氟硅唑與代森錳鋅混配對梨黑星病菌的聯(lián)合毒力及田間防效

趙建江， 張小風， 王文橋， 馬志強， 韓秀英

（河北省農(nóng)林科學院植物保護研究所，河北省農(nóng)業(yè)有害生物綜合防治工程技術(shù)研究中心，農(nóng)業(yè)部華北北部作物有害生物綜合治理重點實驗室，保定 071000）

氟硅唑與代森錳鋅混配對梨黑星病菌的聯(lián)合毒力及田間防效

趙建江， 張小風， 王文橋， 馬志強， 韓秀英*

（河北省農(nóng)林科學院植物保護研究所，河北省農(nóng)業(yè)有害生物綜合防治工程技術(shù)研究中心，農(nóng)業(yè)部華北北部作物有害生物綜合治理重點實驗室，保定 071000）

摘要為了明確氟硅唑與代森錳鋅混配對梨黑星病菌的聯(lián)合毒力，采用菌絲生長速率法測定了氟硅唑、代森錳鋅及其不同配比對梨黑星病菌的毒力，以Wadley公式進行評價，并通過田間試驗驗證其對梨黑星病的防治效果。結(jié)果表明：氟硅唑與代森錳鋅質(zhì)量比為1∶20、1∶25、1∶30、1∶35和1∶40進行復配對菌絲生長均表現(xiàn)為增效，其中1∶25增效作用最明顯，增效系數(shù)為2.68；在田間藥效試驗中，40%氟硅唑乳油與80%代森錳鋅可濕性粉劑，以質(zhì)量比1∶25進行桶混，750～1 200倍稀釋對梨黑星病的防治效果均在85%以上，與其單劑40%氟硅唑乳油8 000倍和對照藥劑10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑7 000倍對梨黑星病的防治效果相當，但顯著高于其單劑80%代森錳鋅可濕性粉劑700倍的防治效果。氟硅唑與代森錳鋅以1∶25進行桶混，可以在田間推廣使用。

關(guān)鍵詞氟硅唑； 代森錳鋅； 梨黑星病菌； 增效作用； 田間防效

梨黑星?。╒enturia nashicola Tanaka et Yamamoto）是我國梨區(qū)普遍發(fā)生的重要病害。從落花到梨果采收期間均可發(fā)病，如防治不當，將會嚴重影響梨的品質(zhì)和產(chǎn)量［1］。目前，通過遺傳改良和培育抗病品種增強梨樹對黑星病的抗性已取得一定進展［2-3］，但在生產(chǎn)實際中，仍以化學防治為主。

氟硅唑是一種高效、廣譜的麥角甾醇生物合成抑制劑（EBIs），對梨黑星病具有良好的防治效果，現(xiàn)已成為防治該病害的主要藥劑。研究發(fā)現(xiàn)，河北辛集和曲陽的梨黑星病菌對氟硅唑的敏感性顯著低于泊頭和趙縣［4］。農(nóng)藥的合理復配，不但可以延緩病菌抗藥性的產(chǎn)生，提高防效，而且可以擴大殺菌譜，降低用藥成本［5-6］。如代森錳鋅與霜脲氰7∶1（質(zhì)量比）的混合物對防治馬鈴薯晚疫病具有增效作用［7］。代森錳鋅是一種廣譜性多作用位點的保護性殺菌劑，病菌對此藥劑不容易產(chǎn)生抗性，可以和多種內(nèi)吸性藥劑混配使用［8］。為了明確氟硅唑與代森錳鋅復配對梨黑星病菌是否具有增效作用，筆者進行了氟硅唑與代森錳鋅混合物對梨黑星病菌聯(lián)合毒力的測定，并進行了該混合物對梨黑星病的田間藥效評價。

1 材料與方法

1.1 供試培養(yǎng)基及菌株

馬鈴薯梨塊培養(yǎng)基（PDA＋L′）：馬鈴薯200 g，鴨梨150 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，蒸餾水1 000 m L，p H 6.0～6.2。

梨黑星病菌（Venturia nashicola）采自河北省辛集市壘頭鎮(zhèn)北小陳村，采用單孢分離法進行分離和純化，分離純化后將菌株轉(zhuǎn)接到“PDA＋L′”平板上［9］，于20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 供試藥劑

95.51%氟硅唑（flusilazole）原藥，天津久日化工有限公司提供；96%代森錳鋅（mancozeb）原藥，利民化工股份有限公司提供；40%氟硅唑乳油（flusilazole 400 EC）美國杜邦公司提供；80%代森錳鋅可濕性粉劑（mancozeb 800 WP）利民化工股份有限公司提供；10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑（difenoconazole 100 WG），瑞士先正達作物保護有限公司提供。

