瀉心湯實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展

★ 王安軍 王興華

(南京中醫(yī)藥大學(xué) 江蘇 南京210023)

瀉心湯(又名三黃瀉心湯)，見于漢·張仲景的《金匱要略》，由大黃二兩，黃連一兩，黃芩一兩組成，以水三升，煮取一升，頓服之。本方為治療火熱旺盛，迫血妄行而致吐血、衄血之良方。以黃連清瀉心胃之火，黃芩清上焦火，除邪以安正，大黃苦寒降泄能引火邪下行而釜底抽薪，更有推陳出新、止血消瘀之功，使血止而不留瘀。后世多沿用之以治療火熱充斥，迫血妄行的吐血、衄血、便血、尿血等多種出血證，以及濕熱黃疸、三焦積熱、高熱煩躁、便秘、瘡瘍、霍亂等證。因該方組方相對(duì)簡(jiǎn)單，臨床上應(yīng)用相當(dāng)廣泛，已成為中藥復(fù)方研究中的重點(diǎn)和熱點(diǎn)。以其為藍(lán)本開發(fā)的中成藥有一清系列制劑(包括一清片、一清膠囊、一清顆粒等)及三黃片、三黃膠囊等，已被用于治療內(nèi)、外、婦、皮膚、五官等多科疾?。?］?，F(xiàn)代藥理研究［1］表明，瀉心湯具有抗菌、抗細(xì)菌內(nèi)毒素、抗炎、促凝血止血、改善高血脂癥、改善血液粘稠度、調(diào)節(jié)血壓、降糖、保護(hù)胃黏膜、抗腦缺血再灌注損傷等作用。現(xiàn)將近五年來(lái)有關(guān)瀉心湯的實(shí)驗(yàn)研究作如下綜述。

1 配伍研究

譚正懷等［2］研究了瀉心湯各組分對(duì)小鼠的急性毒性作用及相互關(guān)系。結(jié)果表明，瀉心湯中黃連具有一定的急性毒性，黃芩可顯著降低黃連的急性毒性，是瀉心湯中的主要解毒物質(zhì)，該方的配伍從某種程度上達(dá)到了解毒的目的，具有良好的科學(xué)性，其解毒的機(jī)制可能與黃連中的生物堿能與黃芩苷或大黃蒽醌生成沉淀有關(guān)。辛穎等［3］研究了大鼠灌服三黃瀉心湯和單味大黃煎劑后大黃酸的藥代動(dòng)力學(xué)特征差異。結(jié)果:大鼠灌服三黃瀉心湯和單味大黃煎劑后，大黃酸血漿濃度-時(shí)間曲線均符合二室模型，三黃瀉心湯中大黃酸半衰期(T1/2β)、達(dá)峰濃度(Cmax/D)、血藥濃度-時(shí)間曲線下面積(AUC/D)值均顯著大于單味大黃(P＜0.01，P＜0.05)。說(shuō)明方劑的藥味配伍促進(jìn)了大黃酸的吸收利用。周昕［4］研究了大黃黃連配伍黃芩前后對(duì)常見的病原菌如大腸埃希菌、鴨沙門菌等10種細(xì)菌的抗菌作用。結(jié)果:黃芩的存在使得對(duì)某些特定菌的抗菌作用增強(qiáng)，如對(duì)大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、卡他布蘭漢球菌、鴨沙門菌，黃芩使得整個(gè)復(fù)方的抗菌能力增強(qiáng)4倍;對(duì)金黃色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌抗菌力增強(qiáng)2倍。該研究中周氏對(duì)復(fù)方的制備除浸漬外還加以煎煮，與瀉心湯制備基本相同，故對(duì)瀉心湯之配伍研究有一定參考價(jià)值。

2 質(zhì)量控制研究

耿慧春等［5］研究建立了三黃瀉心湯的HPLC指紋圖譜，10批樣品相似度均大于0.92，以黃芩苷為參照峰，標(biāo)示出32個(gè)共有峰，確認(rèn)了其中11個(gè)活性成分峰，并說(shuō)明了其藥材歸屬。較好地反映出全方整體成分質(zhì)與量的分布情況，為三黃瀉心湯及其類方的物質(zhì)基礎(chǔ)和配伍、配比規(guī)律研究提供了分析方法，為中藥復(fù)方提供了思路。

