網(wǎng)箱養(yǎng)殖密度對虹鱒甲狀腺激素及血脂指標(biāo)的影響

劉 群 溫海深 李吉方 何 峰

(中國海洋大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院, 青島 266003)

網(wǎng)箱養(yǎng)殖密度對虹鱒甲狀腺激素及血脂指標(biāo)的影響

劉 群 溫海深 李吉方 何 峰

(中國海洋大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院, 青島 266003)

為研究網(wǎng)箱養(yǎng)殖密度對虹鱒甲狀腺激素及血脂指標(biāo)的影響, 測定了血液中游離甲狀腺激素T3(FT3)、游離甲狀腺激素 T4(FT4)、甘油三酯(TG)和總膽固醇(TC)含量, 檢測了高密度脅迫對肝臟和腸中 IGF-Ⅰ和肝臟、腎臟中 TR-α表達(dá)的影響。結(jié)果顯示, 隨著養(yǎng)殖密度的升高 FT3和 FT4的含量逐漸降低, 并且在 11月份之前含量與養(yǎng)殖時間成正相關(guān)性; 血清中TG含量隨著密度的升高而降低, TC隨著密度升高而升高, 并且與溫度存在負(fù)相關(guān)性, 在11月份時密度處理組3(GR3)中的TG含量顯著低于密度處理組1(GR1), 翌年1月份時3個密度處理組間都存在顯著性差異(P＜0.05); 而IGF-Ⅰ和TR-α也隨著養(yǎng)殖密度的增加表達(dá)量逐漸降低。結(jié)果說明高密度網(wǎng)箱養(yǎng)殖作為一種環(huán)境脅迫因子使得血清中FT3和FT4含量降低, 從而影響虹鱒魚的生長發(fā)育, 這一現(xiàn)象與特定生長率(SGR)的變化趨勢一致。甲狀腺激素含量的降低使得 TR-α表達(dá)量降低,實(shí)驗(yàn)中IGF-Ⅰ的表達(dá)與甲狀腺激素含量也存在相關(guān)性, 甲狀腺激素是否調(diào)控IGF-Ⅰ的表達(dá)有待于進(jìn)一步的研究。

虹鱒; FT3; FT4; TG; IGF-Ⅰ; TR-α

自然界中的魚類經(jīng)常會對所處的環(huán)境壓力做出反應(yīng), 這些壓力主要有個體間的食物競爭、水溫的變化、捕撈帶來的物理刺激以及養(yǎng)殖密度等[1—3]。高養(yǎng)殖密度作為一種環(huán)境脅迫因子對虹鱒的生長會產(chǎn)生負(fù)面影響[4]。魚類長時間處于高密度養(yǎng)殖脅迫下,機(jī)體的神經(jīng)內(nèi)分泌就會發(fā)生變化, 進(jìn)而導(dǎo)致魚體生理生化發(fā)生變化, 基于生理生化狀態(tài)的變化, 魚類在行為上表現(xiàn)為生長速率減慢、抗病能力下降等[5]。

與哺乳動物一樣, 魚類的生長發(fā)育主要受到生長激素(GH)[6]和甲狀腺激素(TH; T3和T4)的調(diào)節(jié)。生長激素通過介導(dǎo)類胰島素生長因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)的分泌來控制動物的生長和發(fā)育[7,8]。魚類 IGF-Ⅰ由兩條鏈通過二硫鍵連接而成, 主要在肝臟中合成, 通過血液運(yùn)輸?shù)礁鱾€組織來促進(jìn)機(jī)體的生長和組織分化[9]。自1957年Salmon和Daughaday首次發(fā)現(xiàn)類胰島素生長因子(IGFs)來, 其受到越來越多的關(guān)注[10]。Mccomick等研究發(fā)現(xiàn)銀大麻哈魚(Oncorhynchus keta)在注射豬的IGF-Ⅰ時, 其生長率能快速提高[11]; Kagawa等用免疫化學(xué)技術(shù)證實(shí)紅鯛(Pagrus major)IGF-Ⅰ參與雌激素的合成并促進(jìn)卵細(xì)胞的成熟[12]。甲狀腺激素通過甲狀腺激素受體(TR)介導(dǎo)調(diào)節(jié)生物體的生長、分化以及物質(zhì)代謝, TR是核受體超家族的一員, 廣泛分布于體內(nèi)各組織, 在介導(dǎo)T3過程中處于核心地位[13]。TR從氨基端到羧基端可分為A-F6個功能區(qū), 其中A/B區(qū)為轉(zhuǎn)錄激活區(qū), C區(qū)為DNA結(jié)合區(qū), E區(qū)為配體結(jié)合區(qū)而F區(qū)的功能尚未明確[14]。