1.3 室內(nèi)毒力測定方法

采用菌絲生長速率法［10］測定供試藥劑對梨黑星病菌的抑制作用。分別用適量丙酮將氟硅唑和代森錳鋅原藥溶解，然后配制成質(zhì)量濃度為1 000μg／mL的母液，并按氟硅唑和代森錳鋅的不同質(zhì)量比例（1∶20、1∶25、1∶30、1∶35和1∶40）混合，得到不同配比混合液，用無菌水進行系列稀釋，按藥液與培養(yǎng)基1∶9的體積比配制成最終含藥量為10、5、1、0.5、0.1μg／mL的含藥平板。單劑氟硅唑和代森錳鋅含藥平板的含藥量分別為10、5、1、0.5、0.1、0.05μg／mL和20、10、5、1、0.5μg／mL。同時設(shè)丙酮和清水對照。用直徑5 mm的打孔器在預培養(yǎng)60 d的菌落邊緣打取菌餅，正面朝下接種到含藥平板上，每處理重復3次，置于20℃培養(yǎng)箱中，黑暗培養(yǎng)60 d后，采用十字交叉法測量各處理的菌落直徑。計算各處理濃度的抑制率，采用DPS軟件，求出氟硅唑、代森錳鋅及其混合物的毒力回歸方程，EC50值和相關(guān)系數(shù)。試驗重復2次。采用Wadley法［6］進行聯(lián)合毒力評價。

EC50（th）＝（a＋b）／［a／EC（A）50＋b／EC（B）50］

增效系數(shù)（SR）＝EC50（th）／EC50（ob）

式中A、B分別代表兩種藥劑在混劑中所占比例，ob為實際觀察值，th為理論值。SR＞1.5為增效作用；SR＝0.5～1.5為相加作用；SR＜0.5為拮抗作用。

抑制率（%）＝［（對照菌落增長直徑－處理菌落增長直徑）／對照菌落增長直徑］×100。

1.4 田間藥效試驗

田間試驗分別于2011年和2012年在河北省辛集市壘頭鎮(zhèn)北小陳村同一梨園進行。梨樹品種為‘鴨梨’，樹齡20年，株行距為3 m×6 m，梨園土壤肥力中等，梨樹長勢及管理水平一致，黑星病歷年發(fā)生。試驗設(shè)：40%氟硅唑乳油8 000倍、80%代森錳鋅可濕性粉劑700倍、10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑7 000倍、78.46%氟硅唑與代森錳鋅的混合物（質(zhì)量比1∶25）750、1 000、1 200倍和空白對照共計7個處理。每處理4次重復，共28個小區(qū)，小區(qū)隨機區(qū)組排列，每小區(qū)2株梨樹。采用泰山－18型機動高壓噴霧器均勻噴施，至流失為止，株施藥液10 L左右。梨樹落花后、病害發(fā)生前用第一次藥，以后根據(jù)病情發(fā)展和氣候條件用藥。2011年用藥時間為：4月30日、5月15日、6月3日、7月4日、7月23日、8月3日和8月23日；2012年用藥時間為：5月2日、5月18日、6月5日、7月2日、7月19日、8月10日和8月29日。

施藥前的病情指數(shù)為零，最后一次用藥后14 d調(diào)查病情。每小區(qū)調(diào)查2株，分東、南、西、北、中方向5點取樣，每點取當年生枝條的40片葉，按病葉上病斑面積占整個葉片面積的百分率分級［11］，計算病葉率、病情指數(shù)及防治效果。數(shù)據(jù)采用Fisher’s LSD法進行差異顯著性分析。

病葉率（%）＝（病葉數(shù)／調(diào)查總?cè)~片數(shù)）×100；

病情指數(shù)＝［∑（病葉數(shù)×相對級數(shù)）／（調(diào)查總?cè)~片數(shù)×最高級數(shù)）］×100。

2 結(jié)果與分析

2.1 氟硅唑與代森錳鋅混合物對梨黑星病菌菌絲生長的抑制作用

從表1可知，氟硅唑與代森錳鋅按質(zhì)量比1∶20、1∶25、1∶30、1∶35、1∶40進行混配對梨黑星病菌的菌絲生長均表現(xiàn)出良好的抑制作用，5個配比對梨黑星病菌的菌絲生長均表現(xiàn)出增效作用，當氟硅唑與代森錳鋅以1∶25進行復配時，增效作用最明顯，增效系數(shù)為2.68。

表1 氟硅唑與代森錳鋅混合物對梨黑星病菌菌絲生長的抑制作用1）Table 1 Inhibitory action of flusilazole-mancozeb mixtures against mycelial growth of Venturia nashicola

