天然抑菌劑用于中藥飲片無硫貯存的研究進展

龔道鋒

(合肥工業(yè)大學，安徽 合肥 230009；亳州職業(yè)技術學院，安徽 亳州 236800)

劉耀武，王甫成

(亳州職業(yè)技術學院，安徽 亳州 236800)

張霄翔

(合肥工業(yè)大學，安徽 合肥 230009)

張蕾

(亳州職業(yè)技術學院，安徽 亳州 236800)

在中藥飲片長期貯存的過程中，因空氣溫度、濕度的影響，水分過高，飲片就會蟲蛀、霉爛，特別是含淀粉較多的中藥飲片如白芍、山藥、川貝母等，很容易吸收空氣中的水分，當表面水分增加時，就使霉菌寄生，同時淀粉又為霉菌的生長提供充足的養(yǎng)分，最終藥材霉爛變質。根據(jù)霉菌的生長條件，經(jīng)常翻曬并保持干燥是解決中藥材霉變的有效途徑，但是，隨著中藥材及飲片數(shù)量的增大，其勞動強度增加，而且露天翻曬增加中藥飲片被外界環(huán)境污染的幾率，不符合GMP對藥品生產(chǎn)的要求。因此，為了延長貯存時間，傳統(tǒng)的加工方法常在干燥前后用硫黃熏制。但是近年來的研究發(fā)現(xiàn)，藥材經(jīng)硫熏后硫化物殘留，影響藥材的安全性，有些藥材熏硫過后有效成分大為降低，如白芷；同時熏硫對環(huán)境也會造成污染。因此，現(xiàn)行版《中國藥典》已不使用該加工方法。但是如何防止中藥材霉爛的問題卻依然沒有解決。無硫中藥材和中藥飲片的研究是擺在中藥材及中藥飲片的技術型難題。其實，很多中藥材自身就具有一些抗霉菌活性的成分，中藥的對抗貯存就是很好的例子。但是傳統(tǒng)的對抗貯存所涉及的中藥材數(shù)量太少，而且隨著生產(chǎn)經(jīng)營規(guī)模的擴大，以及經(jīng)濟效益的考慮，其在工業(yè)化生產(chǎn)過程中的使用受到了限制?，F(xiàn)就引起中藥材霉變的霉菌種類及近二十年內(nèi)天然抑菌劑在中藥材防霉的研究情況做一個概述。

1 引起中藥材霉變的常見霉菌種類

石瑞棉等[1]從104 種中藥材中分離出霉菌菌株1174 株，其中檢出率最高的是曲霉屬、青霉屬、毛霉屬和根霉屬，其次是枝孢霉屬、木霉屬、擬青霉屬和頭孢霉屬等。在一定的溫度(2～35℃)和相對濕度(>85%)的條件下，藥材含水量超過15%，有些微生物能產(chǎn)生有毒的真菌毒素，甚至在溫度5℃左右就會導致霉菌繁衍，如單端孢霉烯族毒素、赭曲霉毒素、展青霉素、玉米赤霉烯酮、伏馬毒素、黃曲霉毒素等低溫條件下生產(chǎn)的霉菌。

2 抑菌研究概況

2.1 草果及高良姜揮發(fā)油的抑菌作用

謝小梅等[2]用草果及高良姜提取的揮發(fā)油對容易霉變的中藥黨參、沙參、甘草、山藥、桔梗、川牛膝粉進行抗霉菌作用的實驗，在本實驗中發(fā)現(xiàn)，草果、高良姜揮發(fā)油對食物、中藥材及其制品的6種致霉菌(枯青霉、黑曲霉、產(chǎn)黃青霉、黑根霉、黃綠青霉、黃曲霉)有明顯的抗霉菌作用，其最低抑菌濃度和最低殺菌濃度幾乎相等。另外，在有效的抑菌濃度范圍以內(nèi)，使用草果、高良姜的揮發(fā)油無細胞毒性，且這兩藥品的價格比較便宜，因此，它們具有作為一種安全、高效、價廉的抑菌防霉劑的開發(fā)潛力。

2.2 陳皮、藿香、艾葉和桂皮醛等的抑菌作用

孫紅祥用陳皮、藿香、艾葉、花椒、野菊花、山慈菇、肉桂、白芷、小茴香等揮發(fā)性中藥材的提取物對短帚霉、總狀共頭霉、互隔交鏈孢霉、蠟葉芽枝霉、柔毛葡柄霉、葡萄孢霉、雜色曲霉、黑曲霉、土曲霉、焦曲霉、皺褶青霉、產(chǎn)紫青霉、草酸青霉、繩狀青霉、圓弧青霉和鐮刀菌等16種菌株進行抑菌實驗研究。實驗結果表明9種中藥及其揮發(fā)性成分具有不同程度的抑制霉菌的作用，其中以陳皮、藿香、艾葉的抗霉菌活性較強，白芷、茴香作用較弱。桂皮醛、茴香醛、丁香油、香草醛、山梨酸、薄荷油、冰片和桉葉油7種揮發(fā)油中，桂皮醛、茴香醛、丁香油和香草醛均具有較強的抑菌作用，其中桂皮醛的作用最強，山梨酸、薄荷油、冰片和桉葉油的抑菌效果較差。且陳皮、藿香、艾葉和桂皮醛來源豐富、價格低廉[3]。

