉(zhuǎn)氨酶等。在臨床中小柴胡顆粒劑被普遍應(yīng)用于咽炎、肺炎、上呼吸道感染以及急性扁桃腺等疾病的治療。為了提高藥物的臨床效果，需對藥物中各種成分含量進(jìn)行了解[1]。其中 HPLC法在小柴胡顆粒劑黃芩苷測定中具有操作方便、專屬性強，且定量準(zhǔn)確的優(yōu)點[2]，因此本文采取HPLC法對小柴胡顆粒劑中黃芩苷的含量進(jìn)行測定，對其測定結(jié)果進(jìn)行分析，現(xiàn)報告如下。

1 儀器與藥品

1.1 儀器 日本津島生產(chǎn)的高效液相色譜儀 LC-14A。

1.2 藥品 試藥為中國藥品生物制品鑒定所的黃芩苷，用以進(jìn)行含量測定，其批號為110715-200212；甲醇為上海陸都化學(xué)試劑廠生產(chǎn)，其色譜純，其余全部都是分析純；所選用的小柴胡顆粒劑生產(chǎn)批號分別為001122、20030320、20030322、9907088。

2 測定方法

2.1 色譜條件 填充劑為十八烷基硅烷鍵合硅膠，流動相為甲醇-水-磷酸，其比例為45.0:55.0:0.2，檢測波長為315nm。

2.2 對照品溶液制備 選取已經(jīng)過4h 60℃減壓干燥的黃芩苷對照品，精密稱取 30ml，并將其放在100ml量瓶中，然后加入70%的甲醇進(jìn)行稀釋至刻度。

2.3 線性關(guān)系測定 將制備好的對照品溶液精密取出2ml、4ml、6ml以及8ml，分別放置于10ml的量瓶中，加入甲醇進(jìn)行稀釋至刻度，將以上溶液精密吸取10μg，直接注入高效液相色譜儀中，對其峰面積進(jìn)行記錄，其回歸方程為 A=353599C＋56250，r=0.9994。結(jié)果顯示，在溶液濃度為0.0238～0.1190mg·ml-1時，其濃度和峰面積具有良好的線性關(guān)系。

2.4 供試品溶液制備 取小柴胡顆粒劑1g，碾細(xì)，精密稱定1g置于量瓶中，精密加入濃度為70%的乙醇30ml，進(jìn)行20min的超聲處理，放冷過濾后，將濾液放置在量瓶中，采用少量70%的乙醇對其容器和殘渣進(jìn)行分次清洗，并把清洗容器和殘渣的溶液與濾液置于同一量瓶中，加入濃度為70%的乙醇，至刻度。

3 結(jié)果

3.1 精密含量測定 將不同批號的小柴胡顆粒樣品，按2.4項進(jìn)行處理制成供試品溶液，并將其注入液相色譜儀中，對其峰面積進(jìn)行測定，依照外標(biāo)法進(jìn)行計算，經(jīng)過測定，其結(jié)果如表1。

表1 供試品測定結(jié)果

3.2 重現(xiàn)性試驗結(jié)果 按照以上方法，對批號為20030320的樣品進(jìn)行測定，將其測定藥品分為5份，每份含量為5.17mg·g-1，其RSD為1.85%。測定結(jié)果顯示，其重現(xiàn)性良好。

3.3 回收率試驗 對其已經(jīng)進(jìn)行含量測定的供試品進(jìn)行精密稱取，適量即可，并加入一定量的黃芩苷對照品進(jìn)行含量測定，計算回收率，其測定結(jié)果如表2。

表2 回收率試驗結(jié)果(n=5)

