• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    養(yǎng)陰活血合劑對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠的腎保護(hù)作用及其相關(guān)機(jī)制研究

    2014-04-18 06:12:28周婷屈長(zhǎng)宏蔣紅心廖建春茆俊卿劉曉靜黃萍
    江蘇中醫(yī)藥 2014年11期
    關(guān)鍵詞:養(yǎng)陰合劑活血

    周婷 屈長(zhǎng)宏 蔣紅心 廖建春 茆俊卿 劉曉靜 黃萍

    (揚(yáng)州市中醫(yī)院,江蘇揚(yáng)州 225002)

    養(yǎng)陰活血合劑對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠的腎保護(hù)作用及其相關(guān)機(jī)制研究

    周婷 屈長(zhǎng)宏 蔣紅心 廖建春 茆俊卿 劉曉靜 黃萍

    (揚(yáng)州市中醫(yī)院,江蘇揚(yáng)州 225002)

    目的:觀察中藥養(yǎng)陰活血合劑對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)腎損害的保護(hù)作用及其可能機(jī)制。方法:將20只12周齡的雄性SHR大鼠隨機(jī)分為SHR組、中藥組、安博維組和聯(lián)合組,每組5只,同時(shí)設(shè)5只同齡Wistar-Kyoto(WKY)大鼠作為正常對(duì)照組。中藥組和安博維組分別予養(yǎng)陰活血合劑(等效劑量為每日15g/kg)和安博維(等效劑量為每日30mg/kg)灌胃,每日1次;聯(lián)合組則給予養(yǎng)陰活血合劑加安博維灌胃,每日1次;SHR組和正常對(duì)照組均給予等量的蒸餾水每日1次灌胃。共治療及喂養(yǎng)8周,監(jiān)測(cè)尾動(dòng)脈血壓。在實(shí)驗(yàn)開始給藥前及實(shí)驗(yàn)結(jié)束后留取小便標(biāo)本及血標(biāo)本,檢測(cè)尿β2-微球蛋白(β2-MG)和尿微量白蛋白(mALB)及血尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)。采用實(shí)時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)技術(shù)檢測(cè)腎組織轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)mRNA和內(nèi)皮素1(ET-1)mRNA的表達(dá)。結(jié)果:實(shí)驗(yàn)前SHR各組血壓均顯著高于WKY組;實(shí)驗(yàn)后與實(shí)驗(yàn)前相比,中藥組、安博維組和聯(lián)合組大鼠血壓均明顯下降。實(shí)驗(yàn)后SHR組大鼠尿mALB、β2-MG較實(shí)驗(yàn)前明顯升高,中藥組、安博維組則明顯下降,聯(lián)合組下降更明顯。實(shí)驗(yàn)后中藥組、安博維組及聯(lián)合組大鼠尿mALB、β2-MG均明顯低于SHR組。與SHR組相比,中藥組、安博維組、聯(lián)合組腎組織TGF-β1和ET-1 mRNA的表達(dá)均顯著下降。結(jié)論:養(yǎng)陰活血合劑可降低SHR大鼠血壓,降低尿微量蛋白,其腎保護(hù)作用機(jī)制可能與其下調(diào)腎組織TGF-β1mRNA和ET-1mRNA表達(dá)的功能有關(guān)。

    養(yǎng)陰活血合劑 自發(fā)性高血壓 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1內(nèi)皮素-1 實(shí)驗(yàn)研究

    近年來,隨著高血壓的發(fā)病率逐漸增高,對(duì)于高血壓引起的腎損害越來越受到人們的重視。現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)高血壓早期腎臟就已出現(xiàn)了異常改變,因此對(duì)于高血壓引起的腎損害的早期診斷和早期治療就顯得頗為重要。我們前期研究發(fā)現(xiàn),養(yǎng)陰活血合劑對(duì)高血壓早期腎損害患者具有顯著的療效,本實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步研究養(yǎng)陰活血合劑對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠早期腎損害的保護(hù)作用及其相關(guān)機(jī)制。

    1 實(shí)驗(yàn)材料

    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)20只,Wistar-Kyoto(WKY)大鼠5只,SPF級(jí),雄性,12周齡,平均體重(280±20)g,均購自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司。

    1.2 藥物養(yǎng)陰活血合劑由熟地黃15g、山茱萸15g、何首烏15g、枸杞子15g、丹參15g、川芎10g、水蛭10g、川牛膝10g、澤蘭10g、天麻10g、鉤藤10g、丹皮10g組成,由揚(yáng)州市中醫(yī)院制劑室煎制,煎制成濃度1.5g/mL的藥液。安博維(厄貝沙坦),150mg/片,杭州賽諾菲安萬民生制藥有限公司生產(chǎn)。

