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    雙氯芬酸鉀軟膏的制備及其體外累積釋藥率的測定

    2014-06-27 08:10:58常相娜虢紅梅
    陜西科技大學學報 2014年4期
    關鍵詞:雙氯藥率化學試劑

    王 蘭, 顧 欣, 常相娜, 龔 頻, 虢紅梅, 王 雪

    (1.陜西科技大學 生命科學與工程學院, 陜西 西安 710021; 2.陜西新藥技術開發(fā)中心, 陜西 西安 710075)

    0 引言

    雙氯芬酸鉀(Diclofenac Potassium, DP)是一種新型強效非甾體抗炎藥,其能有效抑制環(huán)氧合酶,具有解熱、鎮(zhèn)痛和抗炎等作用[1-5].該藥物外用具有透皮吸收好、起效快和避免肝臟首過作用等優(yōu)點[6],本文擬采用乳化法制備雙氯芬酸鉀軟膏,并考察了Franz擴散池的測定溫度、接收介質(zhì)和不同種類及濃度的促滲劑對藥物體外累積釋藥率的影響.

    1 材料

    雙氯芬酸鉀,上海哈靈生物科技有限公司(批號:100880-200601);白凡士林,南京金陵石油化工公司化工一廠;硬脂酸,天津市東麗區(qū)天大化學試劑廠;液體石蠟,天津市風船化學試劑有限公司;硬脂醇,天津市科密歐化學試劑有限公司;甘油,天津市天力化學試劑有限公司;丙二醇,西安化學試劑廠;吐溫-80,西安化玻站化學廠;司盤-80,天津市河東區(qū)紅巖試劑廠;Azone,天津市博迪化工有限公司;乙酸乙酯,天津市東麗區(qū)天大化學試劑廠;無水乙醇,天津市天力化學試劑有限公司.

    9100型紫外可見分光光度計,國華電器有限公司;RYJ-6A型藥物透皮擴散試驗儀,上海黃海藥檢儀器廠.

    昆明小鼠,購于第四軍醫(yī)大學實驗動物中心.

    2 方法與結(jié)果

    2.1 軟膏的制備[7-9]

    按處方依次稱取白凡士林、硬脂酸、液體石蠟、硬脂醇、吐溫-80和司盤-80置于燒杯中,80 ℃下水浴加熱使其完全熔融,再依次稱取水、甘油和丙二醇置于另一個燒杯中80 ℃水浴下攪拌加入雙氯芬酸鉀使其完全溶解,最后將水相緩慢加入油相,邊加邊攪拌直至形成乳白色的半固體狀軟膏.

    表1 雙氯芬酸鉀軟膏的處方組成

    2.2 體外累積釋藥率方法學的建立

    2.2.1 波長選擇[10]

    (1)對照品溶液制備:精密稱取雙氯芬酸鉀0.2 g,用適量的丙二醇溶解.(2)空白輔料溶液制備:精密稱取軟膏空白輔料0.2 g,其余操作同“對照品溶液制備”.將上述溶液分別在200~500 nm波長范圍內(nèi)掃描,結(jié)果表明,空白輔料在272 nm處無明顯吸收,而對照品在此波長處有最大吸收.由此選定272 nm波長為含量測定波長.兩種溶液的紫外掃描圖譜如圖1所示.

    a:雙氯芬酸鉀對照品; b:空白輔料圖1 紫外掃描圖

    精密稱取雙氯芬酸鉀對照品10 mg,加無水乙醇溶解后定容于50 mL的容量瓶中,分別精密吸取該溶液0.50、0.75、1.00、1.25、1.50 mL置于10 mL的容量瓶中,加無水乙醇至刻度,以無水乙醇作為空白對照,在272 nm波長處測定吸收度.以吸收度(A)對濃度(C)進行回歸得標準曲線方程為A=0.025 7C+0.023 2(r2=0.999 8).

    2.2.2 體外累積釋藥率的測定

    本次研究是應用Franz擴散池法測定雙氯芬酸鉀軟膏的體外累積釋藥率,并依次測定在不同溫度和接收介質(zhì)下軟膏的累積釋藥率.

    (1)測定溫度選擇

    皮膚準備:取新鮮的小鼠鼠皮,用8%左右的硫化鈉浸泡脫毛,脫毛后將鼠皮裁剪成適宜大小備用.

    分別稱取0.05 g軟膏均勻涂抹于鼠皮上,以生理鹽水為接收介質(zhì),置于Franz擴散池中,依次在36 ℃、37 ℃和38 ℃下測定藥物9 h的體外累積釋藥率.結(jié)果顯示,藥物在37 ℃時累積釋藥率達到最大值.由此確定37 ℃為藥物體外釋放實驗的測定溫度,不同測定溫度下藥物的累積釋藥率如表2所示.

