乳房炎奶牛組織和血液病理學(xué)研究進展

齊宏亮，李 婧，張 涌，2＊，高明清，2＊

（1.西北農(nóng)林科技大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院，陜西楊凌712100；2.農(nóng)業(yè)部動物生物技術(shù)重點實驗室，陜西楊凌712100）

奶牛乳房炎的主要特點是乳汁發(fā)生理化及細(xì)菌學(xué)變化、乳腺組織不同程度的病理改變及全身血液指標(biāo)的變化。由于引起乳房炎的原因復(fù)雜，而且乳房對不同類型刺激源反應(yīng)的劇烈程度不一，乳房炎的嚴(yán)重程度變化范圍也很大，使得乳房炎在分類上也比較復(fù)雜。根據(jù)乳房炎奶牛的臨床表現(xiàn)可將乳房炎分為臨床型乳房炎和隱性乳房炎。本文綜述了臨床型乳房炎和隱性乳房炎的臨床癥狀、組織學(xué)及血液學(xué)病理學(xué)改變，為奶牛乳房炎的預(yù)防、診斷及鑒別診斷、治療、控制提供參考資料。

1 臨床癥狀

臨床型乳房炎奶牛的乳汁和乳房一般有肉眼可見的明顯變化，主要表現(xiàn)為不同程度的乳腺的炎癥反應(yīng)及乳汁中出現(xiàn)凝塊或顏色發(fā)生改變［1-3］。臨床型乳房炎的類型及病性嚴(yán)重程度不同，患病奶牛的全身癥狀有所不同。重度臨床乳房炎患病乳區(qū)表現(xiàn)急性腫脹、發(fā)熱、疼痛、觸摸堅硬；患牛泌乳量減少，乳汁呈水樣乳或血樣乳，常常伴隨全身癥狀，表現(xiàn)為體溫升高、脈搏增速、精神沉郁、食欲減退、體質(zhì)衰弱；輕度臨床型乳房炎可見患牛乳房輕度發(fā)熱、疼痛或不熱不痛，可能腫脹，乳汁異常但無血液出現(xiàn)［3-4］。

隱性乳房炎奶牛常無明顯的臨床癥狀?；寂＞駹顟B(tài)良好、飲食正常、觸診乳房無疼痛反應(yīng)、質(zhì)地柔韌；乳汁一般無肉眼可見的變化，但乳汁pH、導(dǎo)電率和乳汁中的體細(xì)胞數(shù)、氯化物值等理化性質(zhì)均已發(fā)生變化，較正常為高。鏡檢可見乳汁中含有較多的嗜中性白細(xì)胞和乳腺上皮。乳汁存放時間明顯縮短，易酸敗變質(zhì)，出現(xiàn)絮狀沉淀［1，5］。

2 乳腺組織病理學(xué)變化

臨床型乳房炎奶牛的病情和發(fā)病性質(zhì)不同，乳腺組織會呈現(xiàn)不同的病理變化［6］。漿液性乳房炎患牛乳腺組織腺泡腔內(nèi)有滲出物，并混有少量的脫落上皮細(xì)胞和中性粒細(xì)胞，腺泡上皮細(xì)胞呈顆粒變性、脂肪變性并伴有脫落，間質(zhì)有明顯的炎性水腫、血管充血和中性粒細(xì)胞浸潤；卡他性乳房炎奶牛腺泡腔及導(dǎo)管內(nèi)有多量脫落上皮細(xì)胞和白細(xì)胞浸潤；間質(zhì)水腫并有炎性細(xì)胞浸潤。出血性乳腺炎奶牛腺泡腔及導(dǎo)管內(nèi)蓄積紅細(xì)胞，上皮細(xì)胞變性和脫落；間質(zhì)內(nèi)血管充血，有時可見到血栓形成；纖維素性乳房炎腺泡腔內(nèi)有纖維素網(wǎng)，同時上皮細(xì)胞變性脫落，以及間質(zhì)少量的中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞浸潤。化膿性乳房炎奶牛腺泡及導(dǎo)管系統(tǒng)的上皮細(xì)胞顯著壞死脫落，并形成組織缺損，管腔內(nèi)的滲出物中有大量壞死崩解組織、中性粒細(xì)胞；間質(zhì)內(nèi)亦有多數(shù)中性粒細(xì)胞浸潤［7］。此外，臨床型乳房炎奶牛乳腺組織中的肥大細(xì)胞數(shù)量高于正常奶牛，并且主要分布在乳腺血管附近、腺泡和腺管間［8］。

