miRNA在肝細(xì)胞癌患者預(yù)后中的應(yīng)用

文武等

[摘要] 越來越多的證據(jù)證實(shí)miRNA（microRNA）通過上調(diào)癌基因或抑制抑癌基因的表達(dá)，參與腫瘤的發(fā)生、侵襲轉(zhuǎn)移、血管形成和凋亡的過程，從而影響腫瘤患者的預(yù)后。肝細(xì)胞癌（HCC）是常見且侵襲性較強(qiáng)的惡性腫瘤之一，起病隱匿，發(fā)展迅速，惡性程度高，預(yù)后極差。究其關(guān)鍵原因是缺乏預(yù)測預(yù)后的高敏感度及高特異度的分子標(biāo)志物。而目前研究發(fā)現(xiàn)，單個或聯(lián)合多個miRNA在HCC中的異常表達(dá)可預(yù)測患者的預(yù)后。

[關(guān)鍵詞] miRNA；肝細(xì)胞癌；預(yù)后

[中圖分類號] R735.7 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 2095-0616（2014）03-37-03

miRNA（microRNA）是一類由長度約為18～25個核苷酸組成的單鏈非編碼微小RNA分子，廣泛存在于真核生物中，具有高度遺傳穩(wěn)定性，曾作為秀麗小桿線蟲發(fā)育時序調(diào)節(jié)因子被首次報(bào)道。初始miRNA轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物由核糖核酸酶Drosha和Dicerl進(jìn)行剪接后形成成熟的miRNA[1]，后者主要通過與目的基因mRNA的3'UTR結(jié)合而使mRNA 降解或抑制其翻譯，進(jìn)而發(fā)揮基因調(diào)節(jié)作用。miRNA可以通過多種途徑對腫瘤的發(fā)生、凋亡和侵襲轉(zhuǎn)移進(jìn)行調(diào)控，從而影響腫瘤患者的預(yù)后。肝細(xì)胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）是一種病死率高、生存期短的消化系統(tǒng)惡性腫瘤。在全球HCC每年新增病例國家中，中國排在第1位，占全球總發(fā)病率的一半。西方國家發(fā)病率雖不高但卻在逐年遞增[2]。眾所周知，如何改善HCC患者的預(yù)后，延長其生存期，是HCC研究中亟待解決的難題。目前大量研究表明miRNA異常表達(dá)跟HCC患者的預(yù)后密切相關(guān)，其給HCC患者的預(yù)后帶來了曙光?，F(xiàn)將就miRNA及其在HCC患者預(yù)后中的研究進(jìn)展作一綜述。

1 miRNA的生物學(xué)特性

隨著測序技術(shù)的發(fā)展，越來越多的miRNA被發(fā)現(xiàn)，截至2011年miRbase已收錄140個物種的15 000條miRNA基因位點(diǎn)和17 000條不同的miRNA序列[3]。據(jù)保守估計(jì)，約60%～70%的人類蛋白編碼基因受到miRNA的調(diào)控[4]。miRNA在表達(dá)上具有保守性、時空特異性等特點(diǎn)，參與生命的生長發(fā)育過程。Robin等[5]研究發(fā)現(xiàn)與miRNA匹配的靶基因具有保守性，而這些現(xiàn)象也存在于脊椎動物中，表明這些miRNA的功能在動物進(jìn)化過程中仍被保留。在生物體內(nèi)的miRNA也表現(xiàn)為動態(tài)調(diào)控模式，不同的發(fā)育時期和不同的疾病狀態(tài)下，miRNA表現(xiàn)出時空特異性。從miRNA生物學(xué)特性可以看出，每一種細(xì)胞在每一個發(fā)育階段表達(dá)的miRNA模式也不同，這樣可以更細(xì)微、更有效地調(diào)控RNA 轉(zhuǎn)錄體的生成和降解，在組織發(fā)育中發(fā)揮重要作用。

2 miRNA在HCC預(yù)后中的應(yīng)用

近年來，隨著miRNA研究的深入，miRNA可能成為某些腫瘤早期診斷、惡性分級及評價預(yù)后的重要指標(biāo)[6]。目前有研究表明，發(fā)現(xiàn)miRNA與HCC臨床病理及生存預(yù)后相關(guān)性也越來越密切，單個或聯(lián)合幾個miRNA表達(dá)水平可以預(yù)測HCC的預(yù)后，血清miRNA與HCC相關(guān)性研究也日益增多。HCC中miRNA的高表達(dá)可能提示患者生存時間短，預(yù)后不良，這可能與miRNA發(fā)揮類似癌基因作用，促進(jìn)HCC發(fā)生發(fā)展、侵襲轉(zhuǎn)移，降低放、化療敏感性具有相關(guān)性。反之，低表達(dá)的miRNA可能起抑癌基因作用，抑制HCC整個病變過程，從而改善預(yù)后。

