骨科藥酒的薄層鑒別研究

胡玉良

（廣州中醫(yī)藥大學(xué)附屬中山中醫(yī)院，廣東 中山 528400）

骨科藥酒的薄層鑒別研究

胡玉良

（廣州中醫(yī)藥大學(xué)附屬中山中醫(yī)院，廣東 中山 528400）

目的：建立骨科藥酒的薄層鑒別方法。方法：采用薄層色譜法對(duì)方中藥材進(jìn)行定性鑒別研究。結(jié)果：在薄層色譜中分別檢出大黃、當(dāng)歸、川芎、木香、石菖蒲、梔子的特征斑點(diǎn)，陰性對(duì)照均無(wú)干擾。結(jié)論：該方法簡(jiǎn)便、專屬性強(qiáng)、重現(xiàn)性好，可用于骨科藥酒的質(zhì)量控制。

骨科藥酒；大黃；當(dāng)歸；川芎；木香；石菖蒲；梔子；薄層色譜法

骨科藥酒為我院制劑，由大黃、當(dāng)歸、川芎、木香、石菖蒲、梔子等 15味中藥制成，具有活血化瘀、舒筋通絡(luò)的功效，臨床上用于治療急慢性跌打瘀傷。為控制該制劑質(zhì)量及保證臨床療效的穩(wěn)定，對(duì)骨科藥酒中的主要藥味大黃、當(dāng)歸、川芎等進(jìn)行了薄層色譜研究，參考《中國(guó)藥典》及有關(guān)文獻(xiàn)的方法進(jìn)行改進(jìn)并多次試驗(yàn)摸索，找尋可作為骨科藥酒質(zhì)量控制的方法。

1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

骨科藥酒（由我院制劑室提供，批號(hào)：20120804、20120928、20121109），大黃（121249-201003）、當(dāng)歸（120927-201014）、川芎（120918-200809）、木香（120921-201008）、石菖蒲（110757-201008）、梔子（120986-201007）等，均由原中國(guó)藥品生物制品檢定所提供。硅膠G薄層板（青島海洋化工廠分廠，批號(hào)為：20120418），薄層層析硅膠G（青島海洋化工有限公司分廠，批號(hào)：013012），羧甲基纖維素鈉（廣州市化學(xué)試劑玻璃儀器批發(fā)部，批號(hào)：960501）；其余試劑均為分析純。

1.2 實(shí)驗(yàn)儀器

KQ3200E醫(yī)用超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）、JA1203電子天平（上海天平儀器廠）、電熱恒溫水浴鍋（上海衡平儀器儀表廠）、直熱式電熱恒溫干燥箱（廣州東方電熱干燥設(shè)備廠）。

2 方法與結(jié)果

2.1 大黃的薄層鑒別

取本品10 mL，加水 5 mL，鹽酸 1 mL，置水浴中加熱30 min，立即冷卻，用乙醚提取 2次，第1次 20 mL，第 2次 10 mL，合并乙醚提取液，揮干，殘?jiān)右宜嵋阴?1 mL使溶解，作供試品溶液。另取大黃對(duì)照藥0.5 g，加乙醇15 mL，超聲處理20 min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀? mL，鹽酸1 mL，使溶解，置水浴上加熱30 min，同法制成對(duì)照藥材溶液。缺大黃陰性樣品，按供試品溶液制備方法處理，制成陰性對(duì)照溶液。 照《中國(guó)藥典》（2010年版）一部薄層色譜法[1]試驗(yàn)，吸取上述 3種溶液各5 μL，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠 G薄層板上，以石油醚（30～60℃）-甲酸乙脂-甲酸（15∶5∶1）的上層溶液為展開(kāi)劑[2]，展開(kāi)，取出，晾干，氨熏至斑點(diǎn)顯色清晰，分別于日光下和紫外光燈（365 nm）下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性對(duì)照無(wú)干擾。結(jié)果見(jiàn)圖1。

圖1 大黃TLC圖

2.2 當(dāng)歸、川芎的薄層鑒別

取本品10 mL，加乙醚20 mL，超聲處理10 min，取乙醚液，蒸干[3]，殘?jiān)右掖? mL使溶解，作為供試品溶液。另取當(dāng)歸、川芎對(duì)照藥材各0.5 g，分別加乙醚20 mL，超聲處理10 min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)右掖?1 mL使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。缺當(dāng)歸、川芎陰性樣品，按供試品溶液制備方法處理，制成陰性對(duì)照溶液。照《中國(guó)藥典》（2010年版）一部薄層色譜法[1]試驗(yàn)，吸取上述 4種溶液各5 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯（4∶1）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈（365 nm）下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相對(duì)應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，陰性對(duì)照無(wú)干擾。見(jiàn)圖2。

