重組人酸性成纖維細(xì)胞生長因子預(yù)處理脂肪干細(xì)胞聯(lián)合自體脂肪移植用于隆乳術(shù)的多中心、隨機(jī)臨床對照試驗(yàn)

申在旭等

[摘要]目的：評價(jià)重組人酸性成纖維細(xì)胞生長因子（rh-aFGF）預(yù)處理脂肪干細(xì)胞（adipose derived stem cells，ADSCs）聯(lián)合自體脂肪移植用于隆乳術(shù)的臨床效果及安全性。方法：入選3個(gè)研究醫(yī)院的接受自體脂肪移植的隆乳術(shù)114例患者，所有患者均自下腹或大腿部抽取脂肪組織并提取ADSCs5ml。治療組62例將ADSCs與填充用脂肪組織均勻混合后給予rh-aFGF3-4支/次預(yù)處理后，多次處理后，注射于患者乳房內(nèi)。對照組52例，除不加rh-aFGF外，同治療組操作。術(shù)后測量患者乳房隆起值評估注射后并發(fā)癥發(fā)生情況，結(jié)論：rh-aFGF預(yù)處理脂肪干細(xì)胞聯(lián)合自體脂肪移植用于隆乳術(shù)臨床效果確切，術(shù)后并發(fā)癥更少、維持效果更好。

[關(guān)鍵詞]自體脂肪移植；重組人酸性成纖維細(xì)胞生長因子；脂肪干細(xì)胞

[中圖分類號]R622 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼]A [文章編號]1008-6455（2014）11-0893-04

Abstract： Objective To evaluate rh-aFGF pretreatment of adipose stem cells （ADSCs） with autologous fat transplantation for breast augmentation surgery clinical effects and safety. Methods The study enrolled three hospitals underwent autologous fat transplantation augmentation of 114 patients，all patients were extracted from adipose tissue and extract ADSCs5ml lower abdomen or thighs.After the treatment group of 62 patients after the ADSCs with mixed uniformly filled with adipose tissue given rh-aFGF3-4 pcs/preconditioning， after repeated treatment， injections in the patient's breast.Control group， 52 cases of complications after breast uplift surgery to measure the value assessment of the patient injection cases，and in two weeks， one month，three months，six months follow-up to two weeks after surgery to assess the patient uplift uplift value is maintained effect.Results： The treatment group after one month， three months after the uplift of the added value were （13.8±2.9）mm，12.9±3.6mm.The control group after one month， three months after the uplift increased values were（12.4±1.7）mm， （11.2±1.4）mm.In the control group to reduce fat bulge more obvious.In addition，the treatment group after one month， three months after surgery to maintain the rate of uplift of 86.7%， 80.0，respectively.The control group after one month， three months after the uplift values were 66.7，59.5%.Differences between the two groups were statistically（P<0.05）.Postoperative follow-up showed that the incidence of fat liquefaction treatment group than the control group （1.6% vs9.6%， P<0.05）. Conclusion rh-aFGF adipose stem cells pretreated with autologous fat transplantation for breast augmentation exact clinical results，fewer complications， and better maintain the effect.

Key words： autologous fat transplantation；recombinant human acidic fibroblast growth factor；fat stem cells

自體脂肪注射移植是將患者自體的脂肪組織在抽吸和處理后注射移植到接受部位，以達(dá)到接受部位豐滿塑形的效果[1]，自體脂肪注射移植已經(jīng)應(yīng)用在頭面部整形、隆乳術(shù)、隆臀術(shù)等多種整形手術(shù)中，具有無刀口，無免疫排斥反應(yīng)、形態(tài)真實(shí)、手感自然等優(yōu)點(diǎn)，其主要缺點(diǎn)是成活率低、手術(shù)3個(gè)月后移植脂肪大部分被吸收[2]，另外還可能出現(xiàn)移植脂肪液化、壞死、鈣化，壞死的脂肪顆粒還可能引起囊性纖維化和假性囊腫[3]。rh-aFGF是第三代成纖維細(xì)胞生長因子，具有促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖和遷移、促進(jìn)血管形成、延長血管內(nèi)皮細(xì)胞壽命、增強(qiáng)血管通透性和改變細(xì)胞外基質(zhì)等作用，與創(chuàng)傷組織修復(fù)愈合、炎癥和腫瘤發(fā)生密切相關(guān)[4]。在脂肪移植中被證實(shí)可促進(jìn)移植物的血運(yùn)重建，提高成活率，但由于缺乏大規(guī)模的臨床研究，rh-aFGF預(yù)處理的臨床效果尚不明確，仍受質(zhì)疑。

1 資料和方法

1.1一般資料：入選標(biāo)準(zhǔn)：健康成年女性，初次就診于入選的3個(gè)研究醫(yī)院，年齡20～59 歲，所有患者均因自然原因要求整形，所有患者均簽署手術(shù)同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：乳腺創(chuàng)傷；乳腺切除術(shù)后及其他導(dǎo)致乳腺畸形的情況；心肝腎功能障礙或不宜行手術(shù)的患者。