血脂主要指血漿中的中性脂肪(甘油三酯和膽固醇)和類脂。血清中血脂的變化是反映動物應(yīng)激時體內(nèi)物質(zhì)代謝和組織器官機(jī)能狀態(tài)變化的一個重要特征[15]。并且血液中甲狀腺激素能促進(jìn)機(jī)體脂肪和糖類的代謝, 因此激素水平影響血脂含量。

虹鱒(Oncorhynchus mykiss)隸屬于鮭科(Salmonidae)鮭屬。原產(chǎn)于美國阿拉斯加地區(qū)的山澗溪流中, 1866年引種到美國東部、日本、東亞地區(qū), 現(xiàn)已成為世界養(yǎng)殖的名貴魚種。虹鱒肉質(zhì)肥厚, 細(xì)膩, 刺少,富含蛋白質(zhì)和脂肪, 因此深受消費(fèi)者的喜愛, 目前為了追逐更大的經(jīng)濟(jì)效益, 虹鱒網(wǎng)箱養(yǎng)殖的密度越來越大, 過高的養(yǎng)殖密度會對虹鱒的生長產(chǎn)生不利影響[16]。本文主要研究了不同密度的網(wǎng)箱養(yǎng)殖對虹鱒血清中游離T3(FT3)和游離T4(FT4)含量的影響以及甘油三酯(Triglyceride, TG)和總膽固醇(Total cholesterin, TC)的變化, 同時也研究了網(wǎng)箱養(yǎng)殖密度對虹鱒IGF-Ⅰ和TR-α的mRNA表達(dá)的影響, 以期了解高密度養(yǎng)殖對虹鱒影響的生理以及分子機(jī)制, 探究IGF-Ⅰ和TR-α在高密度脅迫下其表達(dá)的內(nèi)在機(jī)理,為豐富魚類內(nèi)分泌學(xué)提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)魚來源與樣品采集

實(shí)驗(yàn)地點(diǎn)在劉家峽水庫, 劉家峽水庫地處黃河上游, 位于甘肅省永靖縣內(nèi)。此處淡水資源特別豐富, 一年的大部分時間水溫在 20℃以下, 因此特別適合虹鱒、鱘魚等冷水性魚類的養(yǎng)殖。實(shí)驗(yàn)所用的虹鱒放養(yǎng)在規(guī)格一致的網(wǎng)箱(3 m×3 m×3 m)中, 最初放養(yǎng)密度為4.5 (GR1)、6.6 (GR2)和8.6 kg/m3(GR3), 每個密度設(shè)3個重復(fù)。每天8:00和17:00各投喂餌料一次, 餌料主要成分粗蛋白40%、粗脂肪26%和碳水化合物14%。在投喂之前用多功能水質(zhì)檢測儀測定水溫、pH以及溶解氧(表1)。

