電針對(duì)阿爾茨海默病模型大鼠學(xué)習(xí)記憶和抗氧化能力的影響

易顯富，張澤月，肖敏，程蕊，宋潔，高翔，穆敬平，彭力

(1.湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬太和醫(yī)院，湖北十堰 442000；2.湖北醫(yī)藥學(xué)院第一臨床醫(yī)學(xué)院，湖北十堰 442000；3.房縣人民醫(yī)院，湖北房縣 442100)

電針對(duì)阿爾茨海默病模型大鼠學(xué)習(xí)記憶和抗氧化能力的影響

易顯富1，張澤月1，肖敏1，程蕊2，宋潔2，高翔3，穆敬平1，彭力1

(1.湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬太和醫(yī)院，湖北十堰 442000；2.湖北醫(yī)藥學(xué)院第一臨床醫(yī)學(xué)院，湖北十堰 442000；3.房縣人民醫(yī)院，湖北房縣 442100)

目的觀察電針對(duì)β淀粉樣蛋白25～35片段(Aβ25～35)所致阿爾茨海默病(A lzheimer's diseases，AD)模型大鼠學(xué)習(xí)記憶能力和腦組織自由基代謝的影響。方法48只健康雌性SD大鼠隨機(jī)分為AD模型組、假手術(shù)組、正常對(duì)照組和電針組，每組12只，采用Aβ25～35建立AD模型，Morris水迷宮觀察大鼠學(xué)習(xí)記憶能力，同時(shí)檢測(cè)腦組織勻漿中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-PX)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)等抗氧化指標(biāo)的水平和乙酰膽脂酶(AchE)、單胺氧化酶(MAO)、一氧化氮(NO)、過(guò)氧化氫酶(Cata-lase，CAT)、乳酸脫氫酶(LDH)的活性。結(jié)果與AD模型組相比，電針組能縮短大鼠的逃避潛伏期(P＜0.01)，明顯增加大鼠的平臺(tái)跨越次數(shù)(P＜0.01)，延長(zhǎng)大鼠在目標(biāo)象限的停留時(shí)間并增高平臺(tái)象限停留路程占總路程的百分比(P＜0.05)，同時(shí)，電針組能明顯升高腦組織勻漿中SOD、CAT、GSH、GSH-Px的含量(P＜0.01)，降低MDA、AchE、MAO、LDH、NO的活性(P＜0.01)。且假手術(shù)組和正常對(duì)照組分別與AD模型組比較，除假手術(shù)組平均速度差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義外，其余各指標(biāo)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論電針可改善AD模型大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力，同時(shí)還能增強(qiáng)機(jī)體的抗氧化能力，對(duì)腦組織中自由基的代謝起到積極的作用。