秦亞?wèn)|等［6］考察研究了用合煎、分煎方法制備的瀉心湯中游離大黃酸、大黃素、大黃酚、大黃素甲醚含量的變化，并比較了其體外抗菌作用，發(fā)現(xiàn)與分煎液相比，合煎液中游離蒽醌類成分的含量較高;合煎液對(duì)黑曲霉菌抑菌作用強(qiáng)，而對(duì)大腸桿菌的抑菌作用分煎液更強(qiáng)，對(duì)金黃色葡萄球菌、白色葡萄球菌、乙型溶血性鏈球菌的抑制作用無(wú)明顯差異。而若以鹽酸小檗堿的含量來(lái)進(jìn)行考察，梁光義等［7］的研究則表明合煎樣品中鹽酸小檗堿含量明顯低于分煎樣品中的含量;梁婷［8］、蔣品等［9，10］的研究表明分煎配方浸膏樣品中鹽酸小檗堿的含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于合煎湯劑和合煎浸膏樣品中的含量。以瀉心湯中鹽酸小檗堿含量來(lái)評(píng)價(jià)則提示分煎質(zhì)量?jī)?yōu)于合煎，而以游離蒽醌類成分的含量來(lái)評(píng)價(jià)則結(jié)果恰恰相反。因此要判斷瀉心湯分煎樣品藥效是否比合煎樣品的好，仍需進(jìn)一步通過(guò)臨床實(shí)驗(yàn)才能作出結(jié)論。另外，吳明花等［11］研究了傳統(tǒng)合煎方式和分煎后按配方混合方式制備中藥制劑對(duì)其中微量元素含量的影響。結(jié)果:在合煎制劑中鎘、汞、硒的含量較分煎制劑高，而鉛、砷較分煎制劑低。說(shuō)明不論是分煎與合煎，中藥制劑中的微量元素受到的影響各不相同，呈現(xiàn)出不同的變化。

3 藥代動(dòng)力學(xué)研究

郭雨依等［12］研究了瀉心湯中黃芩苷、大黃酸、鹽酸小檗堿在Caco-2細(xì)胞單層模型的吸收機(jī)制和相互作用。結(jié)果表明，瀉心湯藥效成分在考察的濃度范圍內(nèi)跨細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)方式為被動(dòng)擴(kuò)散，在轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程中，藥物之間無(wú)影響。譚波等［13］研究了大鼠灌服瀉心湯及其配伍組方中3種原小檗堿類生物堿(小檗堿、巴馬汀、黃連堿)尿排泄動(dòng)力學(xué)的變化。結(jié)果表明3種原小檗堿類生物堿具有類似的尿排泄特征，大黃、黃芩和黃連配伍能減少黃連堿的尿排泄量。吳家勝等［14］研究瀉心湯中蒽醌類成分在大鼠體內(nèi)尿排泄動(dòng)力學(xué)規(guī)律。結(jié)果表明瀉心湯中5種蒽醌類成分均可從尿中排泄，尿中排泄量占給藥量均＜10%。鄧翀等［15］研究表明，口服三黃瀉心湯后從血中發(fā)現(xiàn)了20個(gè)入血成分，其中3個(gè)為代謝產(chǎn)物;17個(gè)為原型成分。