每兩個月采樣一次, 從每個平行組中隨機(jī)取 4尾魚, 迅速進(jìn)行麻醉處理(MS-222, 40—45 g/m3), 待實(shí)驗(yàn)魚無掙扎現(xiàn)象時稱重(±0.1 g), 并測量生物學(xué)指標(biāo)。用尾靜脈取血方式, 將血樣打入1.5 mL的離心管中放于4℃的冰箱中6h自然分層, 12000 r/min離心10min后取血清。采用放射性同位素(125I)標(biāo)記的放射免疫測定法(RIA)測定血清中 FT3和 FT4, 用BS-180全自動生化分析儀測定血清中TG和TC。采集完血樣迅速解剖各組織, 液氮中速凍然后轉(zhuǎn)移至–80℃超低溫冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 試劑

實(shí)驗(yàn)中測定FT3和FT4所需的試劑盒購于天津九鼎醫(yī)學(xué)生物有限公司, 測定血清TG和TC所需的試劑盒購于深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司,表達(dá)所需的引物均由生工生物工程(上海)有限公司合成, RNA提取過程中所需試劑RNAiso Reagent、Taq酶、DNaseⅠ(RNasefree)、RNasin、RNA酶抑制劑以及表達(dá)所需要的 SYBR Premix Ex Taq購自TaKaRa公司。

1.3 實(shí)時定量 PCR標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立以及目的基因的定量

利用 Primer5.0根據(jù)已經(jīng)克隆得到的 IGF-Ⅰ(M95183.1)和 TR-α(AF302245.1)cDNA的序列設(shè)計(jì)實(shí)時定量表達(dá)引物(表 2), 其中 IGF-Ⅰ片段長度為176 bp, TR-α片段長度為140 bp。

表1 不同采樣時間養(yǎng)殖水體指標(biāo)的變化Tab. 1 Changes of water parameters at different sampling times

表2 虹鱒IGF-Ⅰ、TR-α以及18S基因表達(dá)所用的引物Tab. 2 Primers used for IGF-Ⅰ, TR-α and 18S of O. mykiss

對樣品cDNA進(jìn)行10倍梯度稀釋, 以稀釋后的cDNA為模板進(jìn)行實(shí)時定量PCR, 每個模板2個重復(fù)。反應(yīng)體系: SYBR Premix Ex Taq 10 μL、上下游引物各0.5 μL, 模板2 μL, 加ddH2O至20 μL。反應(yīng)條件: 95℃預(yù)變性1min; 95℃變性10s, 60℃ (TR-α的退火溫度為62℃) 退火40s, 72℃延伸40s, 共40個循環(huán)。實(shí)時連續(xù)測定擴(kuò)增過程中產(chǎn)生的熒光, 建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。對樣品中的cDNA進(jìn)行目的基因擴(kuò)增,反應(yīng)體系以及反應(yīng)條件與標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立一致, 另外每個樣品設(shè)2個重復(fù)。

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

根據(jù)實(shí)時熒光定量PCR的結(jié)果, 以18S為內(nèi)參基因, 根據(jù)目的基因以及 18S的 Ct值, 按照 2–ΔΔCt法計(jì)算目的基因的相對表達(dá)情況。將所有實(shí)驗(yàn)結(jié)果運(yùn)用 SPSS軟件的單因子方差分析(One-Way ANOVA)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析, 若達(dá)到顯著性差異則進(jìn)行Duncan’s多重比較各實(shí)驗(yàn)組間差異的顯著性。數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示, 以P＜0.05為有顯著性差異。最后用Excel 2010作圖。

2 結(jié)果

2.1 不同密度網(wǎng)箱養(yǎng)殖虹鱒血清中FT3和FT4含量的變化

從圖1中可以看出FT3的變化趨勢與FT4的一致, 在每個采樣點(diǎn)時密度越高虹鱒魚體中FT3和FT4的含量越低, 在11月份時GR1顯著高于GR3 (P＜0.05); 11月份之前, 每個處理組中FT3和FT4含量隨著養(yǎng)殖時間的延長含量逐漸增加, 11月份之后則與養(yǎng)殖時間成負(fù)相關(guān)性。11月份以后, 兩種激素含量的變換與溫度也存在正相關(guān)性, 溫度越低其含量越低, 相反溫度越高其含量也升高。另外將兩種激素含量與特定生長率(SGR)進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析時發(fā)現(xiàn), 甲狀腺激素含量越高對應(yīng)的時間段內(nèi) SGR越高, 兩種激素在9—11月份有一個明顯的升高趨勢, 對應(yīng)月份的 SGR也在整個實(shí)驗(yàn)過程中有明顯的升高。