AD；電針；學(xué)習(xí)記憶能力；抗氧化

阿爾茨海默病(A lzheimer'sdiseases，AD)是一種常見(jiàn)的神經(jīng)系統(tǒng)進(jìn)行性變性疾病，臨床特征包括進(jìn)行性記憶等認(rèn)知障礙和行為障礙[1]。典型的病理學(xué)特征包括神經(jīng)元細(xì)胞內(nèi)神經(jīng)纖維纏結(jié)、細(xì)胞外老年斑以及淀粉樣血管變性，且病因和發(fā)病機(jī)制目前并不明確，因而對(duì)其治療尚無(wú)特效藥物[2]。大量實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)AD與腦組織氧化應(yīng)激有著密切的關(guān)聯(lián)。氧化應(yīng)激(Oxidative Stress，OS)是指機(jī)體在遭受各種有害刺激時(shí)體內(nèi)抗氧化與氧化作用失衡，而使機(jī)體傾向于氧化，從而導(dǎo)致中性粒細(xì)胞炎性浸潤(rùn)，蛋白酶分秘增加，產(chǎn)生大量氧化中間產(chǎn)物，包括體內(nèi)高活性分子如活性氮自由基(RNS)和活性氧自由基(ROS)，過(guò)多的氧化中間產(chǎn)物在體內(nèi)產(chǎn)生負(fù)面作用，導(dǎo)致組織損傷。AD的發(fā)生即為腦組織氧化應(yīng)激作用出現(xiàn)故障，使得抗氧化與氧化作用失衡造成的。相關(guān)臨床試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)針刺療法對(duì)AD具有安全有效、無(wú)毒副作用的優(yōu)勢(shì)[5]，電針治療對(duì)AD模型動(dòng)物學(xué)習(xí)記憶能力的衰退有明顯改善作用，對(duì)腦組織神經(jīng)遞質(zhì)水平、海馬電活動(dòng)及神經(jīng)元、神經(jīng)突觸形態(tài)學(xué)及相關(guān)基因(例如ApoE基因、Tau蛋白等)的表達(dá)等有顯著的調(diào)節(jié)作用[6-7]。本研究通過(guò)應(yīng)用Aβ25～35構(gòu)建AD動(dòng)物模型，探討電針對(duì)AD大鼠學(xué)習(xí)記憶能力和腦組織自由基代謝的影響，為AD的針刺臨床治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)，進(jìn)一步探索非藥物治療AD的新途徑。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組健康雌性SD大鼠48只，由湖北醫(yī)藥學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，飼養(yǎng)于標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)環(huán)境中，自由攝取飲食，實(shí)驗(yàn)操作和處理過(guò)程嚴(yán)格遵守科技部有關(guān)善待實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的規(guī)定。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物合格證號(hào)：SCXK(鄂)2011-0009，4個(gè)月齡，清潔級(jí)，體重(200±34)g，大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后，采用隨機(jī)數(shù)字法將大鼠隨機(jī)分成4組，每組12只：①AD模型組；②假手術(shù)組；③正常對(duì)照組；④電針組。

1.2 主要儀器與試劑Morris水迷宮及視頻分析軟件(上海吉量生物軟件有限公司)，腦立體定位儀(日本成茂SR-5R型)，華佗牌SDZ-Ⅱ電針儀(蘇州醫(yī)療用品廠有限公司)，華佗牌無(wú)菌針灸針(蘇州醫(yī)療用品廠有限公司)，Aβ25～35(Sigma公司)，超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-PX)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、乙酰膽脂酶(AchE)、單胺氧化酶(MAO)、一氧化氮(NO)、過(guò)氧化氫酶(Cata-lase, CAT)、乳酸脫氫酶(LDH)測(cè)定試劑盒均購(gòu)自南京建成生物工程研究所。

1.3 AD模型制備聚集態(tài)Aβ25～35的準(zhǔn)備：按說(shuō)明書將Aβ25～35溶于滅菌生理鹽水中，稀釋為10μg/μl，密封后置于37℃培養(yǎng)箱中孵育1周，老化成具有毒性的聚集狀態(tài)，4℃冰箱保存?zhèn)溆?。在腦立體定位儀下，大鼠雙側(cè)海馬一次性注射聚集態(tài)Aβ 25～35制作AD模型。大鼠稱體質(zhì)量，以10%水合氯醛(400mg/kg)腹腔注射麻醉后固定于腦立體定位儀上(使鼠頭牢固、水平固定)，常規(guī)暴露前囟。定位海馬區(qū)(前囟后3.5mm，旁開2mm，腦膜表面下2.7mm)，鉆孔，1μl微量進(jìn)樣器垂直進(jìn)針，緩慢將聚集態(tài)Aβ25～35注入，每側(cè)1μl(10μg/μl)，注射速度0.2μl/m in，留針15m in，緩慢撤針，使Aβ25～35充分浸潤(rùn)局部組織。造模完成后第15天對(duì)大鼠再次進(jìn)行Y型水迷宮篩選，凡15次測(cè)試中正確次數(shù)較造模前下降1/3者為造模成功。只有模型成功者才進(jìn)入下一步實(shí)驗(yàn)，若出現(xiàn)死亡或不符合條件的大鼠則予以剔除，并遵循隨機(jī)原則補(bǔ)齊動(dòng)物。