    1.3 試劑與儀器Trizilo試劑、逆轉(zhuǎn)錄試劑盒(美國(guó)Fermentas公司);PCR試劑和TaqDNA聚合酶(美國(guó)Fermentas公司);瓊脂糖凝膠(英國(guó)OSOID公司);DNA Marker(美國(guó)Fermentas公司);10mg/mL溴化乙錠(美國(guó)Sigma公司);美國(guó)ABI17900實(shí)時(shí)定量PCR儀;DSWY-1大鼠尾動(dòng)脈血壓測(cè)量裝置(上海欣曼科教設(shè)備有限公司);RM6240生物信號(hào)采集系統(tǒng)(成都儀器廠);全自動(dòng)生化分析儀(西班牙DIAGNOSTIC);低速離心機(jī)(日立7060型,日本日立公司);超低溫冰箱(SANYOMDF-U71V型,日本)。

    2 實(shí)驗(yàn)方法

    2.1 分組與給藥25只大鼠予普通飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)1周,將20只SHR大鼠隨機(jī)分為SHR組、中藥組、安博維組和聯(lián)合組,每組5只,另取5只同齡WKY大鼠作為正常對(duì)照組。中藥組予以養(yǎng)陰活血合劑灌胃,每日1次,根據(jù)大鼠與人的體表面積比例,按人每公斤體重的臨床日用量折算大鼠的等效劑量,大鼠中藥等效劑量為15g/(kg·d)。安博維組給予安博維灌胃,每日1次,安博維的等效劑量為30mg/(kg·d)。聯(lián)合組則給予養(yǎng)陰活血合劑加安博維灌胃,每日1次。正常對(duì)照組和SHR組均給予等量蒸餾水每日1次灌胃。各組均治療并喂養(yǎng)8周。

    2.2 血壓測(cè)量測(cè)量大鼠尾動(dòng)脈血壓,實(shí)驗(yàn)前測(cè)1次,實(shí)驗(yàn)后第1、2周各測(cè)血壓1次,以后每隔2周測(cè)血壓并記錄,直至實(shí)驗(yàn)結(jié)束。每記錄1次測(cè)血壓3次,取均值。

    2.3 生化指標(biāo)檢測(cè)在實(shí)驗(yàn)開始給藥前及實(shí)驗(yàn)結(jié)束前1天清晨留取小便標(biāo)本,采用放射免疫法檢測(cè)尿β2-微球蛋白(β2-MG)和尿微量白蛋白(mALB)含量。在實(shí)驗(yàn)前及實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)留取血標(biāo)本1mL,用以檢測(cè)血尿素氮(BUN)和肌酐(Scr)。

    2.4檢測(cè)大鼠腎組織轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)mRNA和內(nèi)皮素1(ET-1)mRNA的表達(dá)采用實(shí)時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(Reverse transcription-polymerase chainreaction,RT-PCR)技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)。斷頭處死大鼠后,迅速取腎臟,Trizol試劑提取總RNA,然后進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄和PCR反應(yīng)。內(nèi)參照引物(Gapdh)上游引物:ACTTTGGCATCGTGGAAGGG,下游引物:ACTTGGCAGGTTTCTCCAGG;TGF-β1上游引物:AGGGCTACCATGCCAACTTC,下游引物:CCACGTAGTAG ACGATGGGC;ET-1上游引物:ATCAGAGCAACCAGACA CCG,下游引物:TGCACTTCCTTCTCAGCTCG。PCR反應(yīng)體系25μL,含2μL DNA模板,上游引物及下游引物(10μmol/μL)各1μL,12.5μL SYBRRPremix Ex TaqTMⅡ,8.5μL滅菌蒸餾水。PCR反應(yīng)條件:95℃預(yù)變性30s;95℃5s、60℃30s,40個(gè)循環(huán)。每個(gè)循環(huán)延伸結(jié)束檢測(cè)熒光信號(hào)。隨后是一個(gè)緩慢升溫的程序,同時(shí)連續(xù)檢測(cè)DNA產(chǎn)物的溶解曲線,以了解樣品擴(kuò)增的特異性,保障測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確可靠。然后用2-ΔΔCt法進(jìn)行分析,相對(duì)表達(dá)量=2-ΔΔCt。

    2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,正態(tài)分布計(jì)量數(shù)據(jù)以(±s)表示,多組間比較采用單因素方差分析,兩兩比較采用Student-Newman-Keuls檢驗(yàn),P<0.05示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

    3.1 各組大鼠實(shí)驗(yàn)前后尾動(dòng)脈血壓比較實(shí)驗(yàn)前SHR大鼠各組血壓差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,但均顯著高于正常對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)后與實(shí)驗(yàn)前相比,中藥組大鼠血壓顯著下降(P<0.05),安博維組和聯(lián)合組下降更顯著(P<0.001),提示中藥養(yǎng)陰活血合劑有一定的降壓作用。見表1。