圖1 不同密度網(wǎng)箱養(yǎng)殖對虹鱒FT3和FT4濃度的影響以及實(shí)驗(yàn)過程中水溫和特定生長率的變化Fig. 1 Effects of different stocking density on the contents of FT3 and FT4 of O. mykiss, and changes of water temperature and Specific growth rate (SGR)

2.2 不同密度網(wǎng)箱養(yǎng)殖對血清TG和TC含量的影響

從圖2可以看出血脂含量與溫度的變化存在相關(guān)性, 溫度低的月份血脂含量就越高相反溫度越高其含量就越低。在每個采樣點(diǎn)時, 網(wǎng)箱養(yǎng)殖密度越高能導(dǎo)致甘油三酯含量降低, 如圖2B所示, 在11月份時GR3中的TG含量顯著低于GR1, 而翌年1月份時三個密度處理組間都存在顯著性差異(P＜0.05)。TC隨網(wǎng)箱養(yǎng)殖密度增加有增加趨勢, 但這種變化不明顯(P＞0.05)。

2.3 IGF-Ⅰ和TR-α的組織表達(dá)

采用RT-PCR技術(shù)檢測了IGF-Ⅰ和TR-α在肝臟、腎臟、脾臟、心、腦、頭腎、肌肉、腸、盲囊和鰓10種組織中的表達(dá)情況(圖3)。結(jié)果顯示IGF-Ⅰ在肝臟和腸中表達(dá)比較豐富, 在肌肉、脾、心、盲囊和腎中都有表達(dá)而在頭腎、腦和鰓中表達(dá)量很少或沒有表達(dá); TR-α在 10種組織中都有表達(dá), 其中在腎臟、肝臟、腦和鰓中表達(dá)量較為豐富而在其他組織中表達(dá)量較少。因此在后面的實(shí)驗(yàn)中選擇肝臟和腸作為檢測不同網(wǎng)箱密度對虹鱒 IGF-Ⅰ表達(dá)影響的研究對象, 選擇腎臟和肝臟作為檢測不同網(wǎng)箱密度對虹鱒TR-α表達(dá)影響的研究對象。

圖2 不同密度網(wǎng)箱養(yǎng)殖對虹鱒TG、TC含量的影響Fig. 2 Effects of different stocking density on the contents of TG and TC of O. mykiss

圖3 虹鱒IGF-Ⅰ和TR-α基因在組織中的表達(dá)Fig. 3 The expression of IGF-Ⅰand TR-α in O. mykiss

2.4 不同密度網(wǎng)箱養(yǎng)殖對虹鱒 IGF-Ⅰ和 TR-α表達(dá)的影響

由圖 4A、B可知, IGF-Ⅰ在肝臟和腸中的表達(dá)呈現(xiàn)一個先升高后降低的過程, 并且高密度導(dǎo)致其表達(dá)量降低。在 11月份時, 肝臟中 IGF-Ⅰ的表達(dá)在GR1、GR2與GR3間存在顯著性差異(P＜0.05); 腸道中GR1中IGF-Ⅰ的表達(dá)也顯著高于 GR3 (P＜0.05)。不同密度的網(wǎng)箱養(yǎng)殖對 TR-α表達(dá)的影響如圖4C、D所示, 隨著養(yǎng)殖時間的延長先升高后下降。在11月份時, 肝臟中TR-α的表達(dá)在 GR1和 GR3間存在顯著性差異(P＜0.05),此時腎臟中 GR2和 GR3的表達(dá)量也顯著低于GR1(P＜0.05)。