    表2 不同測定溫度下藥物的累積釋藥率

    (2)接收介質(zhì)選擇

    皮膚準備:取新鮮的鼠皮,用8%左右的硫化鈉浸泡脫毛,脫毛后將鼠皮裁剪成適宜大小備用.

    分別稱取0.05 g軟膏均勻涂抹于鼠皮上,應用Franz擴散池在37 ℃下分別以生理鹽水和pH=7.0的磷酸鹽緩沖液為接收介質(zhì),以9 h的累積釋藥率為指標.結(jié)果表明,以pH=7.0的磷酸鹽緩沖液為接收介質(zhì)時藥物的累積釋藥率要稍高于以生理鹽水為接收介質(zhì)時藥物的累積釋藥率,由此選定pH=7.0磷酸鹽緩沖液為藥物體外釋藥實驗的接收介質(zhì).不同接收介質(zhì)下藥物的累積釋藥率如表3所示.

    表3 不同接收介質(zhì)下藥物的累積釋藥率

    2.2.3 促滲劑篩選[11]

    在經(jīng)皮給藥制劑中常用的促滲劑可分為7類:(1)Azone及其類似物;(2)亞砜類;(3)萜烯類;(4)有機溶劑類;(5)吡咯烷酮類;(6)表面活性劑類;(7)胺及酰胺類,本次研究選用Azone、乙酸乙酯和乙醇作為皮膚滲透促進劑,并且依次考察了不同濃度下3種促滲劑對藥物體外累積釋藥率的影響.

    皮膚準備:取新鮮的鼠皮,用8%左右的硫化鈉浸泡脫毛,脫毛后將鼠皮裁剪成適宜大小備用.

    應用Franz擴散池,在鼠皮上均勻涂抹含不同促滲劑的雙氯芬酸鉀軟膏約0.20 g.接收液為pH=7.0的磷酸鹽緩沖液,測定溫度為37 ℃.每隔1 h吸取1 mL接收介質(zhì),同時向接收池中補加等體積的接收介質(zhì),以接收介質(zhì)自身作為空白對照,在272 nm處測定吸光度,代入相應的標準方程,計算每小時軟膏中藥物的經(jīng)皮累積釋藥率,結(jié)果顯示如圖2所示.

    以Q對t做線性回歸,回歸方程的斜率即為透皮速率J(μg·cm-2·h-1),含促滲劑組與空白組的J值之比為增滲倍數(shù)(ER),各透皮參數(shù)如表4所示.

    表4 不同促滲劑對雙氯芬酸鉀軟膏體外透皮參數(shù)的影響

    (a)不同濃度Azone對累積釋藥率的影響

    (b)不同濃度乙酸乙酯對累積釋藥率的影響

    (c)不同濃度乙醇對累積釋藥率的影響圖2 不同濃度Azone、乙酸乙酯和乙醇對藥物累積釋藥率的影響

    由表4和圖2可知,三種促滲劑(除1%乙醇)均能不同程度的發(fā)揮提高雙氯芬酸鉀軟膏經(jīng)皮釋藥的作用;在不同濃度和種類的促滲劑中5%乙酸乙酯的促滲效果最佳,其累積釋藥率高達90%以上,透皮速率為2.08μg·cm-2·h-1.

    2.3 質(zhì)量控制[12-14]

    2.3.1 性狀

    本品為均勻、細膩、黏稠適宜的乳白色軟膏.

    2.3.2 耐熱耐寒試驗

    制得的雙氯芬酸鉀軟膏分別置于55 ℃干燥恒溫箱中6 h和-4 ℃冰箱中24 h,結(jié)果顯示軟膏色澤均一,未出現(xiàn)油水相分層現(xiàn)象.

    2.3.3 檢查

    應符合《中華人民共和國藥典》2010版第二部軟膏劑項下的各項規(guī)定.

    3 討論

    綜上所述,雙氯芬酸鉀軟膏的處方組成為:雙氯芬酸鉀、硬脂醇、硬脂酸、液體石蠟、吐溫-80、司盤-80、白凡士林、水、甘油、丙二醇和5%的乙酸乙酯.經(jīng)皮給藥制劑的體外釋藥與促滲劑的種類及其濃度有一定關系,除了本文研究的Azone、乙酸乙酯和乙醇外,還可以嘗試使用天然低毒的揮發(fā)油類促滲劑或?qū)追N促滲劑聯(lián)合使用.

    另外,對于軟膏等經(jīng)皮給藥制劑的體外釋藥評價尚不明確,體外釋藥實驗方法還有待于進一步標準化和規(guī)范化.

    總之,當測定溫度為37 ℃、接收介質(zhì)為磷酸鹽緩沖液(pH=7.0)時軟膏的累積釋藥率高達90%以上和透皮速率為2.08μg·cm-2·h-1,可以達到實驗設計的目的.

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