1.2 手術(shù)方法：①脂肪抽取：選擇腹部和大腿部位中段的皮下脂肪組織作為填充脂肪，患者睡眠麻醉之后，先于擬定抽脂部位注射麻醉腫脹液約2000ml，利用4ml抽脂管在 500mmHg負(fù)壓下人工抽取脂肪懸液。②脂肪的純化和ADSCs的提?。撼槿〉闹窘M織先經(jīng)800r/min離心3min， 篩除紅細(xì)胞和細(xì)胞碎片，去除上層液體。取其中100ml脂肪組織按以下步驟提?。杭碅DSCs脂肪組織內(nèi)加入含0.01%膠原酶及rh-aFGF2支的生理鹽水80ml。在37℃下?lián)u床內(nèi)200r/min充分混勻30min。加入等量含2支生理鹽水，將下層的漂浮物在2000r/min下離心5min，棄去上清液后，以生理鹽水重懸下沉淀，并通過孔徑100um的篩網(wǎng)過濾器濾掉破碎的細(xì)胞，濾過液再經(jīng)1400r/min離心和重懸2次，得到5mlADSCs懸液，剩余脂肪組織作為填充脂肪將其置于碎冰下低溫保存。③脂肪注射：已制備的 5ml ADSCs 懸液用含有1支rh-aFGF生理鹽水稀釋至30ml，平均添加到填充用脂肪組織內(nèi)，輕柔混勻10～15min，使ADSCs均勻附著于脂肪細(xì)胞內(nèi)。在乳房的外上方以破皮針做一切口，利用直徑2mm，長20cm的金屬套管和10ml注射器注射脂肪，左手觸摸針頭的位置和深度，右手進(jìn)行注射，在各側(cè)乳腺各注射200ml脂肪+含rh-aFGF10ml生理鹽水。

1.3 評價(jià)指標(biāo)：①隆起值：患者直立位后，測量乳頭根部至胸骨平面的距離，術(shù)后2周、1個(gè)月、3個(gè)月復(fù)測隆起值。②隆起增加值：以術(shù)后2周時(shí)的隆起值作為基準(zhǔn)，評價(jià)手術(shù)的隆乳效果及遠(yuǎn)期維持率。③術(shù)后并發(fā)癥：包括脂肪液化、壞死、纖維化或囊腫等。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：采用SAS8.0醫(yī)學(xué)統(tǒng)計(jì)軟件，采用符合方案集 （Per-Protocol Set，PPS）：完成研究并填寫了出院日的臨床療效評價(jià)。對于定量指標(biāo)，將列出描述性統(tǒng)計(jì)值，如患者數(shù)、均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差、中位數(shù)、最小值和最大值。對于患者接受治療時(shí)間，將做描述性統(tǒng)計(jì)并給出其95%置信區(qū)間。對分類數(shù)據(jù)則采用每類患者的例數(shù)和百分比來表示。并根據(jù)方差是否齊性，選擇秩和檢驗(yàn)或χ2檢驗(yàn)，另外等級資料采用ridit分析，計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，若方差齊性采用t 檢驗(yàn)。若方差不齊則采用非參數(shù)檢驗(yàn)方法。

3 討論

自體脂肪移植應(yīng)用于人體整形已有100多年的歷史，廣泛應(yīng)用于各種軟組織缺陷和局部器官塑形[5]。移植的脂肪組織壞死吸收的原因比較復(fù)雜，牽涉到多種機(jī)制，其主要原因有3個(gè)：①移植的脂肪組織缺血在移植之后，脂肪組織無法有效的形成新生血管，使其血供不足，脂肪細(xì)胞因缺血而壞死。這是自體脂肪移植效果不佳的主要原因[6]。②凋亡，有研究表明，即使在血管生成良好的移植脂肪組織內(nèi)，依然有大量的脂肪細(xì)胞凋亡，進(jìn)一步降低了移植脂肪細(xì)胞的存活率[7]。③脂肪細(xì)胞去分化， 因?yàn)槊撾x了正常的生理環(huán)境，移植的脂肪細(xì)胞周圍的各種細(xì)胞因子水平均發(fā)生改變，使得大量的成熟脂肪細(xì)胞去分化，更減弱了脂肪組織的存活[8]。近期研究發(fā)現(xiàn)，在填充脂肪中加入從脂肪中分離出來的ADSCs，并采用rh-aFGF預(yù)處理時(shí)，其存活率將大大提高，可改善移植脂肪的長期維持效果[9]。rh-aFGF是第三代成纖維細(xì)胞生長因子藥物，相比于第二代堿性成纖維細(xì)胞生長因子，其PH呈弱酸性，與脂肪細(xì)胞周圍環(huán)境相似，不破壞脂肪細(xì)胞內(nèi)環(huán)境[10]。研究發(fā)現(xiàn)，其具有刺激脂肪細(xì)胞增殖分裂，減少脂肪細(xì)胞凋亡，促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖，促進(jìn)血管生長，增加脂肪的供血[11]。另外尚有研究發(fā)現(xiàn)，rh-aFGF促進(jìn)細(xì)胞的分化、成熟，防止脂肪細(xì)胞的去分化[12]。因此rh-aFGF聯(lián)合脂肪干細(xì)胞可能是促進(jìn)自體脂肪移植后成活率，降低術(shù)后并發(fā)癥重要的治療手段。綜上所述，rh-aFGF聯(lián)合脂肪干細(xì)胞用于自體脂肪細(xì)胞移植成本低廉，操作簡單可多次注射，無免疫排斥反應(yīng)，形體自然手感好，無手術(shù)瘢痕等優(yōu)點(diǎn)，絕大多數(shù)患者對手術(shù)效果尤其是非異物的乳腺隆起表示滿意，經(jīng)過進(jìn)一步基礎(chǔ)研究和臨床應(yīng)用rh-aFGF聯(lián)合脂肪干細(xì)胞輔助的自體脂肪細(xì)胞移植必將成為隆乳術(shù)的最佳選擇。

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[收稿日期]2014-04-22 [修回日期]2014-05-15

編輯/何志斌