    3.2 各組大鼠實(shí)驗(yàn)前后腎功能比較實(shí)驗(yàn)前后各組大鼠BUN、Scr含量比較均無明顯差異(P>0.05)。實(shí)驗(yàn)后SHR組mALB、β2-MG較實(shí)驗(yàn)前明顯升高(P<0.01),中藥組、安博維組則明顯下降(P<0.05),聯(lián)合組下降更明顯(P<0.01);實(shí)驗(yàn)后中藥組、安博維組及聯(lián)合組尿mALB、β2-MG明顯低于SHR組(P<0.01)。見表2。

    3.3 各組大鼠實(shí)驗(yàn)后腎組織TGF-β1和ET-1 mRNA表達(dá)比較與SHR組相比,中藥組、安博維組、聯(lián)合組大鼠腎組織TGF-β1和ET-1 mRNA的表達(dá)均顯著下降(P<0.05或P<0.01)。見表3。

    4 討論

    高血壓病腎臟損害的病理表現(xiàn)主要為腎小動(dòng)脈硬化,入球小動(dòng)脈、小葉間動(dòng)脈玻璃樣變性和間質(zhì)纖維化,其中腎間質(zhì)纖維化是高血壓病腎臟損害的重要病理基礎(chǔ)。轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)在腎間質(zhì)纖維化過程中起到重要的作用。TGF-β1可促進(jìn)ECM蛋白的生成和沉積,降低蛋白酶的生成而減少基質(zhì)降解[1],可促進(jìn)腎小球系膜細(xì)胞和腎小管上皮細(xì)胞肥大;使腎小管上皮細(xì)胞發(fā)生表型轉(zhuǎn)化,成為肌成纖維細(xì)胞;促進(jìn)細(xì)胞凋亡,導(dǎo)致腎小管萎縮、腎功能損害[2]。王甜等[3]研究發(fā)現(xiàn),SHR大鼠腎臟組織TGF-β的表達(dá)隨周齡和血壓的增加而升高,與β2-MG的變化趨勢(shì)一致,可以作為早期腎損害的診斷指標(biāo)。ET-1是參與了高血壓腎損害的另外一種重要的因子,是血管強(qiáng)力收縮劑,可顯著減少腎臟血流量(RBF)和腎小球?yàn)V過率(GFR)。ET-1還可促使腎臟血管平滑肌細(xì)胞的增生,腎小球系膜細(xì)胞生長(zhǎng),促進(jìn)腎小球硬化的形成與發(fā)展,加重高血壓時(shí)腎功能損害的程度。有研究發(fā)現(xiàn),16個(gè)月齡的自發(fā)性高血壓大鼠存在明顯的腎損害,血漿和腎組織中的ET含量也明顯升高,提示ET可能參與了SHR的腎損害[4]。

    高血壓早期腎損害階段,腎臟沒有明顯的結(jié)構(gòu)和功能改變,缺少相關(guān)的臨床癥狀和體征,尿素氮和肌酐在早期不能反映腎小球的濾過功能,用常規(guī)的檢測(cè)方法難以較早判斷腎臟損害情況。而尿mALB在腎小球輕度受損時(shí)即明顯升高,標(biāo)志著腎小球?yàn)V過膜電荷選擇性屏障損傷,是腎小球早期損害的敏感指標(biāo)。β2-MG是體內(nèi)所有有核細(xì)胞的固有成分,幾乎全部由腎小球?yàn)V過,99%被腎小管重吸收,是判斷腎小管、腎間質(zhì)損害的敏感指標(biāo)。尿mALB和β2-MG聯(lián)合檢測(cè)可以早期發(fā)現(xiàn)腎臟損害。本實(shí)驗(yàn)證實(shí),SHR大鼠在13周時(shí)即有尿mALB、和β2-MG的顯著升高,且隨著周齡的增加而升高(P<0.01)。

    中醫(yī)認(rèn)為高血壓早期腎損害病位主要在肝腎兩臟,以肝腎陰虛、肝陽上亢為主要病理基礎(chǔ),瘀血為主要病理因素?!秲?nèi)經(jīng)·素問》云:“腎者主水,受五臟六腑之精而藏之”,“腎者,主蟄,封藏之本,精之處也”。腎虛,封藏失司,不能固澀精微,致精微外泄;肝腎陰虛,脈道失濡,血行不暢,腎絡(luò)瘀阻,且“久病必瘀”,瘀阻腎絡(luò),清濁不分,精微壅而外溢,皆可出現(xiàn)尿mALB、β2-MG升高等高血壓早期腎損害的表現(xiàn)。據(jù)此理論,中醫(yī)治療立法以養(yǎng)陰活血為主,方中熟地黃、山茱萸、何首烏、枸杞子補(bǔ)肝腎,益精血,固澀精微;丹參、水蛭、川芎、丹皮、川牛膝活血化瘀通絡(luò),川牛膝又引藥下行,丹皮兼清肝熱;天麻、鉤藤平息肝陽;澤蘭活血利水。全方共奏養(yǎng)陰活血、固攝精微之功效。前期研究發(fā)現(xiàn),養(yǎng)陰活血合劑可顯著降低高血壓合并早期腎損害患者的尿mALB、β2-MG和24h尿蛋白[5-6]。本研究通過養(yǎng)陰活血合劑治療自發(fā)性高血壓大鼠的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),養(yǎng)陰活血合劑能降低SHR大鼠的血壓,顯著降低尿mALB和尿β2-MG,具有保護(hù)高血壓腎臟損害的作用,安博維與養(yǎng)陰活血合劑合用則有協(xié)同作用。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),養(yǎng)陰活血合劑和安博維都可顯著抑制SHR大鼠腎臟組織TGF-β1和ET-1 mRNA的表達(dá),兩者合用則作用更明顯,顯示養(yǎng)陰活血合劑可通過抑制腎組織TGF-β1和ET-1 mRNA的表達(dá),進(jìn)而抑制高血壓引起的腎間質(zhì)纖維化、腎小球硬化,從而起到腎保護(hù)的作用。