3 討論

魚類的生長是一個魚體對環(huán)境適應(yīng)的過程, 因此環(huán)境因子的變化都會影響魚類的生長和發(fā)育。影響魚類生長的環(huán)境因子很多包括水溫、鹽度[17—20]、光照[21,22]、水流以及養(yǎng)殖密度等。高密度養(yǎng)殖是獲得水體利用率的最好方式, 因此近年來人們?yōu)榱俗分鸶蟮慕?jīng)濟(jì)效益不斷擴(kuò)大魚類的養(yǎng)殖密度。高密度養(yǎng)殖使得魚類的生長率和成活率降低, 發(fā)病率升高[23, 24]。

IGF家族包括很多成員IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ以及兩者的受體, 其中 IGF-Ⅰ具有調(diào)節(jié)細(xì)胞代謝、促進(jìn)細(xì)胞生長以及分化的作用。眾所周知魚類的生長受到“下丘腦-垂體-肝臟軸”的調(diào)控, IGF-Ⅰ是生長激素(GH)發(fā)揮促生長作用的中介因子, 單獨(dú)的 GH不能促進(jìn)魚類的生長。研究報(bào)道稱給虹鱒注射一定劑量的 GH, 發(fā)現(xiàn)對生長沒有促進(jìn)作用[25], 而直接注射IGF-Ⅰ能使銀大麻哈魚的生長速率加快[26], 同時Shepherd等發(fā)現(xiàn)海水養(yǎng)殖的羅非魚(Oreochromis mossambicus)腦垂體中的 GH升高, 血漿中的 IGF-Ⅰ也升高[27]。魚類中IGF-Ⅰ在很多組織中都有表達(dá),對魚類的研究中發(fā)現(xiàn)IGF-Ⅰ在腦、肌肉、心臟、腸道、肝臟、性腺組織中都有表達(dá)[28]并且隨著魚體發(fā)育階段不同在組織中的表達(dá)豐度也不同[29]。本研究也發(fā)現(xiàn)IGF-Ⅰ在很多組織中都有表達(dá)并且在肝臟和腎臟中表達(dá)量比較豐富。影響IGF-Ⅰ在魚體中表達(dá)的因素很多, 鯉(Cyprinus carpio)在饑餓處理時肝臟中IGF-Ⅰ的表達(dá)量降低, 恢復(fù)投喂后其表達(dá)量逐漸恢復(fù)[30]。在本研究中IGF-Ⅰ隨著養(yǎng)殖密度的升高表達(dá)量降低, 這說明高密度作為一種環(huán)境脅迫影響虹鱒魚體的生長, 在11月份IGF-Ⅰ表達(dá)量最高, 這與9—10月份SGR最高一致。

圖4 不同密度網(wǎng)箱養(yǎng)殖對虹鱒肝臟(A)和腸(B)中IGF-ⅠmRNA及肝臟(C)和腎臟(D)中TR-α mRNA的影響Fig. 4 A and B indicate the effects of different stocking density on the mRNA level of IGF-Ⅰin liver (A)and the intestines of O. mykiss(B) and TR-α in liver(C) and kidney(D)