1.4 干預(yù)方法造模成功后第2天開始，電針組根據(jù)大鼠常用的針灸穴位，選取雙側(cè)“腎俞”穴(直刺5mm)、雙側(cè)“內(nèi)關(guān)”(斜刺4mm)、“大椎”(斜刺5mm)。采用醫(yī)用15mm，28#無(wú)菌毫針刺入穴位，同側(cè)“腎俞”、“內(nèi)關(guān)”為一對(duì)電極(其中腎俞接負(fù)極，內(nèi)關(guān)接正極)，G6805-Ⅱ型電針治療儀，施予疏密波，疏波2 Hz，密波30 Hz，電流強(qiáng)度1m A，輸出電壓2～4 V，以局部輕顫為度。刺激時(shí)間為30m in/次，1次/d，每周6次，共治療2周。模型組與電針組同時(shí)給予抓取、固定等刺激。假手術(shù)組：雙側(cè)海馬注射等量生理鹽水，余同模型組。正常對(duì)照組：正常飲食，不做任何處理。

1.5 大鼠學(xué)習(xí)記憶能力變化的檢測(cè)(Morris水迷宮實(shí)驗(yàn))Morris水迷宮裝置由不銹鋼圓形水槽、自動(dòng)錄像及計(jì)算機(jī)分析處理系統(tǒng)組成。水迷宮為一直徑150 cm、高50 cm圓形水池，水深25 cm，等分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ及Ⅳ象限，在Ⅱ象限中放置直徑10 cm的圓形黑色站臺(tái)，平臺(tái)距水面2 cm，水溫保持在(23±2)℃，房間內(nèi)光照恒定，無(wú)光線直射在水池內(nèi)，池壁內(nèi)貼有不同形狀及顏色的標(biāo)記物。迷宮上方安裝攝像機(jī)以同步記錄大鼠的運(yùn)動(dòng)軌跡。實(shí)驗(yàn)時(shí)用墨汁將迷宮內(nèi)水染成黑色。采用上海吉量軟件科技有限公司研制開發(fā)的Morris水迷宮視頻分析系統(tǒng)進(jìn)行信息處理，該系統(tǒng)能動(dòng)態(tài)記錄大鼠在水迷宮中游泳的錄像資料，設(shè)定分析參數(shù)，進(jìn)行在線或離線數(shù)據(jù)分析，并提供大鼠上臺(tái)潛伏期、靶象限活動(dòng)時(shí)間百分比、穿臺(tái)次數(shù)、游泳速度、游泳路程等多個(gè)指標(biāo)。實(shí)驗(yàn)前先將大鼠放入迷宮中(不含平臺(tái))自由游泳2m in，每天訓(xùn)練4次，訓(xùn)練2 d以適應(yīng)水環(huán)境。實(shí)驗(yàn)歷時(shí)6 d，分兩個(gè)階段進(jìn)行：(1)定位航行實(shí)驗(yàn)：每只大鼠進(jìn)行4次訓(xùn)練，依次從第Ⅳ、Ⅲ、Ⅱ、Ⅰ象限的入水點(diǎn)面向池壁入水，記錄其從入水到找到平臺(tái)的時(shí)間，即逃避潛伏期(Escape latency)。大鼠爬上平臺(tái)后，讓其在平臺(tái)上停留15 s，如果大鼠在100 s內(nèi)未找到平臺(tái)，則由實(shí)驗(yàn)者將其牽引至平臺(tái)，并在平臺(tái)上停留15 s，潛伏期則記為100 s，每?jī)纱斡?xùn)練間隔1m in，4次訓(xùn)練潛伏期的平均值記為當(dāng)天的逃避潛伏期，共訓(xùn)練5 d。整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中水槽周圍參照物(迷宮外線索)保持不變，同時(shí)實(shí)驗(yàn)者不能在動(dòng)物視力范圍之內(nèi)。(2)空間搜索實(shí)驗(yàn)：第6天開始進(jìn)行空間搜索實(shí)驗(yàn)，撤除平臺(tái)，將大鼠從距離原平臺(tái)位置(Ⅱ象限)較遠(yuǎn)的Ⅳ象限放入水中，記錄大鼠90 s內(nèi)穿越原平臺(tái)目標(biāo)象限的次數(shù)以及有效探索時(shí)間，分別計(jì)算在各象限停留時(shí)間的百分比，以檢測(cè)大鼠的記憶能力。