4 藥理作用研究

4.1 抗細(xì)菌、細(xì)菌內(nèi)毒素(LPS)作用 肖永平等［16］研究了三黃瀉心湯與莫西沙星對(duì)55株幽門螺桿菌體外聯(lián)合抗菌效應(yīng)和臨床根除率。結(jié)果表明，三黃瀉心湯中西醫(yī)結(jié)合根除幽門螺桿菌感染的療效確切，可作為二線治療方案。周曉玲等［17］研究了三黃瀉心湯對(duì)LPS刺激小鼠RAW264.7細(xì)胞釋放炎性細(xì)胞因子的影響。結(jié)果:三黃瀉心湯及三黃瀉心湯有效組分可抑制LPS刺激小鼠RAW264.7細(xì)胞釋放腫瘤壞死因子-α(TNF-α)，并且其影響細(xì)胞因子釋放作用與細(xì)胞毒作用無(wú)關(guān)。說(shuō)明三黃瀉心湯及其有效組分 B2、B3可抑制 LPS刺激小鼠RAW264.7細(xì)胞釋放TNF-α。楊娜等［18］等研究了瀉心湯有效組分不同配比對(duì)內(nèi)毒素致死小鼠死亡率的影響。該研究將黃芩總黃酮與大黃總游離蒽醌3個(gè)配比分別以A1、A2、A3表示(游離蒽醌含量依次減少)，黃芩總黃酮與大黃總結(jié)合蒽醌3個(gè)配比分別以B1、B2、B3表示(結(jié)合蒽醌含量依次減少)。結(jié)果表明，A1的配比能明顯延長(zhǎng)卡介苗粉針(BCG)增敏小鼠受LPS攻擊后存活時(shí)間，A1、A2、A3都能夠降低LPS致小鼠死亡率，其作用強(qiáng)弱為A1＞A2＞A3，即隨著游離蒽醌在整個(gè)配比中比例的增加，其抗內(nèi)毒素作用也逐漸增強(qiáng)，但配比是否產(chǎn)生了協(xié)同作用還有待于進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)研究。A1的配比能明顯延長(zhǎng)BCG增敏小鼠受LPS攻擊后存活時(shí)間，降低死亡率，提示其可能為瀉心湯抗內(nèi)毒素有效組分的最佳配比。

4.2 重型顱腦損傷腦組織、胃粘膜保護(hù)作用 張光榮等［19，20］分別研究了三黃瀉心湯對(duì)重型顱腦外傷大鼠損傷區(qū)腦皮質(zhì)核因子(NF-κB)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)及對(duì)重型顱腦損傷大鼠胃組織NF-κB、IL-6表達(dá)的影響。結(jié)果:1.IL-6、NF-κB 在重型顱腦損傷大鼠各組腦組織中均有表達(dá)，24h陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)達(dá)到高峰，72小時(shí)開始緩慢下降。與正常對(duì)照組比較，模型各組，中藥6、24h組大鼠損傷區(qū)皮質(zhì)IL-6、NF-κB的表達(dá)含量較正常對(duì)照組明顯增加(P＜0.05，P＜0.01);與模型72h組比較，中藥72h組大鼠損傷區(qū)皮質(zhì)IL-6、NF-κB的表達(dá)含量顯著降低(P＜0.05)。2.正常對(duì)照組大鼠胃黏膜表層上皮結(jié)構(gòu)完整，腺體排列整齊;模型各組大鼠胃黏膜出現(xiàn)缺損，附近血管擴(kuò)張，炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，形成表淺糜爛;中藥組胃黏膜細(xì)胞損傷程度和毛細(xì)血管及其周圍間質(zhì)的水腫減輕，以72h組最明顯。IL-6，NF-κB在重型顱腦損傷大鼠各組胃組織中均有表達(dá)。與正常對(duì)照組比較，模型24，72h組大鼠IL-6，NF-κB的表達(dá)明顯增加(P＜0.01～0.05);與模型24h組比較，中藥24h組大鼠胃組織IL-6的表達(dá)含量顯著降低(P＜0.05);與模型72 h組比較，中藥72h組大鼠損傷區(qū)皮質(zhì)IL-6，NF-κB的表達(dá)含量顯著降低(P＜0.01～0.05)。結(jié)論:三黃瀉心湯抑制重型顱腦損傷大鼠腦組織NF-κB、IL-6及胃組織NF-κB、IL-6的表達(dá)進(jìn)而抑制炎癥反應(yīng)可能是其腦、急性胃黏膜病變保護(hù)作用的機(jī)制之一。