2.1 單個miRNA與HCC的預(yù)后

Xie等[7]通過研究分析了hsa-miR-125b與75例HCC根治術(shù)后患者生存時間的相關(guān)性，單因素分析中顯示，高表達(dá)的hsa-miR-125b與HCC患者的生存時間延長顯著相關(guān)，分析hsa-miR-125b可能是影響HCC患者預(yù)后的預(yù)測因子。Chen等[8]采用K-M分析和多因素生存分析分析miR-203與66例HCC術(shù)后患者預(yù)后的相關(guān)性，發(fā)現(xiàn)miR-203在HCC中表達(dá)下調(diào)，miR-203過表達(dá)的HCC患者總生存期（OS）更長，高表達(dá)的miR-203是HCC預(yù)后良好的獨(dú)立預(yù)測因素，由此表明，miR-203可能是一個新的HCC預(yù)后標(biāo)志物。Wang等[9]發(fā)現(xiàn)在HCC患者中，miR-199b高表達(dá)組的生存率和無病生存率均高于相對低表達(dá)組。Zhang等[10]發(fā)現(xiàn)miR-22的靶點(diǎn)為與轉(zhuǎn)移相關(guān)的組蛋白脫乙酰酶4（HDAC4），miR-22低表達(dá)者出現(xiàn)HDAC4的相對高表達(dá)，導(dǎo)致HCC術(shù)后較早轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)，預(yù)后較差。Coulouarn等[11]發(fā)現(xiàn)在早期肝癌中miR-122表達(dá)的明顯下調(diào)與肝癌后期轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，并常伴有很差的預(yù)后。Ji等[12]發(fā)現(xiàn)miR-26表達(dá)相對低的患者比高表達(dá)者具有更長的生存期，且術(shù)后對干擾素治療有更好的反應(yīng)。miR-145在HCC細(xì)胞及組織中的低表達(dá)，可能與HCC發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，并可能作為HCC的診斷及預(yù)后的指標(biāo)[13]。韓中博等[14]報(bào)道m(xù)iR-155在腫瘤復(fù)發(fā)的HCC中過表達(dá)，其表達(dá)水平越高，患者無瘤生存期越短，提示其可作為HCC肝移植術(shù)預(yù)后判斷的分子標(biāo)志物。miRNA可用來預(yù)測肝癌術(shù)后轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)、判斷患者生存率、指導(dǎo)術(shù)后輔助治療。

2.2 多個miRNA與HCC的預(yù)后

Jiang等[15]在43對HCC的癌和癌旁組織及12例正常肝組織中，應(yīng)用實(shí)時定量PCR對182個miRNA前體進(jìn)行篩查，顯示多個miRNA在HCC中有顯著性表達(dá)，如miR-199a、-21、-301等。與無肝硬化和肝炎基礎(chǔ)的組織相比，合并有肝硬化和乙肝病毒感染的癌旁組織中miRNA有表達(dá)增多。結(jié)合患者生存率分析發(fā)現(xiàn)，大部分低表達(dá)miRNA的患者生存率低，而高表達(dá)組的生存率較高。

2.3 血清miRNA與HCC的預(yù)后

有研究表明血清miRNA可作為腫瘤診斷和預(yù)后判斷的標(biāo)志物[16]。Xiong等[17]發(fā)現(xiàn)HCC中miR-29b表達(dá)與肝癌的增殖、凋亡及預(yù)后密切相關(guān)，同時鄭建建等[18]研究分析血清miR-29b水平是影響HCC患者生存率的獨(dú)立危險因素之一，這有助于HCC的診斷和預(yù)后的評估。Li等[19]采用qRT-PCR技術(shù)檢測了46例HCC患者及20例健康正常對照組患者的血清miRNA，發(fā)現(xiàn)在HCC患者血清樣本中4種miRNA（miR-221、-222、-21、-224）不同程度的高表達(dá)，通過K-M生存分析表明，miR-221表達(dá)上調(diào)組的總生存率明顯低于表達(dá)下調(diào)組，結(jié)果表明，血清miR-221在預(yù)測HCC預(yù)后方面具有重要意義。有研究通過實(shí)時定量PCR技術(shù)檢測49例HCC患者的血清miRNA表達(dá)，發(fā)現(xiàn)miR-222在HCC患者血清中表達(dá)上調(diào)，應(yīng)用Cox比例風(fēng)險模型顯示TNM分期和miR-222表達(dá)水平是兩個主要的獨(dú)立預(yù)后因子[20]。血清miRNA 對于HCC預(yù)后判斷的研究不多，但由于其具有良好的穩(wěn)定性、檢測的無創(chuàng)性、可重復(fù)性等自身特性使其應(yīng)用于預(yù)后預(yù)測的價值日益受到重視。endprint

3 miRNA在HCC患者預(yù)后中應(yīng)用的作用機(jī)制

HCC組織中高表達(dá)的miRNA調(diào)控下游靶基因起癌基因的作用，促進(jìn)HCC的發(fā)生發(fā)展，致使預(yù)后不良，但是否可以通過干預(yù)機(jī)制調(diào)控該靶基因拮抗miRNA的過度表達(dá)，進(jìn)而抑制HCC的發(fā)生發(fā)展，提高患者的生存率，改善預(yù)后。反之，HCC組織中低表達(dá)的miRNA作用于下游靶基因可引發(fā)HCC的病變，促使其侵襲轉(zhuǎn)移，是否也可以通過干預(yù)機(jī)制調(diào)控靶基因使低表達(dá)的miRNA表達(dá)上調(diào)，從而抑制HCC的病變進(jìn)程，以此來延長患者的生存時間。異常表達(dá)的miRNA是作用于何種靶基因，而靶基因又是通過何種干預(yù)機(jī)制調(diào)控miRNA，目前這些機(jī)制還不得而知，但隨著miRNA研究的逐步深入，這些調(diào)控機(jī)制也會逐漸揭曉，進(jìn)而應(yīng)用于臨床診斷與治療，為延長HCC患者的生存時間，改善預(yù)后帶來新的希望。

4 展望

miRNA給HCC患者的預(yù)后帶來曙光，其異常表達(dá)與HCC患者的預(yù)后密切相關(guān)，是HCC療效和預(yù)后判斷的有效預(yù)測因子。正確而充分認(rèn)識HCC發(fā)病過程中的關(guān)鍵分子事件，誘導(dǎo)出與HCC發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)miRNA的表達(dá)情況將會更好地重現(xiàn)HCC進(jìn)展過程，對研究HCC的發(fā)病及轉(zhuǎn)移機(jī)制、改善預(yù)后，延長生存期等均具有非常重要的意義。

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（收稿日期：2013-12-03）endprint