    表1 各組大鼠實(shí)驗(yàn)前后尾動(dòng)脈血壓比較(±s)mmHg

    表1 各組大鼠實(shí)驗(yàn)前后尾動(dòng)脈血壓比較(±s)mmHg

    注:與本組0周時(shí)比較,△P<0.05,△△△P<0.001;與同時(shí)期SHR組比較,▲P<0.05,▲▲▲P<0.001。

    組別動(dòng)物數(shù)(只)0周8周正常對(duì)照組5108.6±8.050110.6±7.335 5177.2±11.17中藥組5177.0±8.436154.4±6.044△▲安博維組5177.5±9.678118.0±11.76△△△▲▲▲聯(lián)合組5174.8±8.402106.0±6.356△△△▲▲▲SHR組171.2±2.588

    表2 各組大鼠實(shí)驗(yàn)前后尿微量白蛋白、β2微球蛋白、尿素氮及肌酐比較(±s)

    表2 各組大鼠實(shí)驗(yàn)前后尿微量白蛋白、β2微球蛋白、尿素氮及肌酐比較(±s)

    注:與本組實(shí)驗(yàn)前比較,*P<0.05,**P<0.01;與同時(shí)期SHR組比較,##P<0.01。

    組別動(dòng)物數(shù)(只)正常對(duì)照組5 BUN(mmol/L)實(shí)驗(yàn)前實(shí)驗(yàn)后實(shí)驗(yàn)前6.2±1.5 6.5±2.852.6±8.1 68.2±7.1**54.8±7.386.4±5.9**中藥組56.4±1.7 7.6±3.155.8±3.6 59.0±7.536.9±4.628.5±5.7*##56.1±6.243.2±9.3*##安博維組57.2±1.1 7.0±2.560.3±5.7 62.5±5.340.1±3.527.3±8.0*##52.7±5.839.5±8.7*##聯(lián)合組56.7±2.6 7.4±1.658.9±7.2 63.8±6.139.5±4.315.4±5.6**##56.8±8.129.3±6.4**##實(shí)驗(yàn)前12.4±3.2 β2-MG(μg/L)實(shí)驗(yàn)前實(shí)驗(yàn)后5.9±2.46.3±3.1 6.8±3.0 8.5±2.453.5±5.4 67.2±2.138.7±5.2 Scr(μmol/L)實(shí)驗(yàn)后58.5±9.4 mALB(mg/L)實(shí)驗(yàn)后15.1±2.6 SHR組5

    表3 各組TGF-β1和ET-1mRNA表達(dá)的變化(2-ΔΔCt)

    [1]Schnaper H,Hayashida T,Hubchak SC,et al.TGF-beta signal transduction and mesangial cell fibrogenesis.Am JPhysiol Renal Physiol,2003,283(2):243

    [2]Li JH,Huang XR,Zhu HJ,et al.Role of TGF-beta signaling in extracellular matrix productionnunder high glucose conditions. Kidney Int,2003,63(6):2010

    [3]王甜,李靜,時(shí)曄,等.轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β與結(jié)締組織生長(zhǎng)因子在自發(fā)性高血壓大鼠腎臟的增齡性變化.陜西醫(yī)學(xué)雜志,2012,41(8):952

    [4]王小丹,鄭秋甫,谷慶陽,等.堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子和內(nèi)皮素在自發(fā)性高血壓大鼠腎損害中的作用.解放軍醫(yī)學(xué)雜志,2000,25(4):270

    [5]周婷.中西藥合用治療高血壓病早期腎損害療效研究.遼寧中醫(yī)雜志,2008,35(2):256

    [6]周婷,屈長(zhǎng)宏.養(yǎng)陰活血方聯(lián)合安博維治療高血壓病早期腎損害患者30例.中醫(yī)雜志,2009,50(11):1009

    R544.105

    A

    1672-397X(2014)11-0077-03

    周婷(1963-),女,本科學(xué)歷,主任中醫(yī)師,主要從事腎臟疾病的中西醫(yī)結(jié)合診治研究。Yzzt11757@163.com

    2014-05-26

    編輯:吳寧

    江蘇省中醫(yī)藥局科技項(xiàng)目(LZ11168)

