免疫抑制法檢測患者血清CK-MB假性升高原因分析

李瑞，許召杰，趙鼎，宋銀森

(1、鄭州市兒童醫(yī)院檢驗科，河南 鄭州 450053；2、鄭州人民醫(yī)院，河南 鄭州 450000)

肌酸激酶CK是由M型和B型兩種單型亞單位組成的二聚酶，同工酶CK-MB作為心肌酶的生化標志物，測定方法很，包括電泳法、離子交換層析法、免疫抑制法和放射免疫法。因免疫抑制法簡便、快速、靈敏度高，而被普遍應用于臨床檢測，筆者在檢測過程中，發(fā)現(xiàn)CK-MB活性常會出現(xiàn)假性增高，其活性大于等于總CK活性，甚至接近CK活性2倍的現(xiàn)象，給臨床對AMI的診斷造成很大的困難甚至誤診。筆者就2011年10月至2013年7月兩年內(nèi)在某一綜合醫(yī)院就診的患者血清CKMB/CK比值大于30%的114例患者結(jié)果進行了統(tǒng)計分析，現(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料 2011年10月至2013年7月在某一綜合醫(yī)院就診患者中，血清CK-MB/CK比值>30%的患者114例，年齡9月～78歲，平均年齡48歲，男65名，女49例，其中惡性腫瘤患者51例，2型糖尿病患者13例，心腦血管疾病26例，類風濕性疾病患者4例，小兒支氣管炎患者4例，其余患者17例。

1.2 儀器與試劑 ROCHE MODULAR全自動生化分析儀及配套試劑盒，CK－MB測定采用免疫抑制法；CK測定采用速率法。CK-MB參考范圍為0～24U/L，CK參考范圍為0～190U/L。

1.3 方法 早晨空腹促凝管抽取靜脈血3ml，靜置10min，離心分離血清上機檢測。

1.4 數(shù)據(jù)處理 計算CK-MB/CK比值，活性及CKMB/CK比值以均值表示，按疾病類型分別統(tǒng)計CK-MB/CK>30%的例數(shù)和所占比例；以CK-MB/CK比值>1.7認為CK-MB活性接近CK活性2倍。

2 結(jié)果

2.1 血清CK-MB假性升高的疾病構(gòu)成比 114例血清CK-MB假性升高患者中，惡性腫瘤51例，占44.7%；其次為心腦血管疾病26例，占22.8%；其余疾病17例，占總數(shù)的15%；在51例CK-MB假性升高的惡性腫瘤患者中，其中有37例患者CKMB>CK，甚至有5例患者CK-MB活性接近CK總活性的2倍，而在其他類型疾病中，未有患者CKMB活性接近CK總活性的2倍。

2.2 血清CK-MB假性升高患者的CK、CK-MB平均活性及CK-MB/CK平均比值 114例血清CKMB假性升高患者的CK、CK-MB平均活性和CKMB/CK平均比值，分別得到152.4U/L、156.8U/L和1.03。其中以惡性腫瘤最高，CK、CK-MB平均活性和CK-MB/CK平均比值分別為195.2U/L、238.9U/L和 1.22。

3 討論

在114例CK-MB假性升高的患者血清中，惡性腫瘤占絕大多數(shù)，占總數(shù)的44.7%，與馬驄[1]等報道一致，其中CK-MB>CK有37例，占了惡性腫瘤患者比例的72%；甚至有5例患者血清中，其CKMB活性接近總CK活性的2倍，而在其他CK-MB假性升高疾病中均未出現(xiàn)CK-MB活性到接近總CK活性2倍的病例，結(jié)果顯示當CK-MB活性接近總CK活性的2倍時，應高度警惕惡性腫瘤的可能。其次為心腦血管疾病，占22.8%。

免疫抑制法測定血清CK-MB出現(xiàn)假性升高的原因，由于方法學原理，筆者認為有以下原因：(1)方法學的選擇對檢測結(jié)果的影響。首先，免疫抑制法測定CK-MB方法設計的前提是CK-BB忽略不計，其次是抗M抗體將M亞基完全抑制(ROCHE廠方標示CK-M亞基可以抑制至99.6%)，測B亞基活性，結(jié)果乘以2即得CK-MB活性，但如果存在 CK-BB就會使結(jié)果偏高，即測得CK-MB活性等于CK-MB加2CK-BB。由于結(jié)果要乘以2，這樣2CK-BB加CK-MB大于CK-BB加CK-MB加CK-MM，即得出了CK-MB活性高于總CK活性的結(jié)果。所以，CK-MB高于CK是可能的，但高于2倍則不可能[2]。顯而易見，凡可使CK-BB升高的疾病或抗M抗體質(zhì)量均可使CKMB結(jié)果假性升高。