4.3 對(duì)心血管系統(tǒng)的影響 許東元等［21］對(duì)三黃瀉心湯水提取液舒血管作用機(jī)制的研究表明，三黃瀉心湯有濃度依賴性的血管舒張作用，此作用即不依賴血管內(nèi)皮，又和內(nèi)皮源性的舒張因子NO無(wú)關(guān)，可能與抑制血管平滑肌細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)儲(chǔ)存鈣的釋放有關(guān)。許松日等［22］研究了三黃瀉心湯水提取物對(duì)NaF誘導(dǎo)的血管平滑肌肌球蛋白結(jié)合亞單位(MYPT1)和MLC20磷酸化的影響，探討了三黃瀉心湯的降低血壓作用機(jī)制。結(jié)果:三黃瀉心湯水提取物抑制NaF誘導(dǎo)MYPT1和MLC20的磷酸化，但對(duì)由phorbol 12，13-dibutyrate誘導(dǎo)的MYPT1磷酸化無(wú)影響。結(jié)論:三黃瀉心湯提取物可抑制由NaF誘導(dǎo)的MYPT1和MLC20的磷酸化水平，通過(guò)Rho/Rho激酶信號(hào)傳導(dǎo)通路發(fā)揮作用。

4.4 對(duì)血糖、血脂、胰島素的作用 耿慧春等［23］研究三黃瀉心湯對(duì)實(shí)驗(yàn)性糖尿病模型大鼠的血糖、血脂、胰島素的影響。結(jié)果:三黃瀉心湯20g·kg-1劑量組可顯著降低糖尿病大鼠的血糖(P＜0.01)。4w治療結(jié)束后，高劑量組的血清中總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)顯著降低(P＜0.05)，胰島素水平明顯降低，在三黃瀉心湯的劑量為20g·kg-1時(shí)，其降血糖、降血脂效果同二甲雙胍相當(dāng)(P＞0.05)。結(jié)論:三黃瀉心湯對(duì)高糖高脂飼料+鏈脲佐菌素所致的糖尿病模型大鼠有顯著的降糖、降脂作用。舒華［24］的研究表明，瀉心湯能降低 TC、LDL-C，升高HDL-C水平。韓超等［25］研究發(fā)現(xiàn)大鼠注射地塞米松(DX)后出現(xiàn)了糖、脂代謝紊亂及高胰島素血癥的胰島素抵抗(IR)表現(xiàn)。瀉心湯能顯著降低模型鼠的血糖，改善糖耐量減退;降低血脂、胰島素水平和胰島素抵抗指數(shù)，提高胰島素敏感指數(shù)。認(rèn)為瀉心湯通過(guò)降糖、調(diào)脂、提高胰島素敏感性等多種途徑而發(fā)揮改善胰島素抵抗的作用。

5 結(jié)語(yǔ)

綜合以上文獻(xiàn)可知，近年來(lái)，學(xué)者對(duì)瀉心湯的藥理作用及機(jī)制又有了較深入的研究。對(duì)瀉心湯的配伍、藥代動(dòng)力學(xué)及質(zhì)量控制等方面的研究則是近些年實(shí)驗(yàn)研究的新進(jìn)展，仍有較大研究空間。用單一的成分如鹽酸小檗堿或游離蒽醌類成分含量來(lái)評(píng)價(jià)瀉心湯的質(zhì)量?jī)?yōu)劣還存在一定的局限性。中藥的療效既不是單一活性成分的作用，也不是多種成分活性的簡(jiǎn)單相加，尤其是中藥復(fù)方更是如此，單一的活性成分或指標(biāo)成分難以反映中藥所體現(xiàn)的整體療效。指紋圖譜的方法雖然考慮了盡可能多的成分，但成分與藥效之間的關(guān)聯(lián)性在現(xiàn)階段還沒有得到有效的表達(dá)。中藥質(zhì)量控制還應(yīng)考慮其中的化學(xué)成分是否能夠被吸收以及吸收后在體內(nèi)的變化，應(yīng)該控制體內(nèi)發(fā)揮療效的真正效應(yīng)物質(zhì)［26］。因此，研究中當(dāng)更加注重各有效成分之間的相互作用以及成分與藥效之間的關(guān)聯(lián)性，以求為瀉心湯的臨床應(yīng)用及新藥開發(fā)提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)及理論指導(dǎo)。

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