    猜你喜歡
    養(yǎng)陰合劑活血
    白露秋分 潤(rùn)燥養(yǎng)陰
    中老年保健(2021年9期)2021-08-24 03:51:46
    立冬補(bǔ)冬 小雪養(yǎng)陰
    石硫合劑熬制與保存
    河北果樹(2020年2期)2020-05-25 06:58:58
    冬季如何補(bǔ)腎護(hù)陽、潤(rùn)燥養(yǎng)陰
    HPLC法同時(shí)測(cè)定退銀合劑中6種成分
    中成藥(2018年5期)2018-06-06 03:11:54
    HPLC法同時(shí)測(cè)定二陳合劑中8種成分
    中成藥(2017年7期)2017-11-22 07:33:11
    養(yǎng)陰宣肺湯治療干眼的臨床療效評(píng)價(jià)
    補(bǔ)腎活血祛瘀方治療中風(fēng)病恢復(fù)期100例
    活血舒筋湯治療糖尿病周圍神經(jīng)病變36例
    宣痹祛風(fēng)合劑治療濕熱蘊(yùn)結(jié)型痛風(fēng)100例
    日韩制服骚丝袜av| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 在线免费十八禁| 久久6这里有精品| 国国产精品蜜臀av免费| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 日韩制服骚丝袜av| 国产伦精品一区二区三区视频9| 五月伊人婷婷丁香| 国内精品美女久久久久久| 色综合色国产| 黄色一级大片看看| 亚洲av二区三区四区| 国产高清不卡午夜福利| 少妇高潮的动态图| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 久久精品国产亚洲av涩爱| 91精品一卡2卡3卡4卡| 亚洲精品一二三| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频 | av福利片在线观看| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 国产成人午夜福利电影在线观看| 国产日韩欧美在线精品| 欧美一级a爱片免费观看看| 久久久久久伊人网av| 成人黄色视频免费在线看| 亚洲自拍偷在线| 少妇人妻一区二区三区视频| 国产精品成人在线| 久久久亚洲精品成人影院| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 亚洲电影在线观看av| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 三级国产精品欧美在线观看| 天堂中文最新版在线下载 | 成人国产av品久久久| 欧美另类一区| 2018国产大陆天天弄谢| 国产成人精品婷婷| 国国产精品蜜臀av免费| 夫妻午夜视频| 亚洲av电影在线观看一区二区三区 | 99热网站在线观看| 美女国产视频在线观看| 99久久中文字幕三级久久日本| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片 精品乱码久久久久久99久播 | 精品久久久久久久久亚洲| 日本wwww免费看| 七月丁香在线播放| 国产成人91sexporn| 亚洲自偷自拍三级| 国产av不卡久久| 欧美少妇被猛烈插入视频| 欧美性感艳星| 国精品久久久久久国模美| 毛片一级片免费看久久久久| 成人无遮挡网站| 毛片一级片免费看久久久久| 久久久久九九精品影院| 免费观看的影片在线观看| 亚洲av免费高清在线观看| 久久人人爽人人片av| 美女视频免费永久观看网站| 成年av动漫网址| 97在线人人人人妻| 美女被艹到高潮喷水动态| 尾随美女入室| 欧美最新免费一区二区三区| 欧美最新免费一区二区三区| 亚洲在久久综合| 日本熟妇午夜| 国产有黄有色有爽视频| 亚洲最大成人手机在线| 搡老乐熟女国产| 九色成人免费人妻av| 成人漫画全彩无遮挡| 男男h啪啪无遮挡| 在现免费观看毛片| 97精品久久久久久久久久精品| 少妇熟女欧美另类| 国产v大片淫在线免费观看| 高清在线视频一区二区三区| 国产色爽女视频免费观看| 青春草视频在线免费观看| 另类亚洲欧美激情| 欧美+日韩+精品| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 成人毛片60女人毛片免费| 亚洲精品视频女| 国产黄频视频在线观看| 久久久久精品久久久久真实原创| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片 精品乱码久久久久久99久播 | 综合色丁香网| 国精品久久久久久国模美| 免费观看的影片在线观看| 免费在线观看成人毛片| 亚洲精品中文字幕在线视频 | 国产精品99久久久久久久久| 一个人看视频在线观看www免费| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 精品酒店卫生间| av福利片在线观看| 日韩人妻高清精品专区| 成人黄色视频免费在线看| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频 | 别揉我奶头 嗯啊视频| 真实男女啪啪啪动态图| 午夜免费男女啪啪视频观看| 天天一区二区日本电影三级| 黄色怎么调成土黄色| 99久久精品热视频| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 极品少妇高潮喷水抽搐| 久久久久久久午夜电影| 国产一区亚洲一区在线观看| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 男女国产视频网站| 国产精品久久久久久av不卡| 亚洲国产色片| 成人亚洲精品av一区二区| 国产 一区 欧美 