隱性乳房炎奶牛常無明顯病理變化或僅見輕微的炎性反應(yīng)。張慶茹發(fā)現(xiàn)隱性乳房炎奶牛的乳腺組織主要以不同的滲出性變化為主，輕度時腺泡上皮發(fā)生顆粒變性、透明滴樣變和輕度的脂肪變性。隨病情發(fā)展，間質(zhì)中毛細(xì)血管明顯擴張充血，腺泡上皮發(fā)生較嚴(yán)重的顆粒變性和脂肪變性，部分乳管中有中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞浸潤［9］。超微結(jié)構(gòu)觀察發(fā)現(xiàn)，發(fā)病早期腺泡上皮細(xì)胞線粒體腫大，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)脫落，胞漿中散在大量核糖核蛋白體，并有脂肪滴。晚期時腺泡上皮細(xì)胞線粒體腫大或崩解，核糖核蛋白體降解，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)斷裂，胞核發(fā)生濃縮［10］。

3 血液病理學(xué)變化

血液在機體內(nèi)起著十分重要的作用，除了起到輸送養(yǎng)料和排出代謝產(chǎn)物的功能外，還具有防御、免疫、體液調(diào)節(jié)及維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)的作用。因此，血液中血細(xì)胞參數(shù)、血漿蛋白成分及血流變等指標(biāo)均可在一定程度上反映乳房炎奶牛的發(fā)病情況。

3.1 血常規(guī)變化

臨床型乳房炎患牛血液中白細(xì)胞總數(shù)、中性粒細(xì)胞總數(shù)及兩者比例均增高［11-12］。大量的白細(xì)胞釋放TNF-α等炎性細(xì)胞因子增多，可進一步加劇乳房炎的病情。因此，乳房炎癥狀越嚴(yán)重的奶牛，上述指標(biāo)的變化越明顯［13］。個別的臨床型乳房炎奶牛伴有紅細(xì)胞和血紅蛋白降低，可能是由于病牛營養(yǎng)消耗增加或采食量減少引起的營養(yǎng)性貧血導(dǎo)致［11-12］。

隱性乳房炎患牛血液中白細(xì)胞總數(shù)及分類計數(shù)無明顯變化，但機體的亞健康狀態(tài)引起的紅細(xì)胞生成素增多會導(dǎo)致紅細(xì)胞和血紅蛋白增高。而奶牛營養(yǎng)性貧血也可引起血常規(guī)的上述變化［12］。對于隱性乳房炎的診斷，郭昌明等［14］總結(jié)的檢測方法有體細(xì)胞計數(shù)檢測法、手握式導(dǎo)電儀檢測法、凝固酶試驗、單克隆抗體的免疫方法、PCR檢測法等。奶牛養(yǎng)殖場可根據(jù)實際情況選用合適的方法進行診斷和鑒別診斷。

臨床型和隱性乳房炎血液中血小板計數(shù)、血小板壓積、平均血小板體積和血小板體積分布寬度與健康的奶牛均無顯著差異［11-12，15］。因此，血常規(guī)的化驗指標(biāo)不能作為臨床型和隱性乳房炎的判定依據(jù)。

3.2 血漿成分的變化

3.2.1 急性時相蛋白的變化 當(dāng)急性炎癥或組織損傷時，患牛某些血漿蛋白水平增高，這些血漿蛋白被稱為急性時相蛋白。已有研究表明，患乳房炎時牛奶中急性時相蛋白的含量發(fā)生明顯變化，這在奶牛乳房炎的早期診斷中具有重要參考價值［16-17］。楊永新等［18］通過差異蛋白質(zhì)組學(xué)的研究發(fā)現(xiàn)，急性時相蛋白-結(jié)合珠蛋白在臨床型乳房炎奶牛血漿中表達量升高，可作為奶牛乳房炎的診斷標(biāo)記分子。并且結(jié)合珠蛋白在金黃色葡萄球菌誘導(dǎo)的隱性乳房炎奶牛血漿和牛乳中的含量均升高［19-20］。在大腸埃希菌源性的乳房炎的比較蛋白質(zhì)組學(xué)研究中發(fā)現(xiàn)，除了結(jié)合珠蛋白，αⅠ酸性糖蛋白、CPXV138蛋白和血清淀粉樣蛋白A的表達在奶牛血漿中均增加，而轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白和載脂蛋白CⅡ的表達下降［21］。血清淀粉樣蛋白A在輕度臨床型乳房炎奶牛的血清和乳汁中的含量均顯著上升［22-23］。αⅠ酸性糖蛋白在重度克雷伯肺炎菌引起的乳房炎奶牛血清中含量明顯增加［24］。夏志等［25］通過全自動生化分析儀對34頭臨床型乳房炎和38頭正常奶牛血清中多種重要的急性時相蛋白水平與乳房炎發(fā)病的相關(guān)性分析，發(fā)現(xiàn)乳房炎奶牛血清中白蛋白（ALB）和丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）明顯增高，可作為奶牛臨床型乳房炎的血液學(xué)診斷指標(biāo)。