1.6 腦組織中生化指標(biāo)測(cè)定水迷宮測(cè)試完畢24 h后，大鼠用10%水合氯醛(0.4m l/100 g體重)腹腔注射麻醉，打開胸腔，右心室內(nèi)取血，分離血清保存，待檢備用。斷頭處死，于冰盒上快速取大腦，斷頭低溫取腦，冷鹽水沖洗去除血液和雜質(zhì)。在4℃條件下分離出全腦和海馬，取部分海馬用以測(cè)定，其余海馬與腦組織制成10%的勻漿液，4℃離心10m in，取上清液，分別按照各試劑盒說(shuō)明書操作，測(cè)定SOD、MDA、GSH、GSH-PX、AchE、CAT、MAO、LDH和NO含量。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法使用SPSS17.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x-±s)表示，組間差異比較用單因素方差分析(One-way ANOVA)，各組間兩兩比較采用SNK法，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 電針對(duì)AD大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響在定位航行實(shí)驗(yàn)中，假手術(shù)組、正常組以及電針組分別與AD模型組比較，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)；正常組和電針組分別與假手術(shù)組比較，除正常組第5天的逃避潛伏期差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)以外，其余差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；且電針組逃避潛伏期比AD模型組明顯縮短(P＜0.01)(見(jiàn)表1)。在撤平臺(tái)后各組SD大鼠水迷宮空間搜索能力測(cè)試中(見(jiàn)表2)，分別與假手術(shù)組、正常組和電針組比較，AD模型組平均速度較快，跨越平臺(tái)次數(shù)、目標(biāo)象限停留時(shí)間以及平臺(tái)象限停留路程占總路程百分比均較少，且組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。假手術(shù)組分別與正常組、電針組比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。結(jié)果提示電針可改善AD模型大鼠的記憶功能障礙。

表1 各組大鼠前5 d定位航行實(shí)驗(yàn)中尋找平臺(tái)潛伏期時(shí)間比較(±s，n=12，s)

表1 各組大鼠前5 d定位航行實(shí)驗(yàn)中尋找平臺(tái)潛伏期時(shí)間比較(±s，n=12，s)

注：與AD模型組比較，aP＜0.01；與假手術(shù)組比較，bP＜0.05。

組別d 1d 2d 3d 4d 5 AD模型組假手術(shù)組正常組電針組F值P值73.03±21.23 43.04±24.08a31.01±11.90a46.98±18.03a10.05 0.00 55.09±16.57 28.00±8.60a24.23±7.08a31.01±7.81a20.33 0.00 45.14±9.09 23.00±5.62a19.00±3.95a24.00±5.88a40.44 0.00 32.61±12.96 16.74±6.17a17.51±6.46a16.43±2.87a11.62 0.00 28.99±9.61 14.93±4.50a10.99±4.50ab13.06±5.69a19.34 0.00

表2 撤平臺(tái)后各組SD大鼠水迷宮空間搜索能力測(cè)試情況比較(±s，n=12)

表2 撤平臺(tái)后各組SD大鼠水迷宮空間搜索能力測(cè)試情況比較(±s，n=12)

注：與AD模型組比較，aP＜0.05，aaP＜0.01。

組別AD模型組假手術(shù)組正常組電針組F值P值平均速度(cm/s) 26.28±10.58 21.17±5.11 18.54±4.97a19.13±6.81 2.84 0.05跨越平臺(tái)(次) 4.35±1.65 8.83±2.56b8.69±4.31b9.40±4.47b5.47 0.00目標(biāo)象限停留時(shí)間(s) 23.92±7.74 37.16±14.14b38.23±6.83b39.01±19.32a3.61 0.02平臺(tái)象限停留路程占總路程百分比(%) 0.27±0.07 0.36±0.19 0.39±0.15a0.38±0.14a1.92 0.14