日韩| 午夜免费男女啪啪视频观看| 黄色配什么色好看| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 国产免费一级a男人的天堂| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 成人国产麻豆网| 欧美国产精品一级二级三级 | av在线老鸭窝| 91狼人影院| 精品国产露脸久久av麻豆| 2021天堂中文幕一二区在线观| 搡女人真爽免费视频火全软件| av又黄又爽大尺度在线免费看| 激情 狠狠 欧美| 国产成人a∨麻豆精品| 国产精品一区www在线观看| 欧美3d第一页| 日本三级黄在线观看| 99久久精品一区二区三区| 国产探花极品一区二区| 免费观看av网站的网址| 久久99蜜桃精品久久| 26uuu在线亚洲综合色| 亚洲自偷自拍三级| 最近中文字幕高清免费大全6| 午夜福利视频1000在线观看| 麻豆成人午夜福利视频| 久久精品国产亚洲av天美| 亚洲三级黄色毛片| 人妻一区二区av| 亚洲欧美成人精品一区二区| 如何舔出高潮| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 男女国产视频网站| 亚洲av.av天堂| 欧美精品一区二区大全| 久久久久国产网址| 亚洲欧美成人精品一区二区| 国产日韩欧美在线精品| 国产91av在线免费观看| 下体分泌物呈黄色| 最后的刺客免费高清国语| 久久人人爽av亚洲精品天堂 | 精品酒店卫生间| 熟女av电影| 国产 一区 欧美 日韩| 黄色视频在线播放观看不卡| av在线播放精品| 有码 亚洲区| 亚洲美女视频黄频| 中文欧美无线码| 亚洲精品aⅴ在线观看| 日韩av在线免费看完整版不卡| 一区二区av电影网| a级毛片免费高清观看在线播放| 国产成人免费无遮挡视频| 简卡轻食公司| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 男女无遮挡免费网站观看| 夫妻性生交免费视频一级片| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 夫妻午夜视频| 一个人观看的视频www高清免费观看| 成年人午夜在线观看视频| 国产乱来视频区| 老女人水多毛片| 国产精品99久久久久久久久| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 国产精品成人在线| 亚洲自偷自拍三级| 午夜福利视频精品| 久久精品夜色国产| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 97超碰精品成人国产| 国产精品久久久久久久电影| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 日韩三级伦理在线观看| 国产高清国产精品国产三级 | 最近中文字幕高清免费大全6| 水蜜桃什么品种好| 亚洲天堂国产精品一区在线| 久久鲁丝午夜福利片| 国内精品美女久久久久久| 最新中文字幕久久久久| 夫妻午夜视频| 91在线精品国自产拍蜜月| 久久精品久久精品一区二区三区| 精品一区二区三区视频在线| 亚洲图色成人| 97超碰精品成人国产| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 青春草亚洲视频在线观看| 五月天丁香电影| 亚洲图色成人| 免费看光身美女| 成人毛片60女人毛片免费| 亚洲欧美精品自产自拍| 看十八女毛片水多多多| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 涩涩av久久男人的天堂| 丝瓜视频免费看黄片| 成人二区视频| 一级黄片播放器| 日韩 亚洲 欧美在线| 狂野欧美激情性bbbbbb| 热99国产精品久久久久久7| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 69av精品久久久久久| 欧美一区二区亚洲| 久久影院123| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 国产黄色视频一区二区在线观看| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 免费大片黄手机在线观看| 神马国产精品三级电影在线观看| 国产男人的电影天堂91| 欧美成人一区二区免费高清观看| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 不卡视频在线观看欧美| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 久久久国产一区二区| 最近手机中文字幕大全| 熟妇人妻不卡中文字幕| 久久久欧美国产精品| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 精品一区二区免费观看| 国产精品女同一区二区软件| 久久精品夜色国产| 一级毛片aaaaaa免费看小| 亚洲第一区二区三区不卡| 日本wwww免费看| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 99热这里只有是精品在线观看| 观看免费一级毛片| 国产精品99久久久久久久久| 日本与韩国留学比较| 激情五月婷婷亚洲| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 特大巨黑吊av在线直播| 日韩成人伦理影院| 午夜福利在线在线| 亚洲精品国产成人久久av| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 青春草视频在线免费观看| 精品熟女少妇av免费看| 免费电影在线观看免费观看| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 