3.2.2 酶類物質(zhì)的變化 乳汁中的N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）的活性變化是判斷乳腺感染和乳腺損傷程度的良好指標(biāo)［26］。堿性磷酸酶（ALP）在臨床上常用來協(xié)助鑒別感染性質(zhì)［27］。張磊等［28］研究發(fā)現(xiàn)，ALP和NAG活性在臨床型乳房炎奶牛的血清中顯著增高，但是其含量在隱性乳房炎和健康奶牛血清中的含量無明顯差異。在檢測乳房炎奶牛血清中抗氧化物酶活性的變化時發(fā)現(xiàn)，血清中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH）、過氧化氫酶（CAT）活性顯著低于健康奶牛，預(yù)示著乳房炎奶牛機體中的抗氧化酶活力減弱［29-30］。

3.2.3 血清免疫球蛋白變化 對細(xì)菌起防御作用的免 疫 球 蛋 白 有4種，即IgG1、IgG2、IgA 和IgM［31］。奶?；既橄傺讜r，乳汁中免疫球蛋白的濃度變化與乳腺感染的病原菌有關(guān)。大腸埃希菌毒力成分脂多糖（LPS）經(jīng)乳導(dǎo)管誘導(dǎo)奶牛乳腺炎后，可引起乳汁中IgG1和IgG2含量增高；而金黃色葡萄球菌毒力成分脂磷壁酸（LTA）只誘導(dǎo)IgG2含量的增高，不影響IgG1在乳汁中含量的變化［32］。當(dāng)奶?；加信R床型乳房炎時血清中IgG和IgM含量顯著升高，而隱性乳房炎奶牛血清中IgG和IgM含量無明顯變化。IgG在乳房炎患牛的發(fā)病過程中更為敏感，但血清中IgG含量的增加究竟是IgG1還是IgG2，尚需進一步的研究［28，33］。

3.2.4 血清中微量元素的變化 生物體內(nèi)的微量元素和維生素在清除自由基的過程中發(fā)揮著重要的生理功能。劉平平等［34］研究發(fā)現(xiàn)，乳房炎奶牛血清中Zn含量低于健康奶牛，并與炎癥程度呈負(fù)相關(guān)性；Cu和Fe含量高于健康奶牛，與炎癥程度呈正相關(guān)性，提示奶牛血清中微量元素含量的變化與乳房炎奶牛的發(fā)病嚴(yán)重程度存在著一定的相關(guān)性。但最新的一項研究表明乳房炎奶牛血清中Fe濃度顯著低于健康奶牛，可作為奶牛急性炎癥反應(yīng)的指標(biāo)［35］，這與前面提到的Fe含量在乳腺炎時升高不相一致，有待于進一步證實。尹柏雙等［36］發(fā)現(xiàn)乳房炎奶牛血清中維生素E、維生素C和硒含量低于健康奶牛，而Cu含量顯著增高，這些變化降低了體內(nèi)抗氧化物酶的活性，造成體內(nèi)自由基蓄積，加劇自由基對乳腺的氧化損傷。

3.2.5 血液中細(xì)胞因子變化 細(xì)胞因子在機體免疫應(yīng)答和炎癥反應(yīng)中發(fā)揮著重要的作用。臨床型乳房炎奶牛血清中IL-1β、IL-8、TNF-α水平均顯著高于健康奶牛和隱性乳房炎奶牛，而健康奶牛和隱性乳房炎奶牛血清中上述細(xì)胞因子差異不顯著，提示血清中TNF-α、I L-1β和IL-8含量與乳房炎的發(fā)病程度呈正相關(guān)，可作為乳房炎治療效果的評價指標(biāo)［13，24］。

3.3 血液流變學(xué)變化

研究發(fā)現(xiàn)臨床型乳房炎奶牛的血液流變學(xué)性質(zhì)異常，表現(xiàn)為在一定切變率下的全血黏度、全血比黏度及其還原全血黏度、還原全血比黏度、紅細(xì)胞電泳時間均顯著升高；隱性乳房炎奶牛除了在低切變率測定下全血比黏度增高外，其他檢測項目無明顯異常，表明血液流變性質(zhì)的異常與乳房炎癥狀的發(fā)病程度呈正相關(guān)，可作為乳房炎診斷和治療效果的評價指標(biāo)［13，37］。

4 結(jié)語

乳房炎是危害奶牛養(yǎng)殖業(yè)最常見的疾病之一，而患隱性乳房炎時，由于病理變化輕微和無明顯的臨床癥狀，其危害較臨床型乳房炎更為嚴(yán)重。臨床癥狀、組織病理學(xué)以及血液病理學(xué)變化可為奶牛乳房炎鑒別診斷、治療、預(yù)后以及預(yù)防提供良好的指導(dǎo)作用，由于血液病理學(xué)變化作為一個全身性的指標(biāo)，其在乳房炎發(fā)病過程中的特異性變化需要進一步研究，所以在乳房炎的診療過程中需綜合考慮各種因素。

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