(2)巨CK干擾[3]。巨CK是巨分子酶，正常情況下相應的酶有著高分子團，不被抗CK-M抗血清所抑制，表現(xiàn)為血清中CK-MB占總CK活力50%以上，而CK活力正常、輕度或中度增高。巨CK大部分情況下是酶與免疫球蛋白的結(jié)合物，稱巨肌酸激酶1(巨CK1)，通常免疫球蛋白是IgA和IgG，偶見IgM，當形成復合物時，CK-MB試劑中的抗M抗體不但不能抑制CK-M，而且因計算時結(jié)果乘以2，更加擴大了誤差。而巨肌酸激酶2(巨CK2)是一種不正常低聚的線粒體CK(CK-MT)。CK-MT抗原性與CK-M不同，抗M抗體不能抑制CK-MT，故形成CK-MB的假性升高。

(3)CK-BB增高。在某些惡性腫瘤患者、腦神經(jīng)損傷或嚴重平滑肌損傷患者血清中可有CK-BB增高，或發(fā)現(xiàn)巨CK2或巨CK1。此種情況下免疫抑制法測得的CK-MB由于CK－BB的異常而使結(jié)果假性升高，甚至大于總CK。

(4)樣本溶血的影響。溶血樣本因含高水平腺苷酸激酶，ATP和葡萄糖-6-磷酸，干擾分析，使CK-MB結(jié)果假性升高，這一分析在林其燧[4]等編寫的書籍中有提及。

筆者認為在分析免疫抑制法檢測CK-MB活性結(jié)果時，應注意以下幾點[5]：(1)CK-MB<16U/L時屬陰性，不用計算占總CK的比值；(2)CK-MB/CK比值參考范圍在4%～25%，至多也不大于30%；(3)要按公式計算CK-MB占總CK的%值，并判斷其影響因子；若CK-MB/CK比值大于>25%，表明存在著心肌梗死以外的因素，即說明有異常同工酶存在，包括CK-BB或巨CK1、CK2。(4)結(jié)合其他指標如肌鈣蛋白(cTnI)、心電圖等聯(lián)合分析；(5)改用電泳法或質(zhì)量法檢測CK－MB進行相互驗證。綜上所述,應用免疫抑制法檢測CK-MB,因血液中有巨CK、CK-MT等干擾導致結(jié)果偏高,存在一定的臨床假陽性。因此,在發(fā)現(xiàn)用免疫抑制法檢測CKMB活性高于CK總活性時,切不可輕易發(fā)出錯誤報告,建議用電泳法和CK-MB單克隆抗體免疫法,因與免疫抑制法有互補作用,可最終確定有無CKBB或巨CK的干擾,力爭使檢測結(jié)果達到“真值”,避免方法學原因?qū)е聶z驗差錯[6]。另外，檢驗醫(yī)師應與臨床醫(yī)生多溝通,消除臨床醫(yī)生對檢驗結(jié)果的誤解,同時為其提供檢驗方面知識,避免造成錯誤診斷。

[1]馬驄,李艷君,王海東,等.血清CK-MB/CK大于30%的病因分析[J].現(xiàn)代檢驗醫(yī)學雜志,2003,18(3):63-64.

[2]王洋,褚福樓,王 歡,等.惡性腫瘤患者血清肌酸激酶同工酶高于肌酸激酶異常結(jié)果的探討[J].中國民康醫(yī)學,2012,24(4):385-386.

[3]王愛華,顧鵬飛,樊笑霞,等.巨分子酶在常規(guī)檢驗中的“干擾”及其鑒別方法[J].上海醫(yī)學檢驗雜志,2002,17(5):274-276.

[4]林其燧,文慶成.臨床化學診斷方法大全[M].北京:北京大學出版社,1990：750-754.

[5]韓志鈞,黃志鋒,盧業(yè)成,等.臨床化學常用項目自動分析法[M].第3版.沈陽:遼寧科學技術(shù)出版社,2005:785-786.

[6]葉應嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].第3版.南京:東南大學出版社,2006:447.