2.2 田間防治效果

從表2可知，2011年和2012年得到了相似的試驗結(jié)果。40%氟硅唑乳油與80%代森錳鋅可濕性粉劑，以有效成分質(zhì)量比1∶25進行復配，對梨黑星病表現(xiàn)出良好的防治效果。該混合物750、1 000和1 200倍稀釋，對梨黑星病的防效均在85%以上，與其單劑40%氟硅唑乳油8 000倍和對照藥劑10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑7 000倍對梨黑星病的防治效果相當，但顯著高于單劑80%代森錳鋅可濕性粉劑700倍的防治效果。

表2 不同藥劑對梨黑星病的防治效果1）Table 2 Control efficacy of different fungicides on pear scab

3 結(jié)論與討論

本研究表明，氟硅唑與代森錳鋅以質(zhì)量比1∶25混配后對梨黑星病菌的菌絲生長表現(xiàn)出良好的增效作用。該混合物750～1 200倍稀釋對梨黑星病的田間防治效果與三唑類殺菌劑40%氟硅唑乳油8 000倍和10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑7 000倍的防效相當，優(yōu)于保護劑80%代森錳鋅可濕性粉劑700倍的防效。因此，氟硅唑與代森錳鋅以1∶25進行混配可以在田間推廣使用。

氟硅唑因其殺菌譜廣、防治效果顯著等優(yōu)點而被廣泛用于真菌病害的防治。但由于該藥劑的長期單一使用，致使病原菌對其產(chǎn)生了抗藥性。Kunz等［12］早在1997年就曾報道蘋果黑星病菌對氟硅唑產(chǎn)生了較強的抗藥性，其田間防效顯著降低。本研究結(jié)果表明，氟硅唑與代森錳鋅以質(zhì)量比1∶25混配750倍稀釋時，對梨黑星病的防效高達95%，與其單劑40%氟硅唑乳油8 000倍的防效相當，但混劑中40%氟硅唑乳油的稀釋倍數(shù)為10 125倍，明顯高于其單用時的稀釋倍數(shù)。因此，氟硅唑與代森錳鋅以1∶25混配使用，可以有效地降低氟硅唑的使用劑量，從而降低氟硅唑?qū)Σ≡乃巹┻x擇壓，進而延緩梨黑星病菌對氟硅唑抗藥性的產(chǎn)生。

氟硅唑?qū)儆邴溄晴薮己铣梢种苿╊悮⒕鷦?，它是通過抑制C-14α-脫甲基化酶的活性，從而阻礙麥角甾醇的合成，進而導致病原菌的細胞膜結(jié)構(gòu)破壞和細胞死亡［13］。代森錳鋅是乙撐二硫代氨基甲酸鹽類殺菌劑，是一種典型的多作用位點的保護性殺菌劑，它主要是通過抑制病原菌體內(nèi)丙酮酸的氧化，從而抑制病原菌的呼吸。這兩種作用機理截然不同的殺菌劑混配后增效作用明顯，但是其增效機理還有待于進一步研究。

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中圖分類號：S 482.2

文獻標識碼：B

DOI：10.3969／j.issn.0529-1542.2014.03.038

收稿日期：2013-05-28

修訂日期：2013-07-22

基金項目：公益性行業(yè)（農(nóng)業(yè)）科研專項（200903033）

*通信作者E-mail：hanxiuying＠163.com

Joint-toxicity and field efficacy of mixtures of flusilazole and mancozeb against Venturia nashicola

Zhao Jianjiang， Zhang Xiaofeng， Wang Wenqiao， Ma Zhiqiang， Han Xiuying
（Plant Protection Institute，Hebei Academy of Agricultural and Forestry Sciences，IPM Center of Hebei Province，Key Laboratory of Integrated Pest Management on Crops in Northern Region of North China，Ministry of Agriculture，P.R.China，Baoding 071000，China）

AbstractIn order to clarify the synergistic interaction of flusilazole and mancozeb against Venturia nashicola，the toxicity of flusilazole，mancozeb and their mixtures at different ratios against V.nashicola was determined by mycelial growth rate test，the joint-toxicity of the two fungicides was assessed with Wadley formula，and the efficacy on controlling pear scab was assessed by field trials.The results showed that the mixtures of 1∶20，1∶25，1∶30，1∶35 and 1∶40 exhibited synergistic interaction on the mycelial growth.The synergistic effects of the 1∶25 mixture was the most obvious with synergistic ratio of 2.68.The field trials demonstrated that the mixture 750－1 200 times of flusilazole with mancozeb（1∶25，W／W）exhibited good control effect，with efficacy of over 85%，equal to that of flusilazole 400 EC 8 000 times and difenoconazole 100 WG 7 000 times，respectively，significantly higher than that of mancozeb 700 WP.The mixture of flusilazole with mancozeb（1∶25，W／W）can be widely applied in the fields.

Key wordsflusilazole； mancozeb； Venturia nashicola； synergistic interaction； field efficacy