2.3 桂皮醛、丁香油的抑菌作用

張文娟用桂皮醛、丁香油對自霉變中藥材及藥材庫內(nèi)空氣中分離的黃曲霉、黑曲霉、雜曲霉、赭曲霉、溫特曲霉、產(chǎn)黃青霉、皮落青霉、覃青霉、枯青霉、長枝木霉、根霉、毛霉、互隔交鏈孢霉、粉紅單端孢霉、蠟葉枝孢霉、茄病鐮刀酶菌、禾谷鐮刀菌、燕麥鐮刀酶等18種霉菌進行抑菌實驗，實驗結果顯示桂皮醛、丁香油對各受試菌株均具有明顯的抗菌作用，通過透射電鏡觀察桂皮醛可以破壞酶菌的細胞壁，從而使霉菌的胞漿凝固、細胞器溶解消失，最終致霉菌細胞死亡。將桂皮醛、丁香油用于模擬藥庫實驗，結果表明庫內(nèi)中藥材1年后仍然未見霉變現(xiàn)象[4]。

2.4 丁香、黃柏的抑菌作用

王蘭等[5]用丁香、黃柏等中藥材對擬青霉、黑曲霉、米曲霉、毛霉等4種菌株進行抑菌實驗。單味中藥的抑菌作用結果表明：丁香對4種菌均有較強的抑制作用，黃柏對擬青、霉黑曲霉具有較強的抑制作用，抑菌率可達50%以上，對米曲霉、毛霉的抑制率相對較低，約為10%～30%。

2.5 山蒼子油的抑菌作用

山蒼子油對大多數(shù)致霉菌，如黑曲霉、黃曲霉、雜色曲霉、黑根霉等的MIC為1.77mg/L，并對黃曲霉產(chǎn)毒具有明顯抑制作用。有研究結果[6]表明：山蒼子油的成分復雜，其主要成分為香茅醛、甲基庚烯酮、枸櫞醛、C-蛇麻烯、C-蒎烯、莰烯等。另有報道，山蒼子葉油對幾種常見的致霉菌(黃曲霉、黑曲霉、黑根霉等)也具有很強的抗霉菌活性。其主要成分為橙花椒醇、3，7-二甲苯-1， 6-辛二烯醇和C-羅勒烯。

2.6 山胡椒果水蒸油的抑菌作用

用山胡椒果水蒸油對常見的幾種霉菌( 黃曲霉、黑曲霉、黑根霉等) 進行抑菌活性實驗，結果表明具有明顯的抑制作用，其MIC為1.0～1.5ml/L。揚得坡等采用GC-MS分析出山胡椒果水蒸氣蒸餾法提取的揮發(fā)油的主要成分為表水昌蒲乙酯7.29%、正十二烷酸10. 08%、大根香葉烯A 10.71%、正癸酸25.39%。分別用分離的4種成分再進行抑制霉菌活性實驗，均具有較好的抑菌活性，且其MIC相當均為1.0～1.5ml/L[7]。

2.7 海帶、昆布等海藻的抑菌作用

陳成等[8,9]用海帶、昆布等對中藥材進行防霉實驗。將藥材與海帶按100∶1的比例放置，并每2周將海帶取出晾曬后重新放入原貯存藥材中,如此反復操作,將其與沒有放置海帶的同種藥材對照發(fā)現(xiàn)，7d后放入海帶的藥材各種酶菌量明顯減少。表明海帶等有抑制霉菌生長作用。但是其抑菌活性成分不明確。對其抑菌的機理有待進一步考證。

3 結語

從上述研究可以看出目前的天然抑菌劑的品種單一，主要集中在揮發(fā)性成分抑菌活性的研究上，整個研究進程依然處于起步階段，對于抑菌劑的有效成分及有效部位的確認還需要做大量的工作。而且中藥材及中藥飲片使用抑菌劑滅菌，不僅僅要考慮到配伍禁忌，而且還應在中醫(yī)藥理論指導下，考慮這些抑菌劑對中藥材及中藥飲片藥效的影響。因此，對于無毒有效的天然抑菌劑的抑菌活性的研究用于中藥材工業(yè)化的加工及貯存還需要進行大量研究與論證工作。但其具有較為廣闊的研究與應用前景，并已有成功的先例，日本有家企業(yè)將具有0.01%～0.05%香草醛的聚烯烴樹脂加工成包裝袋，用于防腐。

[參考文獻]

[1]石瑞棉,吳鳳嬌,溫尚開.藥材中常見霉菌種類[J].基層中藥雜志,1992,6(4):20-22.

[2] 謝小梅，龍凱，鐘裔榮，等.草果防霉作用的實驗研究[J].中國藥業(yè),2002,11(5):45-46.

[3] 孫紅祥.一些中藥及其揮發(fā)性成分抗霉菌活性研究[J].中國中藥雜志,2001,26(2):27-30.

[4] 張文娟.中藥材藥物防霉的研究[J].中國中藥雜志,1994,19(9):532-534.

[5] 王蘭，張麗娟，張芳紅，等.黃柏、苦參、陳皮、高良姜等中藥材的體外防霉活性研究[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志,2010,20(8):1942-1943.

[6] 王發(fā)松,揚得坡,任三香,等.山蒼子葉揮發(fā)油的化學成分與抗真菌活性[J].中藥材,1999,22(8):400-402.

[7] 揚得彼,王發(fā)松,任三香,等.山胡椒果揮發(fā)油化學成分與抗真菌活性[J].中藥材,1999,22(6):295-298.

[8] 陳成.海帶預防中藥霉變與蟲蛀[J].中藥材,1991,14(11):48.

[9] 張國璽.昆布、海帶用作中藥材的防霉[J].天津藥學,1996,8(3):41.