久久久久久久久久久丰满| 免费大片黄手机在线观看| 日韩av不卡免费在线播放| xxx大片免费视频| 色婷婷久久久亚洲欧美| 中文字幕久久专区| 中文天堂在线官网| 激情五月婷婷亚洲| 黄色视频在线播放观看不卡| 国产精品99久久久久久久久| 婷婷色麻豆天堂久久| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 能在线免费看毛片的网站| 免费少妇av软件| 制服丝袜香蕉在线| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 国内精品宾馆在线| 国产免费又黄又爽又色| 日本黄大片高清| 欧美精品国产亚洲| 国产老妇伦熟女老妇高清| 午夜免费男女啪啪视频观看| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 高清av免费在线| 男人和女人高潮做爰伦理| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 成人毛片a级毛片在线播放| 少妇的逼好多水| 国产美女午夜福利| 久久久欧美国产精品| 日韩欧美精品v在线| 色播亚洲综合网| 精品人妻一区二区三区麻豆| 国产老妇女一区| 亚洲精品色激情综合| 五月天丁香电影| 看黄色毛片网站| 2021天堂中文幕一二区在线观| 国精品久久久久久国模美| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 在线天堂最新版资源| 久久久精品94久久精品| 成人二区视频| 色网站视频免费| 久久精品综合一区二区三区| 久久久久国产精品人妻一区二区| 97超碰精品成人国产| 五月伊人婷婷丁香| 国产黄a三级三级三级人| 久久精品久久精品一区二区三区| 水蜜桃什么品种好| 18禁动态无遮挡网站| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 色5月婷婷丁香| 亚洲电影在线观看av| 2021天堂中文幕一二区在线观| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91 | 80岁老熟妇乱子伦牲交| 人妻一区二区av| 大话2 男鬼变身卡| 日韩伦理黄色片| 日韩强制内射视频| 能在线免费看毛片的网站| 干丝袜人妻中文字幕| 中国美白少妇内射xxxbb| 少妇丰满av| 久久久色成人| 波多野结衣巨乳人妻| 亚洲成人中文字幕在线播放| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 精品视频人人做人人爽| 免费看a级黄色片| 亚洲国产精品成人综合色| 国产高清三级在线| 中文天堂在线官网| 久久综合国产亚洲精品| 亚洲av在线观看美女高潮| 日本-黄色视频高清免费观看| 欧美少妇被猛烈插入视频| 香蕉精品网在线| 在线天堂最新版资源| 日韩强制内射视频| 99热这里只有精品一区| 国产有黄有色有爽视频| 久久ye,这里只有精品| 欧美极品一区二区三区四区| 国产有黄有色有爽视频| 久久久精品94久久精品| 成人鲁丝片一二三区免费| 成人免费观看视频高清| 大码成人一级视频| 久久99热6这里只有精品| 久久久久久久久久久免费av| 国产成年人精品一区二区| 久久精品国产亚洲网站| 色综合色国产| 亚洲国产欧美在线一区| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 久久亚洲国产成人精品v| 日本wwww免费看| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 秋霞伦理黄片| 26uuu在线亚洲综合色| 久久久久九九精品影院| 另类亚洲欧美激情| 又大又黄又爽视频免费| 成人无遮挡网站| 国产精品不卡视频一区二区| 少妇被粗大猛烈的视频| 禁无遮挡网站| 中文资源天堂在线| 国产伦精品一区二区三区视频9| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 内射极品少妇av片p| 国产成人91sexporn| 国产精品99久久99久久久不卡 | 少妇熟女欧美另类| 欧美人与善性xxx| 久久久久久伊人网av| 亚洲欧美日韩另类电影网站 | 国产久久久一区二区三区| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 青青草视频在线视频观看| 新久久久久国产一级毛片| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 一区二区三区四区激情视频| 欧美潮喷喷水| 99热国产这里只有精品6| av女优亚洲男人天堂| 91精品一卡2卡3卡4卡| 成人国产av品久久久| 亚洲欧美成人精品一区二区| 亚洲美女视频黄频| 久久精品国产亚洲网站| h日本视频在线播放| 久久精品综合一区二区三区| 热re99久久精品国产66热6| 欧美三级亚洲精品| 免费大片18禁| 老女人水多毛片| 国产精品福利在线免费观看| 久久午夜福利片| 免费看不卡的av| 亚洲av男天堂| 成年免费大片在线观看| 成年女人看的毛片在线观看| 国产综合精华液| 夜夜爽夜夜爽视频| 哪个播放器可以免费观看大片| 国产亚洲精品久久久com| 麻豆成人av视频| 亚州av有码| 欧美 日韩 精品 国产| 亚洲精品aⅴ在线观看| 久久韩国三级中文字幕| 日韩一区二区视频免费看| 精品一区二区免费观看| 麻豆乱淫一区二区| 精品国产露脸久久av麻豆| 亚洲av一区综合| 亚洲在线观看片| av国产免费在线观看| 国产 精品1| 网址你懂的国产日韩在线| 夫妻午夜视频| 伊人久久国产一区二区| 久久久亚洲精品成人影院| 能在线免费看毛片的网站| 色5月婷婷丁香| 五月玫瑰六月丁香| 