圖2 當(dāng)歸、川芎TLC圖

2.3 木香的薄層鑒別

取本品 20 mL，水浴加熱，揮去乙醇，加乙醚20 mL，密塞，超聲處理 15 min，取乙醚液，揮干，殘?jiān)右宜嵋阴4]1 mL使溶解，作為供試品溶液。另取木香對(duì)照藥材0.5 g，加乙醚20 mL，同法制得對(duì)照藥材溶液。缺木香陰性樣品，按供試品溶液制備方法處理，制成陰性對(duì)照溶液。依照《中國(guó)藥典》（2010年版）一部薄層色譜法[1]試驗(yàn)，吸取上述3種溶液各5 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-環(huán)己烷-甲醇（5∶3∶0.1）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以 5%香草醛硫酸溶液，于105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性對(duì)照無(wú)干擾。見(jiàn)圖3。

2.4 石菖蒲的薄層鑒別

取本品20 mL，加石油醚（60～90℃）20 mL[1]，超聲處理 30 min，分取石油醚液，蒸干，殘?jiān)邮兔眩?0～ 90℃）1 mL使溶解，作供試品溶液。另取石菖蒲對(duì)照藥材0.2 g，加石油醚（60～90℃）20 mL，同法制成對(duì)照藥材溶液。缺石菖蒲陰性樣品，按供試品溶液制備方法處理，制成陰性對(duì)照溶液。照《中國(guó)藥典》（2010年版）一部薄層色譜法[1]試驗(yàn)，吸取上述 3種溶液各 5 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠 G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯（4∶1）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，于紫外光燈（365 nm）下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相對(duì)應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，陰性對(duì)照無(wú)干擾。結(jié)果見(jiàn)圖4。

圖3 木香TLC圖

圖4 石菖蒲TLC圖

2.5 梔子的薄層鑒別

取本品40 mL，加在中性氧化鋁柱（100～200目，5 g,內(nèi)徑2 cm）上，用乙醇40 mL洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)右掖?1 mL使溶解，作供試品溶液。另取梔子對(duì)照藥材1 g，加75%乙醇10 mL，置溫水浴中浸泡 2 h，濾過(guò)，濾液作為對(duì)照藥材溶液。缺梔子陰性樣品，按供試品溶液制備方法處理，制成陰性對(duì)照溶液。照《中國(guó)藥典》（2010年版）一部薄層色譜法[1]試驗(yàn)，吸取上述 3種溶液各5 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水（15∶40∶22∶10）為展開(kāi)劑，在10℃以下展開(kāi)，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在 110℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性對(duì)照無(wú)干擾。結(jié)果見(jiàn)圖5。

圖5 梔子TLC圖

3 討論

大黃的鑒別中，樣品加水及鹽酸后置水浴中加熱處理，在水解同時(shí)，除去乙醇，簡(jiǎn)化了操作。鑒于當(dāng)歸、川芎均為傘形科植物，含有相同的活性成分，如阿魏酸、蒿本內(nèi)酯等，相互干擾，故采用缺當(dāng)歸、川芎雙陰性的方法，同時(shí)鑒別兩種藥材。實(shí)驗(yàn)中樣品和對(duì)照藥材處理多用超聲法，方法簡(jiǎn)便，提取效果好。

本研究中所列薄層方法只采用了對(duì)照藥材，未使用對(duì)照品，條件允許情況下，可增加相應(yīng)藥材的對(duì)照品作為參照物，使方法更完善。曾對(duì)處方中的其他藥味進(jìn)行了研究，但結(jié)果均是陰性有干擾或樣品主斑點(diǎn)不明顯。原因可能是樣品中藥味眾多，混合后化學(xué)成分發(fā)生了變化，或者是不同藥材中含有相同成分物質(zhì)（如乳香、沒(méi)藥）導(dǎo)致干擾，有待進(jìn)一步研究。

本研究所采用的方法穩(wěn)定，斑點(diǎn)顯色清晰，專屬性及重現(xiàn)性好，可作為骨科藥酒質(zhì)量控制的方法。

[1] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典（2010年版）一部[M].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010.

[2] 梁毅，高平，張勤.活血止痛合劑的薄層鑒別研究[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2008，19（9）：2210-2212.

[3] 李焰紅,王瑞媛.一柱天酒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J].山東醫(yī)藥工業(yè)，2003，22（6）：17-18.

[4] 郝麗靜，馮天鑄.五香止痛散質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2007，18（12）：3076.

Study on the Orthopaedic Medicated Wine by TLC Identification Method

Hu Yuliang（Zhongshan Hospital of Guangzhou University of TCM，Guangdong Zhongshan 528400，China）

Objective：To establish a TLC identification method for orthopaedic medicated wine.Methods：Using TLC method to identify qualitatively the medicines in the wine.Results：The characteristic spots of rheum,angelica sinensis,ligusticum wallichii,radix vladimiriae,rhizome and jasmine were detected respectively by TLC and the negative controls showed no interference.Conclusion：This method was convenient and characteristic with good reproducibility,and it can be used for the quality control of orthopaedic medicated wine.

Orthopaedic Medicated Wine；Rheum；Angelica Sinensis；Ligusticum Wallichii；Radix Vladimiriae；Rhizome；Jasmine；TLC

10.3969/j.issn.1672-5433.2014.05.007

2014-02-08）

胡玉良，女，主管藥師。研究方向：醫(yī)院藥學(xué)。E-mail：86841068@qq.com