4 討論

小柴胡湯是漢代名醫(yī)張仲景首創(chuàng)，藥物組成為生姜、甘草、人參、柴胡、半夏、大棗、黃芩，功效主要為調(diào)理胃腸、舒暢氣機、和解表里等，在臨床外感疾病以及犯少陽證患者治療中均有廣泛應(yīng)用[3]。小柴胡顆粒也就是“小柴胡湯”轉(zhuǎn)化而成，主要是為了滿足現(xiàn)代攜帶和使用方便的需求進(jìn)行生產(chǎn)。其中對黃芩苷含量的測定，主要是對該藥品質(zhì)量進(jìn)行有效保證[4]。經(jīng)過以上測定，可以得出采用HPLC法對小柴胡顆粒劑中黃芩苷含量進(jìn)行測定，行之有效，其測定結(jié)果顯示小柴胡顆粒劑黃芩苷的回收率為100%，RSD為0.96%。曾有報道顯示，采用流動相甲醇-水（45:55）法，對小柴胡顆粒劑中黃芩苷含量進(jìn)行測定，并且未將磷酸加入其中，結(jié)果顯示色譜峰的分離效果非常容易出現(xiàn)拖尾現(xiàn)象，不夠理想。但是在采用HPLC法對此進(jìn)行測定時，不但操作方便、快速，并且其重現(xiàn)性好，可以對臨床中小柴胡顆粒劑用藥的質(zhì)量進(jìn)行控制，且為臨床提供有效的參考資料[5-7]。

對小柴胡顆粒劑中黃芩苷含量進(jìn)行測定時，通過對吸收光譜的分析發(fā)現(xiàn)，在 315mm波長處黃芩苷具有最大吸收量，靈敏度高，可有效確保實驗精度，因此在測定時，可采用315mm作為測定波長。另外其流動相甲醇-水-磷酸間的配合比例為45.0:55.0:0.2，理論搭板數(shù)應(yīng)比3000大，各峰分離度均比1.5大，實驗時間相比較短，輔料不會對含量的測定結(jié)果產(chǎn)生一定影響。就目前測定結(jié)果來看，市場上所銷售的小柴胡顆粒劑中的黃芩苷含量具有較大差異。因此在臨床用藥中，要注意對不同批號小柴胡顆粒劑中黃芩苷含量進(jìn)行分析，以此選擇合適的臨床用量。

[1] 李春紅,梅志強,何兵,等.HPLC同時測定小柴胡顆粒中四種成分的含量[J].瀘州醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2012,35(4):399-401.

[2] 何云.高效液相色譜法測定鼻炎靈膠囊中黃芩苷和麻黃堿的含量[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)刊,2012,14(12):2203-2204.

[3] 郭慶沖,周宗輝,朱美玲.HPLC法測定小柴胡軟膠囊中黃芩苷的含量[J].中醫(yī)藥臨床雜志,2009,21(2):159-160.

[4] 劉逢芹,劉田云,余曉東,等.RP-HPLC考察黃芩、柴胡配伍對黃芩苷成分的影響[J].中國實驗方劑學(xué)雜志,2009,15(7):3-5.

[5] 肖林林,溫建東,吳堅.RP-HPLC法測定小柴胡湯丸中黃芩苷的含量[J].中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用,2011,5(22):66-67.

[6] 張祥偉,羅奇志,伍彪,等.小柴胡湯超微飲片與常規(guī)飲片化學(xué)成分溶出特性的對比研究[J].時珍國醫(yī)國藥,2009,20(11):2750-2752.

[7] 申安,秦松.HPLC法測定三黃感冒合劑中黃芩苷的含量[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)刊,2010,12(9):1623-1624.

Determination of the Content of Baicalin Xiaochaihu Granules by HPLC

Luo Xiaoxia

ObjectiveAnalysis on the determination of the content of Baicalin in Xiaochaihu granules by HPLC.MethodsHPLC method was used to determine the content of Baicalin in Xiaochaihu granules.ResultsAfter the determination of baicalin,recovery of Xiaochaihu granules was rate was 100%,RSD was 0.96%.ConclusionFor determination of Baicalin in Xiaochaihu granules was changed by HPLC method.

High performance liquid chromatography;Xiaochaihu granules;Baicalin

R927.2

A

1673-5846(2014)02-0020-02

廣東省中醫(yī)院，廣東廣州 510120

羅曉霞（1978.11-），女，廣東省廣州人，本科學(xué)歷，廣東省中醫(yī)院藥師，主管藥師。研究方向：藥學(xué)。