甲狀腺激素也能促進(jìn)魚類的生長發(fā)育, 硬骨魚類的甲狀腺主要合成甲狀腺激素T4, 而T3是T4在肝臟和腎臟組織中脫碘轉(zhuǎn)化而來。血液中的甲狀腺激素有兩種形式一種是與血液中的蛋白質(zhì)結(jié)合的結(jié)合性, 另一種是游離狀態(tài)即FT3和FT4。甲狀腺激素對動物體的促生長作用受很多環(huán)境因子的影響,在鹽度處理對尼羅羅非魚(Oreochromis niloticus)血液中 T3的影響時發(fā)現(xiàn)處理初期 T3有升高的趨勢,隨著處理時間的延長T3含量降低, 說明鹽度處理早期作為一種脅迫因子促進(jìn) T3的合成使得魚體代謝機(jī)能加強(qiáng)以應(yīng)對這種環(huán)境脅迫, 而隨著時間的延長通過減少 T3的分泌減少能量的消耗這樣魚體的生長就受到限制, 這是魚體對環(huán)境的一種適應(yīng)[31]。在本研究中高密度作為一種環(huán)境脅迫因子使得虹鱒血清中FT3和FT4的含量逐漸降低, 因此高密度處理組的虹鱒魚體生長比較緩慢, 這與SGR生長率表達(dá)的結(jié)果一致, 這說明高密度養(yǎng)殖限制了甲狀腺激素對魚體生長的積極作用這與 Brown等的研究相同[32]。但Vijayan和Leatherland 在研究放養(yǎng)密度對美洲紅點(diǎn)鮭(Salvelinus fontinalis)的影響時卻發(fā)現(xiàn), 120 kg/m3養(yǎng)殖密度處理組的T3和 T4含量均低于60 kg/m3的處理組的T3和T4含量[33]。他對此的解釋是高密度脅迫下甲狀腺激素下降是由于皮質(zhì)醇分泌增加造成的。與本研究結(jié)果相左的原因可能是養(yǎng)殖密度不同以及選擇的魚種不同。業(yè)已證明游離狀態(tài)的甲狀腺激素與甲狀腺激素受體(TR)才能發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng), TR分為TR-α和TR-β兩個亞型。田娟等發(fā)現(xiàn)TR在大菱鲆(Scophthatmus maximus)的很多組織中都有表達(dá), 并且在肝臟和腎臟中表達(dá)豐富[34],這與本研究結(jié)果一致, TR-α在虹鱒很多組織中也有表達(dá), 并且在肝臟和腎臟表達(dá)量比較高。低濃度的T3處理能使得大菱鲆肝臟中 TR-α表達(dá)量升高, 本研究在整個實(shí)驗(yàn)過程中 TR-α的表達(dá)與FT3和FT4的含量成正相關(guān)性, 養(yǎng)殖密度升高導(dǎo)致的 FT3和FT4含量降低, 使得TR-α表達(dá)量也相應(yīng)的降低。

TG和TC在血液中均由脂蛋白轉(zhuǎn)運(yùn), 兩者是動物細(xì)胞儲存脂肪的主要形式和細(xì)胞膜的重要組分,并且魚類血脂水平的變化與機(jī)體的代謝狀態(tài)以及生理狀態(tài)密切相關(guān), 被廣泛用于評價魚體健康及魚類對環(huán)境的適應(yīng)能力。本研究中影響血脂含量的因素有兩方面: 一是不同月份水溫的變化, 二是同一個采樣點(diǎn)不同密度的網(wǎng)箱養(yǎng)殖。有研究報(bào)道稱低溫處理 36h后可以使得大黃魚(Pseudosciaena crocea)血清TG和TC含量升高[35], 而動物在熱應(yīng)激狀態(tài)下攝食量減少使得機(jī)體動用體內(nèi)儲備的營養(yǎng)物質(zhì)來提供能量, 因此血液中血脂含量相應(yīng)的也減少[36]。Di Marco等在研究密度脅迫對歐洲狼鱸(Dicentrarchus labrax)的影響時發(fā)現(xiàn)隨著養(yǎng)殖密度的升高(15—45 kg/m3)魚體血液中 TC含量隨之升高, 但是當(dāng)升高到一定值就不會隨密度變化而變化[37]。張磊等在研究擁擠脅迫對鯉魚的影響時發(fā)現(xiàn), 高密度處理組鯉魚體內(nèi)游離脂肪酸(FFA)含量顯著高于低密度組[38]。Leatherland等的研究也發(fā)現(xiàn)高密度脅迫使得虹鱒血液中FFA含量增加, 而TG含量減少, 這說明魚體通過加速脂肪分解產(chǎn)生應(yīng)對脅迫所需的能量[39]。本研究發(fā)現(xiàn)在水溫較低的月份虹鱒血清TG和TC含量較高, 7月份水溫在18.2℃左右高于虹鱒的最適溫度范圍, 此時大部分魚位于網(wǎng)箱底部, 攝食率較低因此血清中TG和TC含量較低, 另外虹鱒在面臨低溫脅迫時通過儲存脂肪來維持體溫, 因此低溫時機(jī)體的血脂含量較高。而在11月份和翌年1月份時虹鱒體內(nèi) TG含量與密度存在負(fù)相關(guān)性, 這是因?yàn)榄h(huán)境的“擁擠”使得魚體需要消耗能量來應(yīng)對這種脅迫, 通過甘油三酯的分解來提供所需的能量, 所以密度越高 TG含量越低。另外血脂含量與甲狀腺激素存在相關(guān)性。在人體中甲狀腺激素對血脂的代謝影響有促進(jìn)合成及分解的雙重作用, 在正常范圍內(nèi)存在負(fù)相關(guān)性[40], 在本研究中甲狀腺激素與TG和TC含量也存在負(fù)相關(guān)性, 因此可以推測本實(shí)驗(yàn)測得甲狀腺激素范圍是虹鱒的正常范圍。