欧美3d第一页| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 男男h啪啪无遮挡| 亚洲国产精品999| 高清av免费在线| 日日啪夜夜爽| 亚洲熟女精品中文字幕| 国产精品99久久99久久久不卡 | 国产亚洲av嫩草精品影院| 中文字幕免费在线视频6| 日日摸夜夜添夜夜爱| 男人添女人高潮全过程视频| 精品国产三级普通话版| 青春草国产在线视频| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 久久精品久久精品一区二区三区| a级一级毛片免费在线观看| xxx大片免费视频| 国产乱人偷精品视频| 亚洲成人中文字幕在线播放| 51国产日韩欧美| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 国产精品国产三级国产av玫瑰| 中文字幕亚洲精品专区| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 99久久精品国产国产毛片| 黄色一级大片看看| 我要看日韩黄色一级片| 国产探花在线观看一区二区| 亚洲国产精品专区欧美| 国产精品久久久久久久久免| 日韩av在线免费看完整版不卡| 国产精品熟女久久久久浪| 夫妻性生交免费视频一级片| 嫩草影院新地址| 中国美白少妇内射xxxbb| 日韩av免费高清视频| 亚洲天堂国产精品一区在线| 国内揄拍国产精品人妻在线| 性色av一级| 2022亚洲国产成人精品| 亚洲av免费高清在线观看| av福利片在线观看| 国产高清有码在线观看视频| 亚洲国产精品999| 亚洲内射少妇av| 亚洲人成网站高清观看| 久久久久久久久大av| 亚洲美女搞黄在线观看| 美女主播在线视频| 人妻系列 视频| 亚洲一区二区三区欧美精品 | 午夜福利在线观看免费完整高清在| 色播亚洲综合网| 亚洲欧美日韩东京热| 97在线视频观看| 成人一区二区视频在线观看| 国产成年人精品一区二区| 中文在线观看免费www的网站| 国产伦精品一区二区三区视频9| 超碰97精品在线观看| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 午夜爱爱视频在线播放| 成年女人看的毛片在线观看| 能在线免费看毛片的网站| 国产毛片a区久久久久| 在线观看美女被高潮喷水网站| 日韩在线高清观看一区二区三区| 欧美少妇被猛烈插入视频| 成人一区二区视频在线观看| 亚洲国产欧美在线一区| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 久久久久久久久大av| 亚洲精品一区蜜桃| 国产成人91sexporn| 97在线人人人人妻| 久久久成人免费电影| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 女人被狂操c到高潮| 91aial.com中文字幕在线观看| 99热6这里只有精品| 日韩av在线免费看完整版不卡| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 欧美高清性xxxxhd video| 看非洲黑人一级黄片| 成人鲁丝片一二三区免费| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 少妇人妻精品综合一区二区| 在线观看av片永久免费下载| 一本一本综合久久| 免费观看av网站的网址| 午夜老司机福利剧场| 色网站视频免费| 97热精品久久久久久| 成人免费观看视频高清| 国产精品久久久久久av不卡| 色综合色国产| 91精品伊人久久大香线蕉| 亚洲经典国产精华液单| av卡一久久| 国产毛片a区久久久久| 久久韩国三级中文字幕| 99久久九九国产精品国产免费| 卡戴珊不雅视频在线播放| 黄色日韩在线| 精品久久久久久久末码| 一个人看的www免费观看视频| 亚洲色图综合在线观看| 免费大片黄手机在线观看| 国产高清有码在线观看视频| 国产欧美亚洲国产| 色播亚洲综合网| 国产精品一区二区在线观看99| av国产久精品久网站免费入址| 99精国产麻豆久久婷婷| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 亚洲国产高清在线一区二区三| 日韩免费高清中文字幕av| 日本-黄色视频高清免费观看| 亚洲va在线va天堂va国产| 99精国产麻豆久久婷婷| 成人无遮挡网站| 欧美三级亚洲精品| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 日本色播在线视频| 熟妇人妻不卡中文字幕| 七月丁香在线播放| 午夜精品一区二区三区免费看| 亚洲欧洲日产国产| 国产精品不卡视频一区二区| 国产综合精华液| 欧美激情久久久久久爽电影| 嫩草影院入口| 免费观看av网站的网址| 亚洲国产精品成人久久小说| 日韩av在线免费看完整版不卡| 国产精品一二三区在线看| av免费观看日本| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 成人欧美大片| 激情 狠狠 欧美| 久久精品国产亚洲av涩爱| 卡戴珊不雅视频在线播放| 99精国产麻豆久久婷婷| 色婷婷久久久亚洲欧美| 中文字幕av成人在线电影| 成年免费大片在线观看| 免费观看a级毛片全部| 直男gayav资源| 亚洲国产欧美在线一区| 亚洲人成网站在线观看播放| 午夜免费鲁丝| 亚洲经典国产精华液单| 美女cb高潮喷水在线观看| 午夜福利高清视频| a级毛色黄片| 欧美bdsm另类| 观看免费一级毛片| 国产男人的电影天堂91| 亚洲欧美成人精品一区二区| 亚洲精品久久午夜乱码| 成人亚洲精品一区在线观看 | 国产国拍精品亚洲av在线观看| 午夜视频国产福利| 综合色丁香网| 欧美最新免费一区二区三区| 国产淫片久久久久久久久| 国产黄频视频在线观看|