2.2 電針對(duì)SD大鼠腦組織氧化應(yīng)激的影響電針組與AD模型組比較，腦組織SOD增加110.81%，MDA減少36.32%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。對(duì)于GSH-Px和GSH，電針組與AD模型組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，且電針組、正常組以及假手術(shù)組之間分別比較差異亦無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)(見(jiàn)表3)。提示電針可提高腦組織勻漿中SOD的活性，增強(qiáng)機(jī)體抗氧化能力，減輕自由基的損傷，減少氧自由基(Oxygen free radical，OFR)作用于膜脂質(zhì)生成的脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物MDA，從而減輕脂質(zhì)過(guò)氧化，進(jìn)而延緩衰老。

2.3 電針對(duì)SD大鼠腦組織中AchE、MAO、CAT、LDH活性和NO含量的影響假手術(shù)組分別與正常組、電針組比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05) (見(jiàn)表4)，且與AD模型組比較，電針組SD大鼠腦組織中AchE含量顯著降低(P＜0.01)，說(shuō)明電針可通過(guò)調(diào)節(jié)膽堿能神經(jīng)元的表達(dá)來(lái)降低AchE的活性，以促進(jìn)受損神經(jīng)的恢復(fù)和再生。同時(shí)，電針組與AD模型組比較，腦組織中MAO含量降低36.14%，CAT含量增高49.53%，LDH含量降低33.73%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，提示電針可提高CAT活性，降低MAO和LDH的活性以抑制其表達(dá)。AD模型組SD大鼠腦組織中的NO含量最高，且與假手術(shù)組、正常組以及電針組之間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，即NO的神經(jīng)毒性易導(dǎo)致學(xué)習(xí)記憶能力障礙。與AD模型組比較，電針組NO含量顯著降低(P＜0.01)，說(shuō)明電針可降低SD大鼠腦組織中NO含量從而減輕其神經(jīng)毒性。

表3 電針對(duì)SD大鼠腦組織氧化應(yīng)激的影響(±s，n=12)

表3 電針對(duì)SD大鼠腦組織氧化應(yīng)激的影響(±s，n=12)

注：與AD模型組比較，aP＜0.05。

組別AD模型組假手術(shù)組正常組電針組F值P值GSH(nmol/mg prot) 9.67±1.98 15.53±3.64a16.84±2.85a14.24±3.85a11.63 0.00 SOD(U/mg prot) 62.42±14.10 124.34±25.76a136.66±29.08a131.83±23.50a25.48 0.00 MDA(nmol/mg prot) 8.26±1.54 4.65±0.62a4.18±0.68a5.26±1.56a28.74 0.00 GSH-Px(U/mg prot) 17.95±4.35 29.65±8.79a30.58±1.74a28.75±3.81a14.70 0.00

表4 電針對(duì)SD大鼠腦組織中AchE、MAO、CAT、LDH活性和NO含量的影響(±s，n=12)

表4 電針對(duì)SD大鼠腦組織中AchE、MAO、CAT、LDH活性和NO含量的影響(±s，n=12)

注：與AD模型組比較，aP＜0.05，bP＜0.01。

LDH (U/mg prot) 29.94±7.62 17.33±5.13b16.27±3.61b19.84±3.34b17.24 0.00組別AD模型組假手術(shù)組正常組電針組F值P值SAchE (U/mg prot) 8.61±1.55 4.58±1.07b4.36±2.81b4.82±0.82b16.18 0.00 MAO (U/h/mg prot) 115.81±26.30 75.94±42.92a72.01±20.04b73.96±19.28b6.39 0.00 CAT (U/mg prot) 10.72±2.84 16.44±4.29b18.26±4.62b16.03±3.64b8.26 0.00 NO (μmol/mg prot) 3.86±1.54 1.92±0.50b2.14±0.63b2.09±0.35b9.94 0.00