另外有研究發(fā)現(xiàn), 甲狀腺激素對IGF-Ⅰ基因的表達(dá)存在潛在的調(diào)控作用[29]。用 T3處理的羅非魚肝臟中IGF-Ⅰ表達(dá)水平明顯升高[41], 在斑馬魚種外源性T3在體內(nèi)和體外實(shí)驗(yàn)中都能使得IGF-Ⅰ的表達(dá)升高。在本研究中 IGF-Ⅰ的表達(dá)與 FT3和 FT4的含量也存在正相關(guān)性, 是否受到甲狀腺激素的調(diào)控需要進(jìn)一步的研究。

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EFFECTS OF DIFFERENT STOCKING DENSITY ON THE LEVELS OF THYRIOID HORMONE AND PLASMA LIPIDS IN ONCORHYNCHUS MYKISS

LIU Qun, WEN Hai-Shen, LI Ji-Fang and HE Feng
(College of Fisheries, Ocean University of China, Qingdao 266003, China)

The aims of this study were to evaluate the effects of stocking density of Oncorhynchus mykiss that were reared in net cages on free triiodothyronine (FT3), free thyroxine (FT4), triglyceride (TG) and total cholesterin (TC) levels, and the expression of IGF-I and TR-α. The results showed that FT3 and FT4 levels decreased gradually as the stocking density increased, and they were positively associated with the culture time before November. TG levels decreased as the stocking density increased while TC levels increased as the stocking density increased and both TG and TC levels were negatively associated with the culture temperature. Moreover, TG levels in the treatment group 3(GR3) were significantly lower than those in the treatment group 1(GR1) in November, and significant differences were observed among the three treatments in January of the following year (P ＜ 0.05). Additionally, the expression levels of IGF-I and TR-α decreased gradually as the stocking density increased. These results indicate that high stocking density could be a stressor for O. mykiss, that nd that may reduce FT3 and FT4 levels in the blood and then affect the growth and development of fish, which is supported by the trend of special growth rate (SGR). There was a relationship between thyroid hormone and the expression of IGF-I, The levels of thyroid hormone was related to the expression of IGF-I; however further investigation is needed to study whether thyroid hormone regulates the expression.

Oncorhynchus mykiss; FT3; FT4; TG; IGF-Ⅰ; TR-α

S965.2

A

1000-3207(2014)06-1076-08

10.7541/2014.158

2013-12-02;

2014-03-07

國家公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(xiàng)經(jīng)費(fèi)項(xiàng)目(201003055)資助

劉群(1985—), 女, 山東濱州人; 博士; 研究方向?yàn)轸~類生理學(xué)。E-mail: lq1985527@163.com

溫海深(1963—), 男, 博士; 教授; 研究方向?yàn)轸~類生理與繁育。E-mail: wenhaishen@ouc.edu.cn