改良生活飲用水菌落總數(shù)測定方法

【摘 要】 目的：改進(jìn)生活飲用水中菌落總數(shù)測定方法；方法：在營養(yǎng)瓊脂中加入一定量的TTC按GB/T5750-2006生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法微生物指標(biāo)菌落總數(shù)平皿計(jì)數(shù)法進(jìn)行檢測；結(jié)果：同一樣品利用該法與國標(biāo)法檢測生活飲用水中菌落總數(shù)經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)無顯著性差異；結(jié)論：TTC瓊脂平板計(jì)數(shù)結(jié)果準(zhǔn)確，對(duì)有雜質(zhì)水樣具有較高的靈敏性，受干擾少值得推廣。

【關(guān)鍵詞】 TTC瓊脂平板 菌落總數(shù)

【Abstract】 Objective： To improve determination of total bacterial count in drinking water； methods： adding a certain amount of the nutrient agar TTC by GB/T5750-2006 drinking water standard test methods Microbiological Total plate count of colonies were detected； result： same sample using this method with the national drinking water standard method to detect the total number of colonies no statistically significant difference test； Conclusion： TTC agar plate count results are accurate， there are impurities in water samples to have a high sensitivity， interference less worthy of promotion.

【keywords】 TTC agar plates ； Total number of colonies

【中圖分類號(hào)】 R155.5 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】 A 【文章編號(hào)】 1671-8801（2014）09-0317-01

生活飲用水的衛(wèi)生和安全關(guān)系到每個(gè)人的身體健康，一直備受各國政府和公眾的高度重視，水中菌落總數(shù)超標(biāo)對(duì)人體健康危害極大。目前國標(biāo)方法在菌落總數(shù)計(jì)數(shù)過程中部分菌落細(xì)小或生長于瓊脂內(nèi)部的菌落，由于顏色與營養(yǎng)瓊脂較相近，須借助放大鏡計(jì)數(shù)，這給大量計(jì)數(shù)工作帶來不便，同時(shí)有雜質(zhì)水樣中的沉渣給菌落鑒別造成一定的困難。本方法加入TTC能夠被細(xì)菌還原成紅色物質(zhì)，因此添加到培養(yǎng)基中，可以使菌落成紅色，便于觀測和計(jì)數(shù)，很好地解決上述問題，現(xiàn)將實(shí)驗(yàn)結(jié)果報(bào)告如下：

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器：同GB/T5750.12-2006中1.1.4

1.1.2 試劑：

1.1.2.1 營養(yǎng)瓊脂

1.1.2.2 0.003%TTC瓊脂：在100mL營養(yǎng)瓊脂中加入0.3%的TTC溶液1mL，121℃15分鐘高壓滅菌。

1.2 方法

平板計(jì)數(shù)法按國標(biāo)GB/T5750.12-2006檢驗(yàn)，TTC法直接使用0.003%TTC瓊脂按國標(biāo)GB/T5750.12-2006檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與討論

2.1 加入TTC后對(duì)結(jié)果的影響

TTC（氯化三苯基四氮唑）溶于水中成為無色溶液，但經(jīng)過細(xì)菌胞氫酶還原后即生成紅色的三苯基甲腙，該物質(zhì)比較穩(wěn)定，不會(huì)被空氣中的氧自動(dòng)氧化，但TTC在一定濃度下對(duì)細(xì)菌也有抑制作用，經(jīng)實(shí)驗(yàn)證明TTC濃度在0.001%-0.01%濃度中基本無抑制現(xiàn)象，本實(shí)驗(yàn)采用0.003%TTC營養(yǎng)瓊脂。

2.2 樣品檢測結(jié)果比較

用平板計(jì)數(shù)國標(biāo)法與TTC瓊脂平板法同時(shí)對(duì)10份樣品按試驗(yàn)方法進(jìn)行菌落總數(shù)檢測，檢測結(jié)果見表1

從表1可以看出，用TTC法結(jié)果和國標(biāo)法對(duì)水中菌落總數(shù)的檢測結(jié)果基本一致，該兩種方法的檢測結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理t=0.109，t0.05（18）=2.101，t0.05（18）>t兩種方法無顯著性差異.

2.3 對(duì)細(xì)小可疑菌落的鑒定

在10份樣品同時(shí)用兩種方法計(jì)數(shù)的培養(yǎng)皿中，挑取細(xì)小可疑的菌落，點(diǎn)種在血平板上，觀察其生長數(shù).結(jié)果在營養(yǎng)瓊脂平板上挑取200個(gè)，TTC瓊脂平板中挑取100個(gè)無色可疑菌落，其生長數(shù)分別為143和8個(gè)，分別占71%和8%，在前者培養(yǎng)基中有67個(gè)不生長占29%，可見營養(yǎng)瓊脂平板法至少有近30%的誤判率，兩者相差明顯.

3 結(jié)論

本文通過TTC營養(yǎng)瓊脂改良法與國標(biāo)法對(duì)生活飲用水中菌落總數(shù)的測定比較，證實(shí)TTC改良法使得經(jīng)培養(yǎng)的菌落呈紅色，便于識(shí)別雜質(zhì)，從而提高了檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性，特別是檢測臨近標(biāo)準(zhǔn)界限值的樣品，該法由于錯(cuò)判率低對(duì)樣品的檢測更有意義。

參考文獻(xiàn)

[1]GB/T5750-2006 生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法

[2]化妝品衛(wèi)生規(guī)范 中華人民共和國衛(wèi)生部2007年1月262-264頁。

作者簡介：張振春，男，1969年12月，遼寧沈陽人，畢業(yè)于遼寧醫(yī)學(xué)院，工作單位。沈陽市康平縣疾病預(yù)防控制中心