3 討論

AD屬于祖國(guó)醫(yī)學(xué)“老年呆病”范疇，其發(fā)病率逐年升高，尚無(wú)特效藥物?，F(xiàn)代臨床研究發(fā)現(xiàn)，腎俞、大椎、內(nèi)關(guān)三穴相配伍的穴位組合針刺可明顯提高AD患者的學(xué)習(xí)記憶能力，其治療機(jī)制是多靶點(diǎn)、多水平、多途徑的整體調(diào)節(jié)[8-9]。針刺通過(guò)影響膽堿能神經(jīng)系統(tǒng)的功能、抗氧化、改善突觸形態(tài)可塑性來(lái)提高AD大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。本研究發(fā)現(xiàn)電針組與AD模型組比較，其逃避潛伏期、跨越平臺(tái)次數(shù)和目標(biāo)象限停留時(shí)間等均表現(xiàn)出明顯差異(P＜0.05)，結(jié)果表明針刺可改善SD大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。

相關(guān)研究證實(shí)，在AD患者腦內(nèi)可出現(xiàn)過(guò)氧化表現(xiàn)，患者的大腦中能夠檢測(cè)到典型的氧化應(yīng)激標(biāo)記物如8-OH-dG和8-OH-G等，AD與氧化應(yīng)激具有明確的相關(guān)性，氧化應(yīng)激可以作為AD的一個(gè)早期預(yù)測(cè)指標(biāo)[10-11]。同時(shí)，AD時(shí)糖基化、羰基化以及硝基化等氧化應(yīng)激標(biāo)記物的產(chǎn)生或含量也會(huì)增加[12]。腦組織內(nèi)SOD、GSH-Px及MDA含量可反映腦組織清除氧自由基的能力，故本研究著重探討這些指標(biāo)的變化來(lái)反映電針對(duì)AD大鼠的影響。SOD是存在于需氧代謝細(xì)胞中的一種自由基清除劑，在自由基的產(chǎn)生與清除平衡中起著重要作用[13]。MDA是氧自由基脂質(zhì)過(guò)氧化的最終產(chǎn)物，在血清和組織中的含量可反映機(jī)體脂質(zhì)過(guò)氧化的速度和強(qiáng)度。GSH是重要的過(guò)氧化物分解酶，可清除活性氧誘發(fā)的脂質(zhì)過(guò)氧化物，保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能完整性，從而抗衰老或延緩衰老進(jìn)程[14]。GSH-Px可特異地催化GSH對(duì)過(guò)氧化物的還原反應(yīng)，能清除過(guò)氧化物代謝產(chǎn)物，阻斷脂質(zhì)過(guò)氧化鏈鎖反應(yīng)，減緩衰老過(guò)程[15]。NO是重要的生物活性分子，具有擴(kuò)張血管、抑制粘附分子對(duì)炎性細(xì)胞粘附的作用[16]。AchE可將乙酰膽脂(Ach)水解成膽堿和乙酸，促進(jìn)神經(jīng)元發(fā)育和神經(jīng)的再生；CAT是催化過(guò)氧化氫(H2O2)分解成O2和H2O的酶，MAO可提高H2O2水平，誘導(dǎo)神經(jīng)系統(tǒng)老化；LDH是體內(nèi)重要的糖酵解酶[17]。SOD、GSH-Px和MDA等指標(biāo)相互作用、相互影響，可共同反映SD大鼠的抗氧化及腦組織自由基代謝的能力。本研究發(fā)現(xiàn)電針能明顯升高腦組織勻漿中SOD、CAT、GSH-Px、GSH的含量(P＜0.01)，降低MDA、AchE、MAO、LDH、NO的活性(P＜0.01)。結(jié)果表明電針可誘導(dǎo)腦組織SOD、CAT、GSH-Px、GSH增高，抑制MDA和NO的生成，拮抗MAO和LDH活性，下調(diào)AchE表達(dá)，改善腦內(nèi)過(guò)氧化狀態(tài)，增強(qiáng)腦組織的抗氧化能力。

綜上所述，電針可提高AD模型大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力，增強(qiáng)機(jī)體的抗氧化能力，對(duì)腦組織中自由基的代謝起到正調(diào)節(jié)作用。其機(jī)制可能是電針提高了SOD、CAT抗氧化系統(tǒng)的活性而發(fā)揮了對(duì)神經(jīng)元的保護(hù)作用，并通過(guò)增強(qiáng)氧自由基清除系統(tǒng)的功能，從而提高機(jī)體抗氧化能力實(shí)現(xiàn)的。

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Effect of E lectro acupunctu re on learning and memory ability asw ell as an tioxidant capacity on ratmodels of Alzheimer's disease.

YI Xian-fu1,ZHANG Ze-yue1,XIAO Min1,CHENG Rui2,SONG Jie2,GAO Xiang3,MUJing-ping1,PENG Li1.1.Taihe Hospital Affiliated to Hubei University ofMedicine,Shiyan 442000,Hubei,CHINA;2. The First Clinical Medical College,Hubei University of Medicine,Shiyan 442000,Hubei,CHINA;3.Hubei Fangxian People'sHospital,Fangxian 442100,Hubei,CHINA

Objectivee To observe the effect of electro acupuncture on the learning and memory ability,and free radicalmetabolism in brain tissue of ratmodels of amyloid beta protein 25～35 fragment(Aβ25～35)induced A lzheimer's diseases(AD).MethodsFourty-eight healthy female SD rats were random ly divided into AD model group,sham operation group,normal control group and acupuncture group,with 12 rats in each group.Aβ25～35 was applied to constructADmodels,and Morriswatermazewas used to observe the learning andmemory ability of rats. Superoxide dismutase(SOD),malondialdehyde(MDA),glutathione(GSH),glutathione peroxidase(GSH-PX)level and acetylcholine esterase(AchE),monoamine oxidase(MAO),nitric oxide(NO),catalase(CAT),lactate dehydrogenase(LDH)activity in brain tissue homogenate were also detected.Resu lts Compared with the AD model group, electro acupuncture can shorten the escape latency of rats(P＜0.01),significantly increase the timesof platform crossing(P＜0.01),prolong the residence time in the percentage of rats and increase the targetquadrant platform quadrant stay away the total distance(P＜0.05).A t the same time,electro acupuncture could significantly increase the content of SOD,CAT,GSH,GSH-Px(P＜0.01),decrease MDA,AchE,MAO,LDH,NO activity(P＜0.01).What'smore,compared with the AD model group,the differences of above indexes in sham operation group and normal control group were significant except the average speed.ConclusionElectro acupuncture can improve the learning and memory ability of AD rats.Also,itcan enhance thebody'santioxidant capacity and has a positive effecton free radical in brain tissuemetabolism.

A lzheimer's diseases(AD);Electro acupuncture;Ability of learning andmemory;Antioxidant capacity

R-332

A

1003—6350（2014）04—0475—05

2013-08-17)

標(biāo)準(zhǔn)醫(yī)學(xué)名詞表(待續(xù))
(本表以全國(guó)自然科學(xué)名詞審定委員會(huì)公布的《醫(yī)學(xué)名詞》為據(jù))

不宜用胸水休止齲羞明嗅敏度試驗(yàn)懸雍垂薛氏位、許累位血管加壓素、抗利尿激素血腦屏障血凝血色素宜用胸腔積液靜止齲畏光普雷茨試驗(yàn)腭垂許勒位血管升壓素血－腦脊液屏障血細(xì)胞凝集血紅蛋白不宜用血象血液動(dòng)力學(xué)牙間乳頭牙醫(yī)學(xué)牙周韌帶亞當(dāng)斯卡環(huán)亞急性肝壞死、亞急性黃色肝萎縮巖部炎研究模型錐后裂宜用血常規(guī)血流動(dòng)力學(xué)齦乳頭口腔醫(yī)學(xué)牙周膜改良式箭頭卡環(huán)亞急性重型肝炎巖錐炎診斷模型次裂

湖北省科技廳資助課題(編號(hào)：鄂科技D20092410)

彭力。E-mail:mepengli@163.com

10.3969/j.issn.1003-6350.2014.04.0185

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